"5-8F epithelioid cells鼻咽癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
贴壁细胞的消化方法介绍:1、胰酶。这是用得最多的。一般浓度在0.25-0.5%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大,从几分钟到几十分钟不等。0.25%的胰酶作用于单层贴壁的细胞,在37度条件下,一般消化1-5分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含、镁的平衡液,否则影响活性。保存于-20度。2、胶原酶。这种方法比较少,一般是用原代培养时,从组织消化下细胞。这种方法作用温和,对细胞损伤较小,但是,价格也较贵。中止同样是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般浓度在0.02%左右。作用于细胞与间质,对细胞间也有一定作用。注意,它能显著影响pH值,而且在弱碱性条件下才易溶。因此,配制时应调节好酸碱度。它不能被终和。因此,消化下来的细胞要洗一遍。4、商品化的无酶消化液。个人的使用经常觉得对细胞的损伤比较大,但是分离成单细胞悬液的能力确实比较强。5、物理法。直接吹打或用细胞刮子将细胞刮下来。6、冷冻法。此方法仅能用于细胞传代时。无法使组织上的细胞脱落下来。本方法的原理,我想是因细胞冷冻后收缩,从而从培养瓶上脱落下来。优点是:对细胞损伤小,不需要中止或洗细胞,方便,不需要另外配制消化液。特别适用那些贴壁不是特别紧,又特别娇气的细胞。不足是细胞常成小片脱落。此种方法曾用于因用其它方法传代导致大量细胞死亡操作的间充质干细胞、DC细胞的培养,效果非常满意。具体过程是:1、用较多的4度的PBS 洗涤一遍细胞(以6孔板为例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,静置操作台上,很快细胞就小片脱落,3、轻轻吹打,细胞即完全脱落,4、按一定比例传代。
SW837细胞系相关产品:MRC 5细胞、293AD细胞、EBC-1细胞
Mc Ardle 7777细胞系相关产品:PLC-PRF-5细胞、MBMEC细胞、SUDHL-6细胞
Panc-05.04细胞系相关产品:SW 1353细胞、WEHI164细胞、EVSA/T细胞
细胞生长:贴壁
5-8F epithelioid cells鼻咽癌细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
最近在培养细胞时,发现其状态不是很好,很容易扎堆生长,用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来,很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的,传代的第二天,有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢?你好,我养的细胞和你一样,消化下来也是一团的,但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀,分皿后在镜下看一看,移动培养皿的时候尽量动作轻,避免晃动。细胞生长挺快,那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能:一、细胞消化后吹打不均匀,造成细胞成团生长:二、细胞细化太过,细胞成片脱落,吹打时没有受力点,细胞聚团生长。解决办法:根据细胞生长的情况进行多次消化,将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养:一般步骤为:真空泵吸走培养基,1XPBS漂洗两次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿为例),37度放置数分钟,轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落,加入适量血清,以吸管上下吸放数次以打散细胞团块,离心后加入新鲜培养基,按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间,若胰酶处理太久,容易造成细胞贴壁不紧,显微镜下观察立体感不强,严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901几种癌细胞处理时间可适当放长,一般处理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比较容易脱落,2min足矣,P19Cl6和293细胞贴壁不紧,可在PBS漂洗后,直接换新鲜培养基打散。
细胞传代方法:1:2传代
COLO 320 HSR细胞系相关产品:DR2R1610细胞、E0771细胞、H-498细胞
253J-Bladder-V细胞系相关产品:LA 4细胞、KMST-6细胞、PAI细胞
COR-L23细胞系相关产品:CF Pac1细胞、J774A1细胞、NFS 60细胞
H250细胞系相关产品:VM-CUB1细胞、RERF-LC-MS细胞、NU-GC-2细胞
alpha TC1.6细胞系相关产品:HO1N1细胞、MIN-6细胞、BC-024细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
5-8F epithelioid cells鼻咽癌细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
细胞形态特性:详见细胞说明书
造成实验室细胞污染常见情况总结:细胞培养中最常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染,大多数较难处理。那么,哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢?我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】1)为节省时间,有人已经用超净台四个多小时,不开紫外灭菌30min,酒精擦拭后直接开始试验;2)器材或者溶液很久没用,未检测是否污染而直接使用;离心管多次使用,枪头为了方便交叉使用;3)超净台不点酒精灯;点了酒精灯放在右上角,而你在左下角做试验;4)不带手套,徒手操作;5)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋,未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具,如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需121°C高压灭菌20分钟后37%烤干备用)。超净台和桌面,东西太多太乱:超净台不是储物箱,什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台!这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面,切忌东西堆积如山,不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞!一不小心“飘”进你的细胞培养板里,细胞就会养的不好,啥时候死了都不知道!【培养箱太久没清洁】细胞污染了,并非直接扔了培养皿就不管了,首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染,如果有而且好几个板子都有类似的污染块,那很可能是培养箱中的水或者空气污染了,得给培养箱做个大扫除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水没了要记得加,还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂,难管理】在传代细胞这种卫生要求高,人多了,不确定因素多了,难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室,实验服当风衣穿,不扣纽扣,不戴,就容易造成细胞污染;超净台做实验时,喜欢说话聊着做试验,要是还不带口罩,里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢!
