"C8-D1A epithelioid cells鼠小脑细胞系
细胞背景资料:该永生化细胞系源自出生8天小鼠小脑组织,由B Pessac, D Trisler建立。该细胞具有小神经胶质细胞特征。该细胞为GFAP阳性细胞,除此之外,没有检测到其它神经胶质神经元或小神经胶质细胞的分子标记。
细胞形态:上皮细胞样
细胞复苏相关注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。4.离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
GM00346B细胞系相关产品:ReNcell CX细胞、RCC10 RGB细胞、TR-146细胞
NCI-H810细胞系相关产品:ACHN细胞、JB6 Cl 30-7b细胞、H2228细胞
Baby Hamster Kidney 21细胞系相关产品:H2087细胞、DHBE细胞、H520细胞
细胞生长:贴壁
C8-D1A epithelioid cells鼠小脑细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞的冻存:为避免污染造成的损失,最小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化,需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前,细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培养基;包含10%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基;50%细胞条件培养基和50%含有10%甘油的新鲜培养基或50%细胞条件培养基和50%含有10%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基,一些普通的培养基成分可能是:50%细胞条件无血清培养基和50%包含有7.5%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有7.5%二甲基亚砜和10%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存:计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约200~400g离心5分钟沉淀细胞,使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以1×10(7)到5×10(7)细胞/ml密度,在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在无血清培养基中,再次悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存:使用分离试剂从基层分离细胞,分离时尽可能温和,使对细胞的损伤减少到最小。在完全生长培养基中,再次悬浮分离细胞,确定有活力细胞数。以大约200g离心5分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以5×10(6)到1×10(6)细胞/ml密度,在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿的冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。
细胞传代方法:1:2传代
Hs746T细胞系相关产品:CEMC1细胞、TE-6细胞、U-87细胞
SW 839细胞系相关产品:EL 4细胞、TT细胞、FU-97细胞
GM-3573细胞系相关产品:CCD18细胞、COLO-394细胞、CCRF-CEM C7细胞
HEK 293细胞系相关产品:WM266细胞、PaTu8988s细胞、LN382细胞
KYSE 140细胞系相关产品:KU19-19细胞、SG231细胞、LC1/Sq细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
C8-D1A epithelioid cells鼠小脑细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
细胞形态特性:详见细胞说明书
培养细胞真的不难,最关键几点:1)所有的东西使用,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,最近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
OVCA8细胞系相关产品:GM03320细胞、RCC-10细胞、hA549细胞
HOP 62细胞系相关产品:SNU886细胞、NCI-SNU-16细胞、H-1105细胞
RAOEC细胞系相关产品:KNS62细胞、WSU-HN13细胞、H-1355细胞
373MG细胞系相关产品:624 MEL细胞、ARPE19细胞、HMEL细胞
RC92A细胞系相关产品:NCIH1648细胞、CCC-HEH-2细胞、HUT 125细胞
KLE细胞系相关产品:Chinese Hamster Ovary细胞、T-CAM2细胞、Madison lung细胞
H1734细胞系相关产品:H-250细胞、211H细胞、BE2C细胞
MASMC细胞系相关产品:MDA-MB-468-RED细胞、K562/ADR细胞、RPMI8226细胞
OVTOKO细胞系相关产品:RL-65细胞、Tn 5B1-4细胞、ketr 3细胞
NCI-H146细胞系相关产品:B16-F10细胞、HCC1143细胞、DLD-1细胞
C8-D1A epithelioid cells鼠小脑细胞系
PAI细胞系相关产品:UPCISCC090细胞、MS751细胞、H1404细胞
CAL 148细胞系相关产品:TPC-1细胞、SNK-1细胞、HRA-19细胞
OE19细胞系相关产品:Panc-10.05细胞、BT 20细胞、DH82细胞
