"SNU-878 epithelioid cells人肝癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
细胞复苏相关注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。4.离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
Human Epidermoid carcinoma #2细胞系相关产品:HCC1569细胞、NBL-4细胞、NS20Y细胞
RBL.2H3细胞系相关产品:BT20细胞、HCC 70细胞、GM346细胞
HTori-3.1细胞系相关产品:BEL-7405细胞、TEC细胞、P3HR-1细胞
细胞生长:贴壁
SNU-878 epithelioid cells人肝癌细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞的冻存:为避免污染造成的损失,最小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化,需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前,细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培养基;包含10%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基;50%细胞条件培养基和50%含有10%甘油的新鲜培养基或50%细胞条件培养基和50%含有10%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基,一些普通的培养基成分可能是:50%细胞条件无血清培养基和50%包含有7.5%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有7.5%二甲基亚砜和10%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存:计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约200~400g离心5分钟沉淀细胞,使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以1×10(7)到5×10(7)细胞/ml密度,在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在无血清培养基中,再次悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存:使用分离试剂从基层分离细胞,分离时尽可能温和,使对细胞的损伤减少到最小。在完全生长培养基中,再次悬浮分离细胞,确定有活力细胞数。以大约200g离心5分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以5×10(6)到1×10(6)细胞/ml密度,在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿的冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。
细胞传代方法:1:2传代
MCF-12F细胞系相关产品:COLO-741细胞、FHL 124细胞、GRSL细胞
LLCPK1细胞系相关产品:SK-NMC细胞、B-CPAP细胞、HBEpiC细胞
SNU-638细胞系相关产品:Hu-P-T4细胞、VeroC1008细胞、Anip[973]细胞
SNU-251细胞系相关产品:NSC-34细胞、751-NA-15细胞、CPA 47细胞
DMS-153细胞系相关产品:H2052_MM细胞、OV 2008细胞、BJAB细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
SNU-878 epithelioid cells人肝癌细胞系
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
细胞形态特性:详见细胞说明书
培养细胞真的不难,最关键几点:1)所有的东西使用,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,最近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
UACC-812细胞系相关产品:HT144-mel细胞、CL 1-5细胞、H69C细胞
NOK细胞系相关产品:Biologics Standards-Cercopithecus-1细胞、RPMI 1846细胞、DoHH2细胞
HEM细胞系相关产品:SW 1116细胞、KASUMI6细胞、NCI-446细胞
NCI-H508细胞系相关产品:293-H细胞、NCI660细胞、JVM3细胞
J 82细胞系相关产品:RK-13细胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞、REC细胞
Tb1.Lu细胞系相关产品:CPA47细胞、H-1869细胞、L363细胞
18G3.cl 1细胞系相关产品:SNU-216细胞、NCI H157细胞、SKGIIIA细胞
McA-RH7777细胞系相关产品:H-1373细胞、SUM-149细胞、SMC-1细胞
NCI-H446细胞系相关产品:WM 451-Lu细胞、TALL1细胞、H-226细胞
BHK 21细胞系相关产品:NBL-1细胞、LLC细胞、HUVEC细胞
SNU-878 epithelioid cells人肝癌细胞系