LU451细胞系相关产品:J82 COT细胞、NCI-H1238细胞、MRC 5细胞
H2141细胞系相关产品:Reuber H-35细胞、LP-1细胞、NCI-Hut 125细胞
Y3-Ag 1.2.3细胞系相关产品:0V-1063细胞、DU_145细胞、ECC-10细胞
COLO 320F细胞系相关产品:G-402细胞、IAR-20细胞、Immortalized Human Hepatocytes细胞
SW1088细胞系相关产品:P3X63NS1细胞、SUDHL-2细胞、SW-1573细胞
KYSE510细胞系相关产品:Eph4 1424细胞、AE1201细胞、Ramos 2G6.4C10细胞
ChaGo-K-1细胞系相关产品:Michigan Cancer Foundation-7细胞、LS123细胞、CAKI1细胞
786-O RCC细胞系相关产品:SMA 560细胞、Murine Carcinoma-38细胞、VK2/E6E7细胞
RPMI No. 1846细胞系相关产品:NCI-H2081细胞、MDA-MB-231 #4175细胞、SK-OV-3细胞
P3-X63-Ag8细胞系相关产品:Colo-678细胞、Sp2/mIL-6细胞、HEY A8细胞
5-8F epithelioid cells鼻咽癌细胞系
SU86.86细胞系相关产品:NT2D1细胞、BIC细胞、H-1435细胞
Intestinal Epithelioid Cell line No. 6细胞系相关产品:PG-4细胞、MESSA-DX5细胞、RCC4细胞
MKN1细胞系相关产品:MDCK2细胞、KLN-205细胞、Ly3细胞
SK-N-BE(1)n细胞系相关产品:NSC34细胞、H-2023细胞、EAHY-926细胞
SKLU01细胞系相关产品:WM 239细胞、MM-1S细胞、ATDC-5细胞
TB1 Lu细胞系相关产品:SK_HEP1细胞、P3HR-1细胞、LA-N-1细胞
HCO细胞系相关产品:SNU368细胞、Wien 133细胞、SJSA-1细胞
H-2126细胞系相关产品:A253细胞、VCaP细胞、Be Wo细胞
APRE-19细胞系相关产品:HuTu-80细胞、RAW2647细胞、OCI-LY-1细胞
Intestinal Epithelioid Cell line No. 18细胞系相关产品:Hx-147细胞、H510A细胞、NIH:OVCAR3细胞
GL261细胞系相关产品:GM02131细胞、SK-N-MC细胞、HuH-1细胞
Biologics Standards-Cercopithecus-1细胞系相关产品:H-810细胞、KAT-5细胞、MB39细胞
UCLA-SO-M14细胞系相关产品:C22细胞、NCIH1563细胞、MLE 12细胞
HCT/Taxo1细胞系相关产品:NTERA2-D1细胞、RKN细胞、NW-MEL-38细胞
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P-3J细胞系相关产品:TE14细胞、NCI-H1944细胞、VMCUB-1细胞
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H69细胞系相关产品:KYSE-50细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4细胞、PG [Human lung carcinoma]细胞
A2780/CP70细胞系相关产品:A-375SM细胞、SNU-16细胞、alpha TC1-6细胞
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SK-ChA1细胞系相关产品:Sc-1细胞、BetaTC6细胞、SCaBER细胞
N-9细胞系相关产品:PK15细胞、MSF细胞、CG4细胞
COLO394细胞系相关产品:373 MG细胞、BE2-M17细胞、RGM1细胞
Kit 225细胞系相关产品:NCC-IT细胞、MC3T3-L1细胞、NFHIOSE-29细胞
HCE-T细胞系相关产品:Panc-8_13细胞、CBRH-7919细胞、HTh-74细胞
TK.10细胞系相关产品:HeLa/DDP细胞、ECV-304细胞、TOV112细胞
NCIH378细胞系相关产品:COLO320-DM细胞、COS-7细胞、EC9706细胞
RCS细胞系相关产品:A375细胞、GM17219细胞、PANC3.27细胞
NCI-H295细胞系相关产品:NCIH2141细胞、HUC-1细胞、Keio University-19-19细胞
C8-D1A细胞系相关产品:MN9D细胞、CCRF CEM细胞、CSQT-2细胞
PLA-802细胞系相关产品:BC-025细胞、H1930细胞、SK-ChA1细胞
OVCA-433细胞系相关产品:HOS细胞、NCC-IT细胞、Bowes melanoma cells细胞
KYSE 410细胞系相关产品:ZR7530细胞、Dysplastic Oral Keratinocyte细胞、786.O细胞
OCI-Ly3细胞系相关产品:C8166细胞、WERI-Rb-1细胞、PLA801D细胞
NUGC3细胞系相关产品:VMRC-RCZ细胞、SU-DHL6细胞、16-HBEo细胞
5-8F epithelioid cells鼻咽癌细胞系
MRC-5细胞系相关产品:Huh7.5细胞、SW 780细胞、ST2细胞
BJ1细胞系相关产品:MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞、NIH:OVCAR4细胞、HRGEC细胞
Clone 166细胞系相关产品:CCD-33Co细胞、HCC0827细胞、A-549细胞
Y3-Ag 1.2.3细胞系相关产品:0V-1063细胞、KYSE-180细胞、SH-SY5Y细胞
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