"HTR-8/SVneo epithelioid cells人绒毛膜滋养层细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
细胞复苏相关注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。4.离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
VeroE6细胞系相关产品:HANK细胞、SF 767细胞、A-20细胞
OB2细胞系相关产品:Lieming Xu-2细胞、OCI/AML4细胞、A2780细胞
C1R细胞系相关产品:HEK-293细胞、UMNSAH-DF1细胞、NOR 10细胞
细胞生长:贴壁
HTR-8/SVneo epithelioid cells人绒毛膜滋养层细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞复苏基本方法:1.从液氮罐中取出安剖;有时因安剖未封严,浸入了液氮,取出后因安剖内液氮迅速气化而发生爆炸,因此应带有防护眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上盖并不时摇动,尽快解冻。3.剪开纱布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,净化台上打开盖,用吸管吸出细胞悬液,装入离心管中,再补加10ml培养液,吹打使细胞悬浮。4.低速离心(500~1000转/分)5分钟,取上清后再重复用培养液漂洗、离心。5.加入培养液适当稀释后,再移装入培养瓶中,置温箱培养,次日更换一次培养液后再继续培养。收到T25 flask细胞时,处理方式为:在寄送过程中,为避免起泡造成细胞脱落死亡,T25 flask均加满培养基。请检查flask外观,并于显微镜下观察细胞生长状况和有无污染现象,若有任何问题,不要打开盖子,请立即通知细胞实验室。将原封之T25 flask静置于37°C,5%CO2培养箱中,使细胞回温至37°C,并让运送过程中少数脱落的细胞可再附着生长。隔天后,于无菌操作箱内取出flask内之培养基(取出之培养基可以再使用),仅留约5-10ml培养基于flask内,依一般培养方式再将细胞置入培养箱中,或细胞已长满盘,则将细胞做传代培养。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
TMK-1细胞系相关产品:MGHU3细胞、SF 295细胞、BOWES细胞
SKOV-3细胞系相关产品:MOLT 3细胞、MADB-106细胞、G-292细胞
Nakata-1细胞系相关产品:H2172细胞、JVM-2细胞、NCIADRRES细胞
H-774细胞系相关产品:GM00637细胞、SKNBE细胞、GB-1细胞
HFT8810细胞系相关产品:MV 3细胞、Bac12F5细胞、CCD1095Sk细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HTR-8/SVneo epithelioid cells人绒毛膜滋养层细胞系
细胞生长特性:贴壁
细胞形态特性:上皮细胞样
培养细胞真的不难,最关键几点:1)所有的东西使用,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,最近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
LSC-1细胞系相关产品:NCIH1703细胞、NIH 3T3细胞、CF-1 MEF细胞
HSAS1细胞系相关产品:hEM15A细胞、NSH细胞、rHSC-99细胞
Ramos细胞系相关产品:CAL51细胞、PC-9细胞、C32 mel细胞
L-cell细胞系相关产品:MC116细胞、TW-039细胞、NCI-H1755细胞
MDA-MB-134VI细胞系相关产品:OCI-AML3细胞、LM-TK-细胞、NCI-H2087细胞
HSC5细胞系相关产品:SW 900细胞、AR42J细胞、H-510A细胞
HuT-102细胞系相关产品:102PT细胞、SK-UT-1细胞、P3-X63Ag8细胞
Anip[973]细胞系相关产品:B16BL6细胞、WTRL1细胞、293-EBNA细胞
WI-38细胞系相关产品:RD细胞、LMTK-细胞、OCI-AML3细胞
Hs 600.T细胞系相关产品:B 95.8细胞、SuDHL 1细胞、H1963细胞
HTR-8/SVneo epithelioid cells人绒毛膜滋养层细胞系
Hs-606-T细胞系相关产品:SKES1细胞、NCIH1838细胞、LP-1细胞
Panc 02细胞系相关产品:T47-D细胞、Hs675T细胞、Pan02细胞
NCI-747细胞系相关产品:Ramos-2G6-4C10细胞、CHG5细胞、FRO81-2细胞
AM38细胞系相关产品:RPMI8226/S细胞、VMRCLCD细胞、Co 205细胞
RCC10 RGB细胞系相关产品:HCC1187细胞、HEC-1B细胞、Rat Skin 1细胞
SNU216细胞系相关产品:MyLa 2059细胞、DI-TNC1细胞、HeLa细胞
SNU216细胞系相关产品:MyLa 2059细胞、DI-TNC1细胞、HeLa细胞
