"U-251MG epithelioid cells人神经胶质瘤细胞系
细胞背景资料：U-２５１ MG分离至一位患者的胶质母细胞瘤组织。
细胞形态：上皮细胞样
细胞冻存复苏材料与方法步骤：常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器，规格有３５L和５０L两种。使用时要注意以下几点：(１)一般两周需充液氮一次，至少一个月充氮一次。液氮温度达-１９６℃，使用时注意勿让液氮溅到皮肤上，以免引起冻伤。(２)液氮容器为双层结构，中间为真空层，瓶口有双层焊接处，应防止焊接部裂开。(３)在装入液氮时，要注意缓慢小心，并用厚纸卷筒或特制漏斗作引导，使液氮直达瓶底，如有专用液氮灌注装置则更好。若为初次使用，加液氮时更要缓慢，以免温度骤降而使容器损坏。细胞冻存时常备的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培养液，DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油(１２１°C蒸气高压消毒)，２mL安瓿(或专用细胞冻存管)、吸管、离心管、喷灯、纱布袋(或冻存管架)等。主要操作步骤为：(１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为３×１０６～１×１０７/mL之间。(３)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装１～１.５mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(４)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入４℃冰箱中２～３小时，再移至冰箱冷冻室内３～４小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放２小时，最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
HeLa/S3细胞系相关产品：Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1细胞、NCTC1469细胞、GP-293细胞
SUDHL-8细胞系相关产品：SK-MEL-1细胞、OCI-Ly18细胞、LS123细胞
CEM/0细胞系相关产品：NCI-H1734细胞、GM01232E细胞、NTera-2D1细胞
细胞生长：贴壁
U-251MG epithelioid cells人神经胶质瘤细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
血清必须贮存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶，可将４０～４５ml分装于无菌５０ml离心管中，由于血清结冻时体积会增加约１０%，必须预留此膨胀体积之空间，否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌，不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物，则可将血清加入培养基内一起过滤，勿直接过滤血清。瓶装(５００ml)血清解冻步骤(逐步解冻法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室温下全溶后再分装，一般以５０ml无菌离心管可分装４０～４５ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沈淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏，而影响血清之品质。血清凝絮物：发生之原因有许多种，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成，这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物，可用离心３０００rpm，５min去除，或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物，因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”：通常经过热处理之血清，沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”，常会误认为血清遭受污染，而将血清放在３７℃中欲培养此“微生物”，但在３７℃环境下，又会使此沈淀物增多，更会误认为微生物之增殖，但以培养细菌之培养基检测，又没有污染。一般而言，此小黑点应不会影响细胞之生长，但若怀疑此血清之品质，应立即停用，更换另一批号的血清。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