NP69细胞系相关产品:H-2023细胞、LM(TK-)细胞、NCI-H1573细胞
MHCC-97细胞系相关产品:U-343细胞、LL2细胞、PTK-1细胞
Calf Pulmonary Artery 47细胞系相关产品:SKRC-20细胞、MKN-74细胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z细胞
COLO 16细胞系相关产品:EFM192C细胞、MSTO-211H细胞、MES23.5细胞
CT26WT细胞系相关产品:RAW-264.7细胞、hRMECs细胞、P3JHR-1细胞
MTEC1细胞系相关产品:HCC-1833细胞、Vero 76 clone E6细胞、HS-294细胞
DU 145细胞系相关产品:Fetal Human Lens-124细胞、McA-RH 8994细胞、U118-MG细胞
H1355细胞系相关产品:NBL-3细胞、SN-12C细胞、NCI-H250细胞
PANC0203细胞系相关产品:SK-BR3细胞、SNU423细胞、HeLa 229细胞
MO59J细胞系相关产品:PIG3细胞、LICR-LON-HN6细胞、TE7细胞
SK-RC 42细胞系相关产品:SW 13细胞、Hs 870.T细胞、USMC细胞
C2C12细胞系相关产品:OC 316细胞、COLO-HSR细胞、RPE D407细胞
ATN1细胞系相关产品:NOR 10细胞、GM-215细胞、H-727细胞
HFLS-OA细胞系相关产品:HFF-1细胞、L5178-R细胞、COV 434细胞
HCC-1806细胞系相关产品:D324 Med细胞、RBL 2H3细胞、HCS2/8细胞
L5178-R细胞系相关产品:Karpas-299细胞、GM3190细胞、P3X63-Ag8.653细胞
K7M2 wt细胞系相关产品:Caov-4细胞、J-774A.1细胞、Jeko1细胞
CEM细胞系相关产品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4细胞、HEK-293H细胞、H740细胞
PC 61细胞系相关产品:CCF-STTG1细胞、Huh-7细胞、H-524细胞
VA-ES-BJ细胞系相关产品:SK-Col-1细胞、SW480细胞、H.Ep. No. 2细胞
Mv 1 Lu细胞系相关产品:Sf-21细胞、C4-1细胞、RL-65细胞
B104 [Rat neuroblastoma]细胞系相关产品:C57/B6-L细胞、HHL5细胞、C166细胞
End1/E6E7细胞系相关产品:Vero E6细胞、HECCL-1细胞、H1869细胞
PLC细胞系相关产品:Hs739T细胞、RPMI-1788细胞、OVCA-432细胞
NCIH1755细胞系相关产品:FET细胞、RGM-1细胞、MILE SVEN1细胞
RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]细胞系相关产品:HPDE细胞、TOV-21G细胞、H-2107细胞
SKNBE(1)细胞系相关产品:WERI-Rb 1细胞、HCC-1588细胞、NBL_S细胞
SKES-1细胞系相关产品:EFM-192B细胞、WRL 68细胞、KMB-17细胞
HT-29/CX-1细胞系相关产品:231-luc细胞、PC-3/M细胞、HL60细胞
CT26.WT细胞系相关产品:NCIH1341细胞、SCC-25细胞、SN-12C细胞
SN4741细胞系相关产品:Tb1.Lu细胞、Tn-5细胞、Fetal Human Lens-124细胞
Hs 294T细胞系相关产品:NTERA-2 clone D1细胞、OVCAR.5细胞、CHL细胞
LNCaP clone FGC细胞系相关产品:Centre Antoine Lacassagne-51细胞、H2330细胞、JKT-1细胞
H-2108细胞系相关产品:HEK;293细胞、KM932细胞、HS578细胞
NG108-15细胞系相关产品:MRAEC细胞、Centre Antoine Lacassagne-78细胞、AA-Mel细胞
SEG1细胞系相关产品:NCI H929细胞、MDA-435细胞、Jurkat E6细胞
H196细胞系相关产品:WM-2664细胞、HcaF细胞、GM01232细胞
WILL-2细胞系相关产品:Baby Hamster Kidney from litter No. 21细胞、BMF细胞、NCIH2172细胞
ZR7530细胞系相关产品:Caco2-BBE细胞、293-F细胞、H-1092细胞
MeSoTheliOma-211H细胞系相关产品:BIU-87细胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2细胞、SU-DHL-1细胞
Panc-327细胞系相关产品:HCEC-12细胞、SN12C细胞、SNU-C2B细胞
Nthy-ori 3.1细胞系相关产品:CL 1-5细胞、LLC-PK(1)细胞、IPEC1细胞
ECC-1细胞系相关产品:3T3 Swiss Albino细胞、Neuro2a细胞、H2126细胞
LOUNH91细胞系相关产品:CCD-112 CoN细胞、HSC-T6细胞、Vx-2细胞
TE4细胞系相关产品:RKO_AS45细胞、SNB-19细胞、BrCL18细胞
MUTZ3细胞系相关产品:Vero-76细胞、HCC202细胞、HUCCT1细胞
LN 229细胞系相关产品:RBMVEC细胞、SUM 52PE细胞、COLO-679细胞
SB细胞系相关产品:SU8686细胞、KG-1细胞、Tu 177细胞
C8-D1A epithelioid cells鼠小脑细胞系
Eca-109细胞系相关产品:SKMEL1细胞、F-36P细胞、HCMEC(BL12-H)细胞
TFK1细胞系相关产品:ID8细胞、Kasumi 1细胞、HSC细胞
SMMC-7721细胞系相关产品:CCD841CoN细胞、OCILY3细胞、MODE-K细胞
RAOEC细胞系相关产品:KNS62细胞、RMS 13细胞、LN229细胞
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