"SK-OV-3 epithelioid cells人卵巢癌细胞系
细胞背景资料:SK-OV-3由G.Trempe和L.J.Old在1973年从卵巢肿瘤病人的腹水分离得到。 此细胞对肿瘤坏死因子和几种细胞毒性药物包括白喉毒素、顺铂和阿霉素均耐受。 在裸鼠中致瘤,且形成与卵巢原位癌一致的中度分化的腺癌。
细胞形态:上皮细胞样
细胞复苏相关注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。4.离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
MNNG-HOS (Cl#5)细胞系相关产品:P31-FUJ细胞、HCGC细胞、Hi-5细胞
293FT细胞系相关产品:Panc327细胞、BC3 H1细胞、C4-2 B细胞
L1210细胞系相关产品:HCA-7细胞、SVG p12细胞、TE9细胞
细胞生长:贴壁
SK-OV-3 epithelioid cells人卵巢癌细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞的冻存:为避免污染造成的损失,最小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化,需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前,细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培养基;包含10%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基;50%细胞条件培养基和50%含有10%甘油的新鲜培养基或50%细胞条件培养基和50%含有10%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基,一些普通的培养基成分可能是:50%细胞条件无血清培养基和50%包含有7.5%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有7.5%二甲基亚砜和10%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存:计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约200~400g离心5分钟沉淀细胞,使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以1×10(7)到5×10(7)细胞/ml密度,在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在无血清培养基中,再次悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存:使用分离试剂从基层分离细胞,分离时尽可能温和,使对细胞的损伤减少到最小。在完全生长培养基中,再次悬浮分离细胞,确定有活力细胞数。以大约200g离心5分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以5×10(6)到1×10(6)细胞/ml密度,在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿的冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
P3HR1细胞系相关产品:SNU119细胞、KYSE 450细胞、Clone 166细胞
GL-261细胞系相关产品:Hs-746T细胞、NCI-H1623细胞、CCLP-1细胞
JJN-3细胞系相关产品:HOC1细胞、CW2细胞、UMUC14细胞
H2198细胞系相关产品:Malme3M细胞、NK10a细胞、TB-1 Lu细胞
H-1092细胞系相关产品:Hs 863.T细胞、MCF 10A细胞、H-1238细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
SK-OV-3 epithelioid cells人卵巢癌细胞系
细胞生长特性:贴壁
细胞形态特性:上皮细胞样
培养细胞真的不难,最关键几点:1)所有的东西使用,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,最近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
SCL-I细胞系相关产品:WM-266-4细胞、UCLA-SO-M20细胞、NCI-H647细胞
XuanWei Lung Cancer-05细胞系相关产品:GM 2132细胞、MFE 280细胞、R D细胞
H-4细胞系相关产品:MV522细胞、EOC20细胞、RBL 1细胞
SCLC-21H细胞系相关产品:SPCA-1细胞、NCIH2107细胞、231-luc细胞
D324 Med细胞系相关产品:HFL细胞、FHCRC-11细胞、PANC0504细胞
GC-2细胞系相关产品:OVCAR 4细胞、C57/B6-L细胞、TSCC1细胞
P3-x63-Ag8 653细胞系相关产品:H23细胞、NCIH2126细胞、MV3细胞
SUDHL-8细胞系相关产品:SK-MEL-1细胞、OCI-Ly18细胞、LS123细胞
NCIH128细胞系相关产品:MC3T3, E1 subgroup-4 clone细胞、EBTr (NBL-4)细胞、G361mel细胞
HSC2细胞系相关产品:HUT125细胞、HEC251细胞、NKM-1细胞
SK-OV-3 epithelioid cells人卵巢癌细胞系
SVG(P12)细胞系相关产品:BPH1细胞、NCI-SNU-886细胞、COLO320-DM细胞
SKNFI细胞系相关产品:Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma细胞、NCI-H1155细胞、WBF344细胞