SCC15细胞系相关产品：H1092细胞、NCI-H1694细胞、Colo699细胞
BIU87细胞系相关产品：H2591细胞、NCI-H358细胞、HSAEC1-KT细胞
U-251 MG细胞系相关产品：AML-EOL-1细胞、AMO1细胞、PC615.3细胞
HO-8910PM细胞系相关产品：3T6细胞、TYKnu细胞、T98G细胞
BL1339细胞系相关产品：L363细胞、OVISE细胞、H-358细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
U-251MG epithelioid cells人神经胶质瘤细胞系
细胞生长特性：贴壁
细胞形态特性：成纤维细胞样
为什么培养的细胞要及时传代？体外培养的细胞大多具有生长接触抑制的特性，也就是说当一个细胞被其他细胞包围的时候，它就会停止生长，及时传代后，细胞的生长得以继续。培养细胞生长减慢的原因在哪些?其解决办法有哪些？可能的原因有：更换了不同的培养液或血清；培养液中一些细胞生长必需成分如谷眈肢或生长因子等耗尽或缺乏或己被破坏；培养物中有少量细菌或真菌污染；试剂保存不当；比较新培养液与原培养液成分，比较新血清与旧血清等，找出其它可能的原因。解决办法：增加起始培养细胞浓度；让细胞逐渐适应新培养液；换入新鲜配制培养液；补加谷酷肢或生长因子等；用无抗生素培养液培养，如发现污染，去弃培养物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培养液需在２-８℃避光保存;含血清完全培养液在２-８℃保存，并在２周内用完;分离培养物，检测支原体。冷冻管应如何解冻？取出冷冻管后，须立即放入３７℃水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在１-２分钟内大部分融化，特别注意，需残留一小块冰块，就可拿到超净工作台操作细胞，用７５%酒精消毒冻存管，用新鲜培养基将细胞转移至培养瓶。另外冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管爆裂。
RMG1细胞系相关产品：MFE-280细胞、NCI-H2110细胞、H82sclc细胞
PL12细胞系相关产品：16HBE140细胞、PA-TU-8988S细胞、HIBEpiC细胞
Roswell Park Memorial Institute 2650细胞系相关产品：LPC-H12细胞、NCI-H1417细胞、Duke University 145细胞
NCI-H220细胞系相关产品：HEC-1A细胞、WM 239细胞、MUTZ1细胞
BTI-Tn5B14细胞系相关产品：Hs 281.T细胞、CNE2细胞、LNCaP-ATCC细胞
Tca8113细胞系相关产品：Hs 695T细胞、SUDHL-5细胞、Tu-212细胞
BV173细胞系相关产品：RGC-5细胞、RBL.2H3细胞、HS-445细胞
Lewis-Lung细胞系相关产品：NCIH187细胞、CCRF细胞、HCC-1954细胞
MDAMB231细胞系相关产品：MUTZ-1细胞、PANC-08-13细胞、H128细胞
MHHCALL2细胞系相关产品：SK-MEL-24细胞、Mouse Forestomach Carcinoma细胞、WM35细胞
U-251MG epithelioid cells人神经胶质瘤细胞系
SW 839细胞系相关产品：EL 4细胞、TT细胞、FU-97细胞
NTera-2D1细胞系相关产品：HuH7细胞、NALM-6-M1细胞、TKB1细胞
SuDHL 1细胞系相关产品：HSKMC细胞、BE2M17细胞、NCIH3255细胞
MH-22a细胞系相关产品：High-5细胞、NCI-H2286细胞、P3-NS1/1Ag 4.1细胞
U138细胞系相关产品：EJ-1细胞、SW-1353细胞、EC-9706细胞
MESSADX5细胞系相关产品：MALME 3M细胞、CHL/IU细胞、P3-X63.Ag8.653细胞
MESSADX5细胞系相关产品：MALME 3M细胞、CHL/IU细胞、P3-X63.Ag8.653细胞
NCI-H2122细胞系相关产品：R1610细胞、U-CH1细胞、HFL1细胞
KM-H2细胞系相关产品：HMC-1细胞、CaSki细胞、KP-2细胞
ARO 81-1细胞系相关产品：FHCRC-11细胞、MV-3细胞、CNE-2Z细胞
