MDCK epithelioid cells犬肾细胞系

"MDCK epithelioid cells犬肾细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
COLO206细胞系相关产品：NALM-6-M1细胞、H-II-E-C3细胞、SU-DHL-16细胞
H1155细胞系相关产品：HM细胞、C32 [Human melanoma]细胞、NCIH526细胞
38C-13细胞系相关产品：MAVER细胞、HT-3细胞、U343细胞
细胞生长：贴壁
MDCK epithelioid cells犬肾细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代的一般方法：开始细胞传代前，仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全：一般主要有：细胞(单层细胞，镜检适合)、培养液(MEM-０.２%LH培养液或MEM培养液或１９９等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血清、庆大霉素溶液（１万单位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、胶塞、吸管(１０ml、１m１）、细胞吹打管（２０ml）(以上用具需经１２１℃至少１５分钟高压灭菌)、C０２ 孵箱、超净台、倒置显微镜、４℃、-２０℃冰箱；操作步骤：镜检细胞，挑选生长状态良好，细胞界限清晰，具有立体感，形态好无污染、无异常及可疑病变细胞。配制细胞培养液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培养液１００ml内，加入灭活小牛血清１０m１，庆大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸钠溶液３ml。（仅供一般参考）。消化细胞；先用PBS洗液冲洗细胞表面１-２次，每次１０m１，弃去洗液，向细胞瓶内加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，细胞瓶平放，使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入１０m１细胞培养液吹打分散细胞，按所需的传代比例分装于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１细胞培养液重复吹打一次后分装，然后补加至所需培养量。加塞，置于３７±１℃孵箱培养。约２～４天成片。(由细胞接种浓度决定)；填写传代记录。
细胞传代方法：１：２传代
NCI-H1341细胞系相关产品：SNU-407细胞、Case 3细胞、Dysplastic Oral Keratinocyte细胞
TE14细胞系相关产品：C3H/10T1/2 clone 8细胞、OVCAR10细胞、7404细胞
SV40-MES13细胞系相关产品：KRC Y细胞、G519细胞、149 PT细胞
Hs 729细胞系相关产品：SK Hep1细胞、YES-2细胞、JB-6 Cl 30细胞
HCC1937细胞系相关产品：JROECL 21细胞、SHSY-5Y细胞、DMS53细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
MDCK epithelioid cells犬肾细胞系
细胞生长特性：贴壁生长
细胞形态特性：详见细胞说明书
培养细胞真的不难，最关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，最近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
HO8910PM细胞系相关产品：TGBC-11-TKB细胞、SK.MEL.5细胞、NCI-H220细胞
P3-X63Ag8.653细胞系相关产品：PL-11细胞、RMS1598细胞、MUTZ-1细胞
H345细胞系相关产品：NPC-TW039细胞、UMR106细胞、P3-X63-Ag8细胞
OP9细胞系相关产品：SNU354细胞、P3X63 Ag8细胞、HCC-1187细胞
BEL-7402细胞系相关产品：5-8F细胞、P-36细胞、Epithelioma Papulosum Cyprini细胞
CCRF-CEM/S细胞系相关产品：Panc05.04细胞、PANC0403细胞、MLOY4细胞
MDAPCa-2b细胞系相关产品：TOV-112D细胞、U-373MG细胞、HS-683细胞
FU-97细胞系相关产品：NCl-H157细胞、MAD109细胞、Hs819T细胞
Ramos (RA 1)细胞系相关产品：hESC细胞、K7M2 wt细胞、SW-1990细胞
H-1048细胞系相关产品：3T3-442A细胞、C 6细胞、OC316细胞
MDCK epithelioid cells犬肾细胞系
Capan 1细胞系相关产品：CAOV3细胞、BHP 10-3细胞、NCI-SNU-5细胞
Tb1Lu细胞系相关产品：J-774细胞、SUM-52细胞、BE(2)C细胞
H3255_DA细胞系相关产品：HCS2/8细胞、KPL-4细胞、OCI Ly3细胞
SK-MEL-24细胞系相关产品：HL 60细胞、EM-3细胞、NuTu 19细胞
SKNBE-2细胞系相关产品：Laboratory of Allergic Diseases 2细胞、IMCD3细胞、SCL I细胞
LNCaP-C4-2细胞系相关产品：C6细胞、QGY细胞、HT29细胞
