"COLO 829 epithelioid cells人黑色素瘤细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。
Hs606T细胞系相关产品:FL-83B细胞、H322细胞、HCC2935细胞
3T3NIH细胞系相关产品:LX-2细胞、HCC1395细胞、OV1-P细胞
P3 NS1 Ag4/1细胞系相关产品:OLN93细胞、Panc 2.03细胞、H-740细胞
细胞生长:贴壁
COLO 829 epithelioid cells人黑色素瘤细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
血清必须贮存于–20~-70℃,若存放于4℃,请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶,可将40~45ml分装于无菌50ml离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10%,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌,不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物,则可将血清加入培养基内一起过滤,勿直接过滤血清。瓶装(500ml)血清解冻步骤(逐步解冻法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室温下全溶后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40~45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沈淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏,而影响血清之品质。血清凝絮物:发生之原因有许多种,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成,这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物,可用离心3000rpm,5min去除,或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物,因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”:通常经过热处理之血清,沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”,常会误认为血清遭受污染,而将血清放在37℃中欲培养此“微生物”,但在37℃环境下,又会使此沈淀物增多,更会误认为微生物之增殖,但以培养细菌之培养基检测,又没有污染。一般而言,此小黑点应不会影响细胞之生长,但若怀疑此血清之品质,应立即停用,更换另一批号的血清。
细胞传代方法:1:3-1:6传代,2-3天换液1次。
MDA MB 436细胞系相关产品:U266-B1细胞、EAC-E2G8细胞、KM12-SM细胞
B35细胞系相关产品:HT-3细胞、NCI-H1688细胞、MeT-5A细胞
H2052_MM细胞系相关产品:SNU-368细胞、GBCSD细胞、WM 451-Lu细胞
H-2122细胞系相关产品:SF126细胞、MDA231-LM2-4175细胞、TF1细胞
TW 01细胞系相关产品:A20细胞、ECC-1细胞、SC细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
COLO 829 epithelioid cells人黑色素瘤细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
细胞形态特性:成纤维细胞
细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
HPAF2细胞系相关产品:EB-2细胞、NCI-H1373细胞、NCIH358细胞
SP-2/0-AG14细胞系相关产品:LAD2细胞、MN60细胞、KP-N-NS细胞
Hs-675-T细胞系相关产品:HO8910细胞、C4 I细胞、RPMI-8226S细胞
BV-2细胞系相关产品:SKG IIIa细胞、INS1-E细胞、Mo7e细胞
PFSK细胞系相关产品:NCI H548细胞、RAW264细胞、SUSM-1细胞
A431/P细胞系相关产品:NCIH2135细胞、MCF12F细胞、LMTK-细胞
SW-948细胞系相关产品:SW 1573细胞、CL-34细胞、SKG-3a细胞
Centre Antoine Lacassagne-85-1细胞系相关产品:CHP-212细胞、Caco2BBe细胞、MDA330细胞
Calf Pulmonary Artery Endothelial细胞系相关产品:GTL16细胞、T47-D细胞、MDA-468细胞
SF 539细胞系相关产品:SNU739细胞、HTR-8/SV-neo细胞、NH6细胞
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HM细胞系相关产品:HCC1143细胞、P388D1细胞、SK-Mel 1细胞
LS-411细胞系相关产品:H1693细胞、MC3T3-E1 Subclone 14细胞、OVCA433_Bast细胞
LS 513细胞系相关产品:H292细胞、Molm14细胞、XuanWei Lung Cancer-05细胞
MDAMB330细胞系相关产品:Sarcoma OSteogenic-2细胞、OsA-CL细胞、MADISON LUNG TA-109细胞