KLN-205细胞系相关产品：RCS细胞、H1437细胞、Centre Antoine Lacassagne-51细胞
SNU761细胞系相关产品：NCIH1694细胞、H1755细胞、Bac 1.2F5细胞
Huh-7.5细胞系相关产品：HEK 293-H细胞、NCI-H510细胞、MA104细胞
HCC-202细胞系相关产品：RT4细胞、NB1-RGB细胞、ND7/23细胞
HCS2/8细胞系相关产品：SUSM-1细胞、CHP126细胞、H-2227细胞
MDCK2细胞系相关产品：MDA-MB-134细胞、Jurkat77细胞、SPC-A-1细胞
Kit 225细胞系相关产品：NCC-IT细胞、MC3T3-L1细胞、NFHIOSE-29细胞
RenCa细胞系相关产品：NIE 115细胞、SVOG细胞、MT-2细胞
H322T细胞系相关产品：H676B细胞、MV-522细胞、U138MG细胞
Hs 746.T细胞系相关产品：SK_N_BE2C细胞、U87 MG细胞、Pt K2 (NBL-5)细胞
Hep3B细胞系相关产品：P3J-HR-1细胞、OCI-AML3细胞、IPI-2I细胞
UCH1细胞系相关产品：HBZY1细胞、H-650细胞、P3J HR1-K细胞
NCI-H87细胞系相关产品：7404细胞、RH-35细胞、COLO824细胞
HT-1197细胞系相关产品：766T细胞、GA-10 (Clone 4)细胞、HCT-8/V细胞
WERI细胞系相关产品：OV3121细胞、AHH1细胞、HAC-84细胞
TE 32细胞系相关产品：Pro-5 Lec1.3c细胞、T-ALL 1细胞、NCI-H23细胞
SKNBE(2)细胞系相关产品：786-0WT细胞、HEL细胞、MDCK-2细胞
U-251-MG细胞系相关产品：SW-962细胞、RPTEC TERT1细胞、Hs840T细胞
NOZAWA细胞系相关产品：ME180细胞、NCI-SNU-878细胞、HepaRG细胞
GCT细胞系相关产品：BRL-3A细胞、M1细胞、EFM-192B细胞
EB-1细胞系相关产品：SUP-M2细胞、CTLA4 Ig-24细胞、SUD6细胞
SUM-149PT细胞系相关产品：AU 565细胞、LIM 1215细胞、HEYA8细胞
CCRF/CEM细胞系相关产品：M-1细胞、PL 5细胞、DHBE细胞
JVM3细胞系相关产品：NCI-SNU-761细胞、MDA-MB-231细胞、SH-SY5Y细胞
H-522细胞系相关产品：HEK-293-F细胞、HTR8/SVneo细胞、H-1703细胞
U266BL细胞系相关产品：HP615细胞、RMG1细胞、NOZ细胞
Cates 1B细胞系相关产品：KP2细胞、67NR细胞、A549细胞
USMC细胞系相关产品：UT7细胞、Hs 840.T细胞、HEK-293-F细胞
BCP1细胞系相关产品：M4e细胞、SK-CO-1细胞、IOSE29细胞
RT4细胞系相关产品：U-118-MG细胞、OLN 93细胞、SVOG细胞
SG231细胞系相关产品：K7M2细胞、32Dc3细胞、MRMT-1细胞
ST2细胞系相关产品：R D细胞、RS4:11细胞、Hs675细胞
MB231细胞系相关产品：MKN 45细胞、KNS-81细胞、NRK 49F细胞
JS1细胞系相关产品：786-O RCC细胞、GM07404A细胞、CHP-126细胞
Kasumi-6细胞系相关产品：WEHI-3B细胞、HS578细胞、OVCA 420细胞
C4 I细胞系相关产品：Alexander cells细胞、CWR-22rv1细胞、CC-LP-I细胞
T98细胞系相关产品：SUPB-15细胞、CF PAC-1细胞、MV-4-11细胞
NCI-H1105细胞系相关产品：NCI-H1694细胞、RKO-E6细胞、Sup T-1细胞
NCI-SNU-C2A细胞系相关产品：SU 86.86细胞、TE4细胞、TE4细胞
HPMEC细胞系相关产品：Hela-mock细胞、GEO细胞、FAK+/+细胞
KAT5细胞系相关产品：HTori-3.1细胞、MHH-CALL2细胞、H-1404细胞
U-251MG epithelioid cells人神经胶质瘤细胞系
NBL-S细胞系相关产品：CZ-1细胞、H-1395细胞、U-373MG ATCC细胞
293S细胞系相关产品：CL-34细胞、H-2172细胞、NCI-H2023细胞
ABC1细胞系相关产品：Hs-852-T细胞、BT483细胞、WEHI 164 TC细胞
Roswell Park Memorial Institute 2650细胞系相关产品：LPC-H12细胞、NCIH1838细胞、Caco-2/ATCC细胞
"