A2058细胞系相关产品：SW-480细胞、AMC-HN8细胞、A7r5细胞
NCI-SNU-1040细胞系相关产品：DHL-2细胞、NIE 115细胞、H-1417细胞
Hs281T细胞系相关产品：HBdSMC细胞、T9细胞、MC3T3-E1 Subclone 4细胞
IMCD-3细胞系相关产品：NCI-H2009细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2细胞、LIM 1215细胞
Bowes melanoma cells细胞系相关产品：HCC-1187细胞、Panc327细胞、QGY-7701细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6细胞系相关产品：Tsup-1细胞、P3X63Ag8细胞、HTori-3.1细胞
MC-3T3细胞系相关产品：CESS细胞、A-172MG细胞、RFL 6细胞
OAW42细胞系相关产品：EAC细胞、M210B4细胞、MDA-MB-175-VII细胞
HGMC细胞系相关产品：MFE 296细胞、DSL-6A/C1细胞、OVCAR-8细胞
H2108细胞系相关产品：MES-13细胞、H-2405细胞、NCIH69细胞
C-8161细胞系相关产品：PLB-985细胞、BS-C-1细胞、SNU-423细胞
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Pro-5WgaRI3C细胞系相关产品：NCI-SNU-423细胞、NCIH69细胞、Hs 934.T细胞
OVCAR10细胞系相关产品：U 937细胞、LS-180细胞、SAOS 2细胞
Pt K1 (NBL-3)细胞系相关产品：Jurkat 77细胞、Hs-281-T细胞、Huh-7.5.1细胞
MMQ细胞系相关产品：Potorous tridactylus Kidney 2细胞、PANC0504细胞、EBTr (NBL-4)细胞
OV90细胞系相关产品：McG-1细胞、Hs 821.T细胞、PANC-03-27细胞
PA-TU-8988S细胞系相关产品：NCI-H2286细胞、OVCA 420细胞、MDA1386细胞
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ND7/23细胞系相关产品：BA/F3细胞、LN229细胞、P3X63 Ag8细胞
BetaTC6细胞系相关产品：NIH-OVCAR-3细胞、Hs895.T细胞、A-172细胞
3T6-Swiss albino细胞系相关产品：PC-9/S1细胞、STC-1细胞、G361细胞
OAW-42细胞系相关产品：SKNDZ细胞、Granta519细胞、NCIH2085细胞
Nb2细胞系相关产品：C-4I细胞、C32-mel细胞、U-251MG细胞
Cor L88细胞系相关产品：NCI-H1573细胞、SW-900细胞、CV1细胞
HEK/293细胞系相关产品：VMM5A细胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed细胞、L-M[TK-]细胞
MLO-Y4细胞系相关产品：HELF细胞、Hs 832(C).T细胞、Jiyoye (P-2003)细胞
HME-1细胞系相关产品：ACT-1细胞、GM02219C细胞、MIHA细胞
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Panc08.13细胞系相关产品：PC-3M-1E8细胞、MEL-526细胞、NIH3T3-L1细胞
Transformed C3H Mouse Kidney-1细胞系相关产品：SW-1088细胞、NK92-MI细胞、HAEC细胞
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H146细胞系相关产品：NCTC 3960细胞、CWR22-Rv1细胞、HFLS-OA细胞
PC615.3细胞系相关产品：HCC827细胞、LIM1215细胞、BEL7402细胞
Japanese Tissue Culture-28细胞系相关产品：HuH-28细胞、Pa18C细胞、Molm14细胞
U373-MG细胞系相关产品：Human Melanoma Cell Bowes细胞、HCC1954细胞、Me-Wo细胞
SK-ChA1细胞系相关产品：Sc-1细胞、BetaTC6细胞、SCaBER细胞
AtT-20细胞系相关产品：H-1436细胞、HConEpic细胞、A-253细胞
OV1/P细胞系相关产品：CA46细胞、MDAMB435细胞、CCD18细胞
SNU354细胞系相关产品：NCI522细胞、PK (15)细胞、BN-CL2细胞
SAOS 2细胞系相关产品：EO771细胞、SU.86细胞、Toledo细胞
NCI-H1838细胞系相关产品：A3细胞、Strain V细胞、B16细胞
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HT-1197细胞系相关产品：766T细胞、GA-10 (Clone 4)细胞、HCT-8/V细胞
CNLMG-B5537SKIN细胞系相关产品：UPCI:SCC90细胞、SK-ChA-1细胞、CEMC1细胞
ZYM-DIEC02细胞系相关产品：HPaSteC(HPSC)细胞、ML-2细胞、N1S1细胞
H341细胞系相关产品：MTEC1细胞、KYSE-30细胞、C8D1A细胞
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