"AAV-293 epithelioid cells腺病毒转化的人胚肾细胞系
细胞背景资料:我们推荐使用AAV-293细胞株繁殖腺病毒相关重组病毒。 AAV-293源自普遍使用的 HEK293细胞株,但产生的病毒滴度更高。 HEK293细胞是剪切过的腺病毒5型DNA转染的人胚肾细胞。 跟HEK293细胞一样,AAV-293细胞反式表达腺病毒E1基因,当共转染三个AAV助质粒(一个含ITR的质粒,pAAV-RC, 和E1缺失助质粒)时,可以产生有感染力的腺病毒-相关病毒颗粒。
细胞形态:上皮细胞样
细胞传代培养实验:体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代,以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞,并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后,由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭,将培养的细胞分散,从容器中取出,以1:2或1:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养,即为传代培养;细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间,与细胞世代或倍增不同。在一代中,细胞培增3~6次。细胞传代后,一般经过三个阶段:游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度,即细胞群的分裂相数/100个细胞。一般细胞分裂指数介于0.2%~0.5%,肿瘤细胞可达3~5%;细胞接种2~3天分裂增殖旺盛,是活力时期,称指数增生期(对数生长期),适宜进行各种试验。实验步骤:1.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出,在超净工作台中倒掉瓶内的培养液,加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜),静置5~10分钟。2.在倒置镜下观察被消化的细胞,如果细胞变圆,相互之间不再连接成片,这时应立即在超净台中将消化液倒掉,加入3~5ml新鲜培养液,吹打,制成细胞悬液。3.将细胞悬液吸出2ml左右,加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加3ml左右培养液,盖好瓶塞,送回二氧化碳培养箱中,继续进行培养。一般情况,传代后的细胞在2小时左右就能附着在培养瓶壁上,2~4天就可在瓶内形成单层,需要再次进行传代。
U-251-MG细胞系相关产品:SW-962细胞、RPTEC TERT1细胞、Hs840T细胞
Hs934T细胞系相关产品:Kit-225-K6细胞、hRPTC细胞、HEK293F细胞
PZ-HPV-7细胞系相关产品:NCI-SNU-216细胞、174xCEM.T2细胞、HEK-293FT细胞
细胞生长:贴壁
AAV-293 epithelioid cells腺病毒转化的人胚肾细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
血清必须贮存于–20~-70℃,若存放于4℃,请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶,可将40~45ml分装于无菌50ml离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10%,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌,不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物,则可将血清加入培养基内一起过滤,勿直接过滤血清。瓶装(500ml)血清解冻步骤(逐步解冻法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室温下全溶后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40~45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沈淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏,而影响血清之品质。血清凝絮物:发生之原因有许多种,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成,这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物,可用离心3000rpm,5min去除,或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物,因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”:通常经过热处理之血清,沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”,常会误认为血清遭受污染,而将血清放在37℃中欲培养此“微生物”,但在37℃环境下,又会使此沈淀物增多,更会误认为微生物之增殖,但以培养细菌之培养基检测,又没有污染。一般而言,此小黑点应不会影响细胞之生长,但若怀疑此血清之品质,应立即停用,更换另一批号的血清。
细胞传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
RGM-1细胞系相关产品:RCC_7860细胞、MDA436细胞、HCC-1143细胞
COR-L51细胞系相关产品:C26细胞、MC/9细胞、LM8细胞
KYSE-410细胞系相关产品:TE1细胞、SKMEL-1细胞、BTT739细胞
IHH-4细胞系相关产品:PE CA PJ34细胞、CEM-C1细胞、L 132细胞
CBRH7919细胞系相关产品:CHP100细胞、MDA-PCa-2b细胞、BT 325细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
AAV-293 epithelioid cells腺病毒转化的人胚肾细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
细胞形态特性:上皮细胞
细胞冻存的步骤:1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为5×106~1×107/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具体要看培养的细胞类型来选择;3)将分装上述细胞悬液于2ml冻存管中,每管0.25ml。冻存管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数);4)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中,-80℃冰箱过夜。;如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后转到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,取出一只冻存管细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。