PSN-1细胞系相关产品:BJ1细胞、NB-19细胞、293E细胞
HIMEC细胞系相关产品:NCI-157细胞、2V6.11细胞、SCL-2细胞
SW1990细胞系相关产品:SNU1040细胞、CACO2细胞、C-4I细胞
SK.OV.3细胞系相关产品:HME1细胞、NUGC2细胞、Emory University-2细胞
HS940细胞系相关产品:Panc_02_03细胞、Anip-973细胞、A-9细胞
Glioma 261细胞系相关产品:A431细胞、KYSE450细胞、WM 115细胞
A2780/Taxol细胞系相关产品:RT112细胞、OVMANA细胞、HSC/mHSC细胞
N1E115细胞系相关产品:ST-2细胞、Calu-6细胞、Kit225 K6细胞
MDA-MB361细胞系相关产品:DMS-53细胞、LA4细胞、Mouse Podocyte Clone-5细胞
U-373MG ATCC细胞系相关产品:IPLB-Sf21-AE细胞、A2780-CP细胞、HK-2 [Human kidney]细胞
A2058细胞系相关产品:SW-480细胞、AMC-HN8细胞、A7r5细胞
MOLM16细胞系相关产品:16-HBE14o细胞、CEM-CCRF细胞、HSF细胞
JB6 Cl 30-7b细胞系相关产品:T-ALL-1细胞、Jurkat-77细胞、NCI-H2030细胞
UPCI:SCC090细胞系相关产品:alpha-TC1.6细胞、HP615细胞、EFM-19细胞
NCI-H1651细胞系相关产品:Caco-2/ATCC细胞、NCI/ADRRES细胞、ARO 81-1细胞
NCI-H727细胞系相关产品:T-ALL 1细胞、NCI-H1993细胞、KG-1细胞
HCE-2 [50.B1]细胞系相关产品:G-401细胞、HRA-19细胞、NCIH378细胞
H125细胞系相关产品:MOLM16细胞、LLC-WRC 256细胞、RPPVEC细胞
KG-1a细胞系相关产品:HVSMC细胞、ROS17/28细胞、QG-56细胞
MDAMB134VI细胞系相关产品:R2C细胞、HCC0015细胞、RPMI 1846细胞
PC12(高分化)细胞系相关产品:Oregon J-111细胞、HO-1-N-1细胞、PC3细胞
H-522细胞系相关产品:HEK-293-F细胞、HTR8/SVneo细胞、H-1703细胞
SUM-190细胞系相关产品:NCI-H1355细胞、FL62891细胞、Oka-C1细胞
Mhh-Call 2细胞系相关产品:GP2-293细胞、RBVEC细胞、J 774A.1细胞
Institute for Medical Research-32细胞系相关产品:MDA-415细胞、HCC1187细胞、COLO357细胞
ACC3细胞系相关产品:SU.86细胞、Detroit562细胞、OC-316细胞
MonoMac 6细胞系相关产品:MDA-MB-231-luc细胞、LA795细胞、AMC-HN-8细胞
MFE-280细胞系相关产品:HSAS3细胞、JB6Cl30细胞、L- cell细胞
BSC-1细胞系相关产品:COV 504细胞、Tn5B1-4细胞、RBMVEC细胞
T241细胞系相关产品:JeKo 1细胞、VMCUB1细胞、MRC5细胞
PANC 813细胞系相关产品:HCT GEO细胞、MESSADX5细胞、PM6细胞
NCI-H-69细胞系相关产品:DHL-8细胞、HCT116细胞、Fao细胞
WEHI-3细胞系相关产品:BERH-2细胞、PC-12细胞、SKGT4细胞
COLO 201细胞系相关产品:Madin Darby Canine Kidney细胞、HuP-T3细胞、Bovine Turbinate细胞
Karpas422细胞系相关产品:CAL 12细胞、Hepa 1-6细胞、W133细胞
Walker-256细胞系相关产品:AR4-IP细胞、HCC0366细胞、HEL-92_1_7细胞
B/C3T3细胞系相关产品:NCI-H1672细胞、HMC细胞、HNE3细胞
MC-CAR细胞系相关产品:NSH细胞、SKLU1细胞、BE2M17细胞
JM细胞系相关产品:NCI-H929细胞、Pro-5WgaRI3C细胞、GM03190A细胞
HAPI细胞系相关产品:ARO细胞、H1944细胞、NCIH2227细胞
HEK293-H细胞系相关产品:SKNMC细胞、OCI AML4细胞、U87MG细胞
TE-32细胞系相关产品:P3-Jiyoye细胞、hTERT-RPE细胞、EVSAT细胞
WM239细胞系相关产品:GM03320D细胞、SNU-423细胞、TU 686细胞
hFOB 1.19细胞系相关产品:HTR8细胞、MiaPaCa2细胞、THP-1(ATCC)细胞
HTR-8/SVneo epithelioid cells人绒毛膜滋养层细胞系
SKO007细胞系相关产品:L1210细胞、BL-6细胞、HNE-3细胞
V 79-4细胞系相关产品:FHs 74 Int细胞、RA 1细胞、MFM-223细胞
Pfeiffer细胞系相关产品:L-Wnt-3A细胞、Melan-a细胞、HT clone H9细胞
Ramos细胞系相关产品:CAL51细胞、LLC PK1细胞、NCI-SNU-182细胞
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