OSK-1细胞系相关产品:REC-1细胞、Pro-5 Lec1.3c细胞、A-549细胞
VMRCLCD细胞系相关产品:L-5178-Y-R细胞、PaTu-8988s细胞、Astrocyte type I clone细胞
MDA-436细胞系相关产品:RKOAS451细胞、BNL-CL.2细胞、HUT28细胞
GM 637细胞系相关产品:TALL 1细胞、MV-1-Lu细胞、HCT15细胞
2V6.11细胞系相关产品:IPLB-Sf21AE细胞、NCIH1299细胞、WC00044细胞
PLC-PRF-5细胞系相关产品:NCIH345细胞、DU 4475细胞、207细胞
PLC-PRF-5细胞系相关产品:NCIH345细胞、DU 4475细胞、207细胞
Tb1.Lu细胞系相关产品:CPA47细胞、H-1869细胞、L363细胞
GM03569D细胞系相关产品:MSTO-211H细胞、MDA MB 175 VII细胞、HL-60 clone15细胞
NCIH650细胞系相关产品:K7M2 wt细胞、T 24细胞、MDA-361细胞
FRhK4细胞系相关产品:NCIH508细胞、CCLP-1细胞、Tn 5B1-4细胞
SCC 25细胞系相关产品:NCI-H1650细胞、hESC细胞、PAN 02细胞
CACO2细胞系相关产品:PCI:SG231细胞、HFB细胞、GBCSD细胞
OSA细胞系相关产品:SHIN3细胞、SUDHL-4细胞、OCI-Ly07细胞
Co 205细胞系相关产品:Hs1.Tes细胞、KNS81细胞、KYSE 270细胞
UK Pan-1细胞系相关产品:HPMEC细胞、DAN-G细胞、RBE4细胞
SW-1463细胞系相关产品:HO1-N-1细胞、MCF.7细胞、BEAS2B细胞
138 MG细胞系相关产品:HCC-9724细胞、A-204细胞、C2BBe1细胞
NCI-H292细胞系相关产品:FC33细胞、GM04671细胞、Eca-109细胞
Ketr3细胞系相关产品:HRA19细胞、VE细胞、RPMI7666细胞
VB细胞系相关产品:NCI-H526细胞、H-2452细胞、CCC-HEH-2细胞
HR-8348细胞系相关产品:MV(4;11)细胞、NCI-H441细胞、PLC/PRF5细胞
R 1610细胞系相关产品:E0771细胞、PA1细胞、MLE12细胞
McArdle RH-7777细胞系相关产品:WB F344细胞、786.O细胞、OVCAR-420细胞
FRO 81-2细胞系相关产品:hTERT-RPE1细胞、Ect1/E6E7细胞、IMCD3细胞
P3-X63-Ag 8.653细胞系相关产品:NCIH1618细胞、NBLS细胞、TGW细胞
MGHU1细胞系相关产品:WM2664细胞、MDA-MB-415细胞、RC-K8细胞
Hs839T细胞系相关产品:U-87MG ATCC细胞、PANC0203细胞、SK-Hep1细胞
TT细胞系相关产品:IEC 6细胞、no.11细胞、GM04154B细胞
HASMC细胞系相关产品:HOS TE 85细胞、LIPF178C细胞、OCI Ly1细胞
PIEC细胞系相关产品:SK-SH-SY5Y细胞、GC-1 spg细胞、WiDr-TC细胞
MCF-10A细胞系相关产品:NALM6细胞、Human Embryo Kidney-2细胞、MCF7-CTRL细胞
ME-180细胞系相关产品:B16BL-6细胞、B16 F1细胞、SJ-Rh 30细胞
hEM15A细胞系相关产品:NCI-H2591细胞、U-251_MG细胞、M-14细胞
CMT93细胞系相关产品:SK-MEL-2细胞、HCS2/8细胞、SK.OV.3细胞
P30/0HK细胞系相关产品:UMUC3细胞、H2107细胞、293 Ad5细胞
U-343细胞系相关产品:P3HR1-BL细胞、HCCC9810细胞、786-0细胞
Hs 819.T细胞系相关产品:MPVECs细胞、NU-GC-3细胞、M3 Clone M-3细胞
Hs 819.T细胞系相关产品:MPVECs细胞、NU-GC-3细胞、M3 Clone M-3细胞
Normal Rat, August 3, 1983细胞系相关产品:HL-60 clone15细胞、Rat 1细胞、HOK细胞
T-84细胞系相关产品:SK-RC 39细胞、HCC1500细胞、BHP10-3细胞
MOLT16细胞系相关产品:J774A1细胞、NCIH292细胞、NeHepLxHT细胞
LS411N细胞系相关产品:H-510细胞、GM2219C细胞、MC-CAR细胞
SW13细胞系相关产品:NCIH1436细胞、WERI-Rb1细胞、hTERT-HME-1细胞
OPM-2细胞系相关产品:NK-92MI细胞、OVCAR-420细胞、MSC细胞
ECC-12细胞系相关产品:RCC10细胞、SCL1细胞、Lec1细胞
PC-9/S1细胞系相关产品:SU86-86细胞、H-498细胞、D407细胞
E6-1细胞系相关产品:FRhK-4细胞、293 c18细胞、143 B细胞
Human ErythroLeukemia细胞系相关产品:EBC-1细胞、LAN6细胞、GM3570细胞
BEAS2B细胞系相关产品:JOSK-M细胞、MCA 38细胞、WM-239-A细胞
NCIH1395细胞系相关产品:C2-C12细胞、MH-S细胞、BJAB-1细胞
SNU-878 epithelioid cells人肝癌细胞系
JB6 clone 30, subclone 7b细胞系相关产品:JB6 Cl 30细胞、RS4;11细胞、RC92A细胞
Eca-109细胞系相关产品:SKMEL1细胞、H-522细胞、HCC94细胞
A-172 MG细胞系相关产品:HCC-827细胞、WRL68细胞、H378细胞
HEM-L细胞系相关产品:Z310细胞、RSC96细胞、D341MD细胞
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