"OE33 epithelioid cells人食管腺癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
细胞复苏相关注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。4.离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
KU-812F细胞系相关产品:E304细胞、LAN-6细胞、BpRc1细胞
U266B1细胞系相关产品:OV433细胞、EO771细胞、OV1063细胞
WIL2-S细胞系相关产品:COLO 824细胞、TH1细胞、HRPEpiC细胞
细胞生长:贴壁
OE33 epithelioid cells人食管腺癌细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
最近在培养细胞时,发现其状态不是很好,很容易扎堆生长,用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来,很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的,传代的第二天,有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢?你好,我养的细胞和你一样,消化下来也是一团的,但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀,分皿后在镜下看一看,移动培养皿的时候尽量动作轻,避免晃动。细胞生长挺快,那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能:一、细胞消化后吹打不均匀,造成细胞成团生长:二、细胞细化太过,细胞成片脱落,吹打时没有受力点,细胞聚团生长。解决办法:根据细胞生长的情况进行多次消化,将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养:一般步骤为:真空泵吸走培养基,1XPBS漂洗两次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿为例),37度放置数分钟,轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落,加入适量血清,以吸管上下吸放数次以打散细胞团块,离心后加入新鲜培养基,按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间,若胰酶处理太久,容易造成细胞贴壁不紧,显微镜下观察立体感不强,严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901几种癌细胞处理时间可适当放长,一般处理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比较容易脱落,2min足矣,P19Cl6和293细胞贴壁不紧,可在PBS漂洗后,直接换新鲜培养基打散。
细胞传代方法:1:2传代
MDAMB157细胞系相关产品:MRC-V细胞、H-596细胞、no-11细胞
M 1细胞系相关产品:32D.cl3细胞、NCIH187细胞、639 V细胞
Medical Research Council cell strain-9细胞系相关产品:NCIH441细胞、T24(ECV304)细胞、H4-II-E-C3细胞
PFSK-1细胞系相关产品:GT38细胞、Tu-212细胞、Roswell Park Memorial Institute 8402细胞
TE15细胞系相关产品:N-Tera-2细胞、PAEC细胞、4T1-LUC细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
OE33 epithelioid cells人食管腺癌细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
细胞形态特性:上皮样
培养细胞真的不难,最关键几点:1)所有的东西使用,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,最近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5细胞系相关产品:H-676B细胞、Centre Antoine Lacassagne-148细胞、RIN-m 14B细胞
M059J细胞系相关产品:Reuber-H-35 hepatoma细胞、RPE D407细胞、CFSC-8B细胞
UMC11细胞系相关产品:U-373-MG细胞、KRC/Y细胞、NTERA-2 cl.D1细胞
VeroC1008细胞系相关产品:Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B细胞、CEMO-1细胞、EST81细胞
Immortal Pig Intestinal-2I细胞系相关产品:CHO Lec1细胞、LM TK negative细胞、Centre Antoine Lacassagne-27细胞
SKml2细胞系相关产品:P3/X63-Ag8细胞、C-32细胞、MOLM16细胞
RASMC细胞系相关产品:OCI-Ly8细胞、TPC-1细胞、WSU-DLCL-2细胞
NRK clone 52E细胞系相关产品:PBL细胞、ARO81细胞、NIH:OVCAR-5细胞
HPAF-II细胞系相关产品:Reh细胞、DMS114细胞、A375-SM细胞
DF-1细胞系相关产品:H1184细胞、UPCI:SCC090细胞、NCIH727细胞
OE33 epithelioid cells人食管腺癌细胞系
Kit 225-K6细胞系相关产品:3T3-F442A细胞、PIEC细胞、SK-MEL-3细胞
