SK-OV-3 epithelioid cells人卵巢癌细胞系

"SK-OV-3 epithelioid cells人卵巢癌细胞系
细胞背景资料：SK-OV-３由G.Trempe和L.J.Old在１９７３年从卵巢肿瘤病人的腹水分离得到。 此细胞对肿瘤坏死因子和几种细胞毒性药物包括白喉毒素、顺铂和阿霉素均耐受。 在裸鼠中致瘤，且形成与卵巢原位癌一致的中度分化的腺癌。
细胞形态：上皮细胞样
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
MNNG-HOS (Cl#5)细胞系相关产品：P31-FUJ细胞、HCGC细胞、Hi-5细胞
293FT细胞系相关产品：Panc327细胞、BC3 H1细胞、C4-2 B细胞
L1210细胞系相关产品：HCA-7细胞、SVG p12细胞、TE9细胞
细胞生长：贴壁
SK-OV-3 epithelioid cells人卵巢癌细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞的冻存：为避免污染造成的损失，最小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化，需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前，细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培养基；包含１０%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基；５０%细胞条件培养基和５０%含有１０%甘油的新鲜培养基或５０%细胞条件培养基和５０%含有１０%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基，一些普通的培养基成分可能是：５０%细胞条件无血清培养基和５０%包含有７.５%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有７.５%二甲基亚砜和１０%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存：计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约２００～４００g离心５分钟沉淀细胞，使用移液管移去上清到最小体积，不要搅乱细胞。以１×１０(７)到５×１０(７)细胞/ml密度，在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在无血清培养基中，再次悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿冰上或放入４℃冰箱中，５分钟内开始冷冻步骤。细胞以１℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存：使用分离试剂从基层分离细胞，分离时尽可能温和，使对细胞的损伤减少到最小。在完全生长培养基中，再次悬浮分离细胞，确定有活力细胞数。以大约２００g离心５分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到最小体积，不要搅乱细胞。以５×１０(６)到１×１０(６)细胞/ml密度，在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿的冰上或放入４℃冰箱中，５分钟内开始冷冻步骤。细胞以１℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
P3HR1细胞系相关产品：SNU119细胞、KYSE 450细胞、Clone 166细胞
GL-261细胞系相关产品：Hs-746T细胞、NCI-H1623细胞、CCLP-1细胞
JJN-3细胞系相关产品：HOC1细胞、CW2细胞、UMUC14细胞
H2198细胞系相关产品：Malme3M细胞、NK10a细胞、TB-1 Lu细胞
H-1092细胞系相关产品：Hs 863.T细胞、MCF 10A细胞、H-1238细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
SK-OV-3 epithelioid cells人卵巢癌细胞系
细胞生长特性：贴壁
细胞形态特性：上皮细胞样
培养细胞真的不难，最关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，最近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
SCL-I细胞系相关产品：WM-266-4细胞、UCLA-SO-M20细胞、NCI-H647细胞
XuanWei Lung Cancer-05细胞系相关产品：GM 2132细胞、MFE 280细胞、R D细胞
H-4细胞系相关产品：MV522细胞、EOC20细胞、RBL 1细胞
SCLC-21H细胞系相关产品：SPCA-1细胞、NCIH2107细胞、231-luc细胞
D324 Med细胞系相关产品：HFL细胞、FHCRC-11细胞、PANC0504细胞
GC-2细胞系相关产品：OVCAR 4细胞、C57/B6-L细胞、TSCC1细胞
P3-x63-Ag8 653细胞系相关产品：H23细胞、NCIH2126细胞、MV3细胞
SUDHL-8细胞系相关产品：SK-MEL-1细胞、OCI-Ly18细胞、LS123细胞
NCIH128细胞系相关产品：MC3T3, E1 subgroup-4 clone细胞、EBTr (NBL-4)细胞、G361mel细胞
HSC2细胞系相关产品：HUT125细胞、HEC251细胞、NKM-1细胞
SK-OV-3 epithelioid cells人卵巢癌细胞系
SVG(P12)细胞系相关产品：BPH1细胞、NCI-SNU-886细胞、COLO320-DM细胞
SKNFI细胞系相关产品：Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma细胞、NCI-H1155细胞、WBF344细胞
EBC1细胞系相关产品：Panc 04.03细胞、NK 10a细胞、KNS-62细胞
N87细胞系相关产品：HDSMC细胞、Th17细胞、L-M(TK-)细胞
RPMC细胞系相关产品：RA-FLSs细胞、NeHepLxHT细胞、H2286细胞
CFSC-8B细胞系相关产品：L-6 myoblast细胞、HCAEC细胞、M20 [Human melanoma]细胞
TGBC11T细胞系相关产品：Co 205细胞、CLONE M3细胞、CMT167细胞
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QSG7701细胞系相关产品：SKUT-1细胞、CCRF-SB细胞、PGBE1细胞
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H508细胞系相关产品：ADR-RES细胞、U 138 MG细胞、H-1819细胞
H766T细胞系相关产品：Hs27细胞、EAHY-926细胞、Y3Ag1.2.3细胞
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KOPN8细胞系相关产品：HCC 94细胞、OE-19细胞、BS-C-1细胞
H1869细胞系相关产品：PA12细胞、SW900细胞、H283细胞
SK 1细胞系相关产品：Colo-206F细胞、SW 756细胞、Hep 3B2细胞
KATOIII细胞系相关产品：NCI-841细胞、Z310细胞、NIH:OVCAR-4细胞
HME-1细胞系相关产品：ACT-1细胞、GM02219C细胞、MIHA细胞
HEK;293细胞系相关产品：HCC1954 BL细胞、B16/F1细胞、PaTu 8988 S细胞
SuDHL 5细胞系相关产品：Hs 578.Bst细胞、LS-411细胞、ChaGo K-1细胞
Mouse podocyte细胞系相关产品：PANC 813细胞、MEC-1细胞、L5178Y-R细胞
A498细胞系相关产品：H-196细胞、C2-C12细胞、OSC19细胞
MDAMB-231细胞系相关产品：KTCTL140细胞、SUM 149PT细胞、PC3-M细胞
OCI-Ly07细胞系相关产品：MDA-175细胞、Nthy-ori 3-1细胞、U118MG细胞
MeT5A细胞系相关产品：OCIAML5细胞、H2066细胞、Mouse Forestomach Carcinoma细胞
HCC-1187细胞系相关产品：High 5细胞、Wistar Institute-38细胞、OCI-Ly8细胞
SK-OV-3 epithelioid cells人卵巢癌细胞系
SKNMC细胞系相关产品：KU812-F细胞、BC-028细胞、CAL 39细胞
HCC70细胞系相关产品：NCIH1819细胞、Hs695细胞、ECC 10细胞
MuM-2C细胞系相关产品：Hs688(A)T细胞、T HEECs细胞、C-Li-7细胞
H4细胞系相关产品：M1细胞、U-251_MG细胞、293 EBNA细胞
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