EBC1细胞系相关产品:Panc 04.03细胞、NK 10a细胞、KNS-62细胞
N87细胞系相关产品:HDSMC细胞、Th17细胞、L-M(TK-)细胞
RPMC细胞系相关产品:RA-FLSs细胞、NeHepLxHT细胞、H2286细胞
CFSC-8B细胞系相关产品:L-6 myoblast细胞、HCAEC细胞、M20 [Human melanoma]细胞
TGBC11T细胞系相关产品:Co 205细胞、CLONE M3细胞、CMT167细胞
NCI-H520细胞系相关产品:Hs888T细胞、DC2.4细胞、HIEC-6细胞
NBL-12细胞系相关产品:PT-K75细胞、GM-637细胞、WI 38细胞
ARO81细胞系相关产品:SN12C细胞、Y3-Ag1,2,3细胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21细胞
Meat Animal Research Center-145细胞系相关产品:Hu-P-T3细胞、CWR22R细胞、CCD-841-CoN细胞
OVCA5细胞系相关产品:PANC-10-05细胞、ML2细胞、MDA-MB-134-VI细胞
HFSF细胞系相关产品:526-mel细胞、C4-I细胞、TE15细胞
PG13细胞系相关产品:MNNG-HOS细胞、MDST8细胞、FRTL-5细胞
AE 1201细胞系相关产品:Ly10细胞、L-5178-Y细胞、SNU-1040细胞
ARO细胞系相关产品:2PK3细胞、MOLM-14细胞、A375.S2细胞
Cloudman M3细胞系相关产品:Dami细胞、Hs600T细胞、H1650细胞
GCT0404细胞系相关产品:HS766T细胞、Roswell Park Memorial Institute 1788细胞、SL1细胞
VERO76细胞系相关产品:AN3CA细胞、SCC090细胞、CAKI.1细胞
H-87细胞系相关产品:Panc813细胞、Karpas299细胞、ZR75-30细胞
HCC0095细胞系相关产品:Ha Fe细胞、L-1210细胞、VMRCLCD细胞
697细胞系相关产品:NUGC3细胞、CCD 841 CoN细胞、NCI-H841细胞
HOS-TE85细胞系相关产品:SkMel31细胞、MS1细胞、OCI/AML-4细胞
OC316细胞系相关产品:COLO320HSR细胞、WEHI-279细胞、Human Embryo Kidney-2细胞
HCC1588细胞系相关产品:H-211细胞、MDA-kb2细胞、H-3255细胞
SW480E细胞系相关产品:MDA-361细胞、NCI-H650细胞、SU-DH-L5细胞
H1435细胞系相关产品:Panc5.04细胞、NCIH1395细胞、190PT细胞
RPE1-hTERT细胞系相关产品:H1993细胞、FRTL 5细胞、A2780S细胞
Hs 895.T细胞系相关产品:DMS 79细胞、SRA01/04细胞、HOP 92细胞
DLD1细胞系相关产品:AgC11x3A细胞、Roswell Park Memorial Institute 1846细胞、Mahlavu细胞
KNS-62细胞系相关产品:UMNSAH-DF-1细胞、SK-N-BE(2)细胞、MNNG/HOS细胞
UCLA-SO-14细胞系相关产品:NCI-H650细胞、HDSMC细胞、H-711细胞
QSG7701细胞系相关产品:SKUT-1细胞、CCRF-SB细胞、PGBE1细胞
Capan2细胞系相关产品:H-460细胞、KMB 17细胞、DI TNC1细胞
H508细胞系相关产品:ADR-RES细胞、U 138 MG细胞、H-1819细胞
H766T细胞系相关产品:Hs27细胞、EAHY-926细胞、Y3Ag1.2.3细胞
AMO1细胞系相关产品:RKO-AS-45-1细胞、MHCC 97-L细胞、OPM2细胞
SKHEP1细胞系相关产品:Rat 1细胞、Human Liver-7702细胞、KHYG1细胞
KOPN8细胞系相关产品:HCC 94细胞、OE-19细胞、BS-C-1细胞
H1869细胞系相关产品:PA12细胞、SW900细胞、H283细胞
SK 1细胞系相关产品:Colo-206F细胞、SW 756细胞、Hep 3B2细胞
KATOIII细胞系相关产品:NCI-841细胞、Z310细胞、NIH:OVCAR-4细胞
HME-1细胞系相关产品:ACT-1细胞、GM02219C细胞、MIHA细胞
HEK;293细胞系相关产品:HCC1954 BL细胞、B16/F1细胞、PaTu 8988 S细胞
SuDHL 5细胞系相关产品:Hs 578.Bst细胞、LS-411细胞、ChaGo K-1细胞
Mouse podocyte细胞系相关产品:PANC 813细胞、MEC-1细胞、L5178Y-R细胞
A498细胞系相关产品:H-196细胞、C2-C12细胞、OSC19细胞
MDAMB-231细胞系相关产品:KTCTL140细胞、SUM 149PT细胞、PC3-M细胞
OCI-Ly07细胞系相关产品:MDA-175细胞、Nthy-ori 3-1细胞、U118MG细胞
MeT5A细胞系相关产品:OCIAML5细胞、H2066细胞、Mouse Forestomach Carcinoma细胞
HCC-1187细胞系相关产品:High 5细胞、Wistar Institute-38细胞、OCI-Ly8细胞
SK-OV-3 epithelioid cells人卵巢癌细胞系
SKNMC细胞系相关产品:KU812-F细胞、BC-028细胞、CAL 39细胞
HCC70细胞系相关产品:NCIH1819细胞、Hs695细胞、ECC 10细胞
MuM-2C细胞系相关产品:Hs688(A)T细胞、T HEECs细胞、C-Li-7细胞
H4细胞系相关产品:M1细胞、U-251_MG细胞、293 EBNA细胞
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