Alarma Blue细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒

Alarma Blue细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒

中文名称：Alarma Blue细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒

英文名称：AlamaBlue Cell Viability Assay Kit 说

产品规格：500T

AlamaBlue 细胞活力检测试剂盒提供了一种可靠、灵敏、安全和低成本的快速有效检测细胞活力与毒性的方法。AlamaBlue 通过在细胞生长的培养基中所产生的化学还原反应，将非荧光信号的染料转换成为一红色荧光物质，试卤灵（9-羟基-3-异吩恶嗪酮7-羟基-3H-吩恶嗪-3-酮），从而检测细胞的存活率。维持细胞生产需要还原性环境而抑制生长则表现为氧化型环境。细胞生长率相关的降低可表现为氧化还原指示剂从氧化型（非荧光素、紫色）转为还原型（荧光素、红色）。该荧光信号可以用530~560nm 的激发波激发，在590nm 处可以获发射波，检测570 和600nm 的的吸光度值，校正监测值，可以减去相应的570nm 和600nm 的背景吸光度值。检测所产生的荧光信号是与样品中的活细胞数成正比的。

AlamaBlue 细胞活性检测试剂盒的灵敏度相似于[3H]胸苷法检测细胞增殖法。根据不同类型的细胞，AlamaBlue 可以检测到至少40个细胞，同时保证很好的重现性和灵敏度。作为试卤灵（紫红、红色荧光）可以进一步被还原为水解化的试卤灵（无色、无荧光），当细胞数量增多，所有的刃天青（7-羟基-3-羰基-10-氧化-三氢吩恶嗪）被转换为试卤灵（9-羟基-3-异吩恶嗪酮7-羟基-3H-吩恶嗪-3-酮），试剂盒的信号反而会发生衰减。因此，对于您所用的试剂盒来说，针对不同的细胞类型，应该调整您的细胞数，做相应的优化，才能得到更好的结果。

操作说明
以下操作可用作通用指导建议。考虑不同细胞类型与培养条件的差异性，有必要根据实际情况优化您的操作步骤。
1. 96 孔细胞培养板每孔100μL 培养基饲养细胞，控制细胞数目在40~10000 个/贴壁细胞，2000~500000 个/悬浮细胞。设置空培养基做对照。
2. 加入10μL AlamaBlue 溶液至培养基中，37 度孵育：24 小时（比色法读数）；5-6 小时（荧光读数）。
3. 检测570nm 和600nm 的吸光度，或者用荧光微孔板读数530nm 激发，590nm 发射波读数。
4. 如果采用比色法检测，选择OD570-OD600 检测，如果检测荧光信号，请在校正OD 值后，先设置标准曲线，选择合适您实验的细胞浓度。

操作步骤
1. 96 孔板饲养细胞至所需浓度。
2. 根据您的实验加药刺激，培养细胞一段时间。
3. 加入10μL AlamaBlue 溶液至培养基中，37 度孵育：24 小时（比色法读数）；5-6 小时（荧光读数）。
4. 检测570nm 和600nm 的吸光度，或者用荧光微孔板读数530nm 激发，590nm 发射波读数。
5. 如果采用比色法检测，选择OD570-OD600 检测，如果检测荧光信号，请在校正OD 值后，先设置标准曲线，选择合适您实验的细胞浓度。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！