870细胞系相关产品:H1650细胞、BTI-Tn5B14细胞、EFO 27细胞
LN382细胞系相关产品:526mel细胞、PL5细胞、GC1-SPG细胞
CCRF-CEM/S细胞系相关产品:Panc05.04细胞、PANC0403细胞、MLOY4细胞
CCRF-SB细胞系相关产品:RT-BM 1细胞、NS1-1 Ag4.1细胞、C12细胞
Ocular Choroidal Melanoma-1细胞系相关产品:XuanWei Lung Cancer-05细胞、A375-SM细胞、CHP 212细胞
Mo 59J细胞系相关产品:GA-10 clone 4细胞、HuTu 80细胞、Ca759细胞
HOS (TE85)细胞系相关产品:H4-IIE-C3细胞、HT-1080细胞、PANC-08-13细胞
UACC893细胞系相关产品:H-841细胞、HEK-293FT细胞、CCRF-CEM/S细胞
Institute for Medical Research-32细胞系相关产品:MDA-415细胞、HCC1187细胞、COLO357细胞
HCC1954BL细胞系相关产品:HA1800细胞、S-16细胞、LOU-NH-91细胞
AAV-293 epithelioid cells腺病毒转化的人胚肾细胞系
HLF细胞系相关产品:HSC-T6细胞、NCI-H774细胞、SW-1222细胞
MDA.MB.435细胞系相关产品:B-cell with DC Morphology细胞、PCI-4.2细胞、Liver-02细胞
FHs74Int细胞系相关产品:D341细胞、KP-N-RT-BM细胞、CAL85-1细胞
NCI-H187细胞系相关产品:RCK8细胞、Y 1细胞、HEK-293H细胞
LuCL4细胞系相关产品:CD 18细胞、BC-025细胞、Baby Hamster Kidney 21细胞
Microbiological Associates-104细胞系相关产品:HR1K细胞、KG-1a细胞、LN 382细胞
Microbiological Associates-104细胞系相关产品:HR1K细胞、KG-1a细胞、LN 382细胞
CWR22R细胞系相关产品:EAhy926细胞、A72细胞、SK_N_BE2C细胞
OVCAR 433细胞系相关产品:COLO394细胞、SMMC7721细胞、RPMI 8226细胞
Hs 695.T细胞系相关产品:HSC6细胞、IBRS-2细胞、CHL-11细胞
HC11细胞系相关产品:MM6细胞、HEC-251细胞、NUGC4细胞
CAL-78细胞系相关产品:NCI-H1435细胞、COLO 680N细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5细胞
SU86-86细胞系相关产品:H-4细胞、S3 HeLa细胞、UPCI:SCC090细胞
alpha TC1-6细胞系相关产品:Namalva细胞、H-1688细胞、NCIH2228细胞
D407细胞系相关产品:NIH:OVCAR-3细胞、IB-RS-2细胞、Panc5.04细胞
H7721细胞系相关产品:OCI-Ly 18细胞、NCIH2073细胞、PY8119细胞
RSC-364细胞系相关产品:NCI-H-128细胞、KMBC细胞、MES-SA细胞
University of Arizona Cell Culture-812细胞系相关产品:WEHI 231细胞、HCC-1143细胞、NCIH460细胞
HCC-2279细胞系相关产品:HPAEC细胞、UMRC2细胞、UO31细胞
NCIH460细胞系相关产品:Panc02-H0细胞、COLO-357细胞、NCIH292细胞
LU-65M细胞系相关产品:OE19细胞、LL/2细胞、NCIH1436细胞
SKNBE细胞系相关产品:PZ-HPV-7细胞、L-132细胞、H-446细胞
Jurkat, Clone E6-1细胞系相关产品:H2452细胞、HEYA8细胞、MC3T3E1细胞
HaCaT细胞系相关产品:HO-1-N-1细胞、Be Wo细胞、MGSMC细胞
WM266细胞系相关产品:KE-39细胞、NTERA2-cloneD1细胞、293EBNA细胞
NCI-H2291细胞系相关产品:NCI-H1299细胞、OCI-LY-19细胞、H1435细胞
SPCA1细胞系相关产品:Hep-G2细胞、DHL-5细胞、CCD 966 SK细胞
Chang liver细胞系相关产品:COS-7细胞、IB-RS2细胞、L-6TG细胞
AE 1201细胞系相关产品:Ly10细胞、L-5178-Y细胞、SNU-1040细胞
COV362细胞系相关产品:SKMEL-1细胞、L5178YR细胞、P30 OHK细胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3细胞系相关产品:SNU-869细胞、SK-Col-1细胞、D341细胞
H1792细胞系相关产品:IM9细胞、Caco-2BBe细胞、MRC-V细胞
UACC812细胞系相关产品:SNU-719细胞、HAEC细胞、SW1990细胞
HCC0044细胞系相关产品:C-4 I细胞、Hs 852.T细胞、VERO76细胞
NCI-H748细胞系相关产品:ARH 77细胞、Embryonic Bovine Tracheal cells细胞、COR-L26细胞
NPA 87细胞系相关产品:L-6TG细胞、32Dcl3细胞、Swiss 3T3细胞
hCMEC/D3细胞系相关产品:SACC-83细胞、EBTr细胞、MN9D细胞
Hs888Lu细胞系相关产品:COLO 829细胞、Y79细胞、SUM52PE细胞
HEL细胞系相关产品:OSA细胞、MPP 89细胞、MDAMB175VII细胞
MDAMB435S细胞系相关产品:Caco-2/BBe 1细胞、TOV21细胞、NCI-SNU-520细胞
UMR 106细胞系相关产品:SW 1990细胞、BSC1细胞、PC-3M-IE8细胞
A-427细胞系相关产品:D407细胞、Centre Antoine Lacassagne-62细胞、SL-1细胞
RL-95-2细胞系相关产品:SK-ES-1细胞、Y3-Ag123细胞、SUDHL2细胞
SL1细胞系相关产品:Cates-1B细胞、NCI-H2347细胞、TFK1细胞
SNK6细胞系相关产品:BJA-B1细胞、H69C细胞、CCC-HPF-1细胞
HEK293-FT细胞系相关产品:SVEC 4-10细胞、LM2-4175细胞、PL12细胞
Embryonic Bovine Tracheal cells细胞系相关产品:NCM460细胞、HNE2细胞、DMS 153细胞
Emory University-3细胞系相关产品:NCI747细胞、CHP100细胞、Capan-2细胞
SB细胞系相关产品:SU8686细胞、KG-1细胞、Tu 177细胞
OACP4 C细胞系相关产品:H1581细胞、LLCPK1细胞、MOLT4细胞
RSC-96细胞系相关产品:SKRC-52细胞、769-P细胞、SUM 52PE细胞
AAV-293 epithelioid cells腺病毒转化的人胚肾细胞系
Mv1Lu细胞系相关产品:P3X63-Ag8.653细胞、KU-812细胞、BIU-87细胞
NCIH2052细胞系相关产品:G361mel细胞、EBTr (NBL-4)细胞、SNU-719细胞
C-33-A细胞系相关产品:PVEC细胞、NCIH1184细胞、Panc-08.13细胞
CCRF-CEM/S细胞系相关产品:Panc05.04细胞、MDAMB361细胞、HCC0015细胞
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