HCC2108细胞系相关产品:BNCL2细胞、MXI细胞、SW1783细胞
H1781细胞系相关产品:MAC1细胞、mREC细胞、HEC151细胞
Hs27细胞系相关产品:K299细胞、OS-732细胞、HCC-44细胞
HOP92细胞系相关产品:MCF.7细胞、OCI-Ly03细胞、KYSE-270细胞
ECC12细胞系相关产品:HEK-EBNA细胞、U-118 MG细胞、Tadarida brasiliensis 1 lung细胞
HCC-38细胞系相关产品:KLM1细胞、KE39细胞、SW-756细胞
LA-795细胞系相关产品:NR 8383细胞、HTori 3细胞、DHL6细胞
HCEpiC细胞系相关产品:C2BBe1细胞、Meat Animal Research Center-145细胞、RFL-6细胞
H-838细胞系相关产品:CCLP-1细胞、ACC3细胞、IMR 90细胞
L(TK-)细胞系相关产品:MC57G细胞、SUNE-1细胞、RKO-AS-45-1细胞
NCIH2029细胞系相关产品:16-HBE细胞、CFPAC1细胞、Transformed Human Liver Epithelial-3细胞
TE3细胞系相关产品:HT 1376细胞、NCI-H1650细胞、GL-261细胞
Ku812F细胞系相关产品:159PT细胞、GC-2细胞、CD-18细胞
RDES细胞系相关产品:RC-4B/C细胞、CD 18细胞、BT 549细胞
NCI-H3255细胞系相关产品:CATH-a细胞、C8166-CD4细胞、H-196细胞
GBCSD细胞系相关产品:Vx2细胞、IGROV细胞、Hs 274.T细胞
NCI-H774细胞系相关产品:UMUC14细胞、BE2_C细胞、CCC-HEL-1细胞
CPAE细胞系相关产品:OSRC2细胞、LS411细胞、SW48细胞
HS-5细胞系相关产品:HEK293-F细胞、HEK293细胞、TN5B14细胞
MC3T3-L1细胞系相关产品:C-Li-7细胞、BV2细胞、MES-SA-Dx5细胞
FaDu细胞系相关产品:Farage细胞、D-407细胞、SK-MES-1细胞
HuT 102细胞系相关产品:CAKI 1细胞、GM15452细胞、SW954细胞
SUM-102细胞系相关产品:H-1651细胞、NRK 49F细胞、SKN-AS细胞
BT细胞系相关产品:OCI-Ly 19细胞、SHP-77细胞、SCC25细胞
BE(2)M-17细胞系相关产品:P3X63 AG8-653细胞、GM00637B细胞、50.B1细胞
BPH-1细胞系相关产品:H711细胞、HEK;293细胞、Hs-746T细胞
NCI-A549细胞系相关产品:M14-MEL细胞、AdHek细胞、U266 Bl细胞
HVSMC细胞系相关产品:OCI-AML5细胞、1.1B4细胞、BLO 11细胞
624-mel细胞系相关产品:HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]细胞、aNK细胞、NUGC-2细胞
D-283MED细胞系相关产品:293 Ad5细胞、KMS-18细胞、P3-NS1/1-Ag4-1细胞
CL 1-5细胞系相关产品:PANC-1细胞、H-1563细胞、IBMF-7细胞
Tokyo Medical and Dental university 8细胞系相关产品:CEK细胞、HB 611细胞、FLC-7细胞
HBE 135-E6E7细胞系相关产品:SaOS细胞、HPAEpiC细胞、Clone 929细胞
SKNO1细胞系相关产品:MDA-MB-175VII细胞、HCC-1937细胞、CT26细胞
N2a细胞系相关产品:MPP89细胞、Gejiu Lung Carcinoma-82细胞、SNU16细胞
SNU368细胞系相关产品:NB-4细胞、GM02219细胞、Detroit562细胞
Hs 578T细胞系相关产品:SK-N-AS细胞、F98细胞、WM 239-A细胞
HPAF II细胞系相关产品:MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI细胞、Caki-1细胞、NUGC2细胞
CCLP1细胞系相关产品:HS0578T细胞、P3X63-Ag8.653细胞、F442-A细胞
343MG细胞系相关产品:Fox/NY细胞、ECC-12细胞、BCP-1细胞
MEG01细胞系相关产品:OVCAR4细胞、Hs706T细胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4细胞
SK-ES细胞系相关产品:LK 2细胞、Emory University-3细胞、U-138 MG细胞
Neuro2a细胞系相关产品:DKMG细胞、IPAM-WT细胞、H-1651细胞
H2106细胞系相关产品:RIMEC细胞、SW 403细胞、RCC-10RGB细胞
P-36细胞系相关产品:HCT_116细胞、Chinese Hamster Ovary细胞、VM-CUB-1细胞
H-2081细胞系相关产品:PK 15细胞、NuTu-19细胞、HCC-1569细胞
HS-68细胞系相关产品:HCC-1438细胞、CCD-112 CoN细胞、ChaGo-K-1细胞
COLO 829 epithelioid cells人黑色素瘤细胞系
GP293细胞系相关产品:KU 812细胞、CL-11细胞、BMSC/hBMSCs细胞
RBSMC细胞系相关产品:LNCaP-C4-2细胞、CNE2细胞、T-CAM2细胞
SCCVII细胞系相关产品:U-373MG ATCC细胞、HS 683T细胞、RH35细胞
Hs675T细胞系相关产品:A2780/CP70细胞、TU 686细胞、SW-1222细胞
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