H-2452细胞系相关产品:S-16细胞、hOMF细胞、BCaP 37细胞
KLM-1细胞系相关产品:RPE1细胞、KALS1细胞、MEL细胞
SPDC-CCL141细胞系相关产品:CCC-HEH-2细胞、CHP-126细胞、LTEP a2细胞
NCI-H82细胞系相关产品:VSC4.1细胞、PT67细胞、H2108细胞
H4-II-E细胞系相关产品:Hmy.2 CIR细胞、PANC 203细胞、624细胞
H4-II-E细胞系相关产品:Hmy.2 CIR细胞、PANC 203细胞、624细胞
HOS细胞系相关产品:S16细胞、COLO680N细胞、MIA-PaCa-2细胞
JROECL 21细胞系相关产品:KATOIII细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231细胞、MeT5A细胞
CEF细胞系相关产品:Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A细胞、343 MG细胞、MALME 3M细胞
NCI-H2087细胞系相关产品:SW962细胞、2B4细胞、KYSE30细胞
MV-4-11细胞系相关产品:OCILY-3细胞、SPC-A1细胞、UACC-893细胞
BIC细胞系相关产品:NCI-H1563细胞、Adeno 293细胞、Panc-3_27细胞
BEND细胞系相关产品:SJ-Rh 30细胞、HBMEC细胞、MOLP-2细胞
NTHY-ORI3.1细胞系相关产品:hEEC细胞、Mv1Lu细胞、HMy2.CIR细胞
PSN-1细胞系相关产品:BJ1细胞、NB-19细胞、293E细胞
RH30SJ细胞系相关产品:End1/E6E7细胞、TCC-SUP细胞、HT22细胞
NU-GC-3细胞系相关产品:MGC803细胞、ACCM细胞、MC 116细胞
ONS-76细胞系相关产品:3D4/21细胞、SC细胞、KRC Y细胞
NCIH2009细胞系相关产品:FD-LSC-1细胞、CCD1095Sk细胞、CT26.WT细胞
YES-2细胞系相关产品:NCI-H889细胞、OCI-LY-18细胞、BNL 1MEA.7R.1细胞
Eca109细胞系相关产品:H283细胞、B104 [Rat neuroblastoma]细胞、H1341细胞
NPC-TW039细胞系相关产品:Madison lung细胞、HCC-1954细胞、Ramos (RA)细胞
COS7细胞系相关产品:BALB/3T3 cl. A31细胞、HR1K细胞、Vx2细胞
RPMI7951细胞系相关产品:SK-N-BE(2)-C细胞、HT144细胞、TGW-nu细胞
Hs-729-T细胞系相关产品:RPMI8226细胞、OCILY-10细胞、MM96L细胞
BE2-C细胞系相关产品:HCT/FU细胞、U-2-OS细胞、NCI-841细胞
Roswell Park Memorial Institute 8402细胞系相关产品:Centre Antoine Lacassagne-39细胞、NCI-H378细胞、CAL-33细胞
WC00044细胞系相关产品:HEK 293 EBNA细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16细胞、MDA-175细胞
MCF-7/ADR细胞系相关产品:CAL 62细胞、CRFK细胞、SCC9细胞
HT-1376细胞系相关产品:SUSM1细胞、NCI-H716细胞、KBM7细胞
OVCAR8/ADR细胞系相关产品:CTLA4 Ig-24细胞、RBL-2H3细胞、LN229细胞
OCI-Ly03细胞系相关产品:L929细胞、A-253细胞、MC/9细胞
MA-782细胞系相关产品:NKT细胞、AR41P细胞、UCLA SO M14细胞
Hs-578-T细胞系相关产品:H2196细胞、OKa-C-1细胞、H-2228细胞
EU-4细胞系相关产品:FUOV1细胞、ZYM-DIEC02细胞、HEK-293F细胞
CHL-IU细胞系相关产品:KU-812-F细胞、SK-BR3细胞、QGY-7703细胞
SK-MEL-31细胞系相关产品:CHO cell clone K1细胞、Centre Antoine Lacassagne-39细胞、PC 61.5.3细胞
SU-DHL-2细胞系相关产品:KTA7细胞、KOSC-2 cl3-43细胞、Rainbow Trout Embryo细胞
MCF-7/ADR-RES细胞系相关产品:PT67细胞、B16-F0细胞、MDAMB-231细胞
GM346细胞系相关产品:LN 229细胞、HS-766-T细胞、NCI-H2286细胞
NTERA2-cloneD1细胞系相关产品:GL-261细胞、MB49细胞、SUNE 1细胞
U87细胞系相关产品:PANC1005细胞、ECC10细胞、RCM1细胞
253JBV细胞系相关产品:BT549细胞、Hs 578.T细胞、BJ [Human fibroblast]细胞
LC-2/ad细胞系相关产品:TE-85 clone 5细胞、SDBMSC细胞、AG 9细胞
VMCUB1细胞系相关产品:H-508细胞、CEMC1细胞、PANC0403细胞
OVCAR-3细胞系相关产品:TE10细胞、SW1417细胞、LN-382细胞
Normal Rat, August 3, 1983细胞系相关产品:HL-60 clone15细胞、Rat 1细胞、HOK细胞
H-446细胞系相关产品:U251-MG细胞、Hs 888.T细胞、A9(Hamprecht)细胞
GB1细胞系相关产品:COLO 680N细胞、HL1细胞、rUCMSCs细胞
HEL9217细胞系相关产品:Kato-III细胞、H1836细胞、TE 85.T细胞
OE33 epithelioid cells人食管腺癌细胞系
OCILY-3细胞系相关产品:Hs 888Lu细胞、Walker/LLC-WRC256细胞、P3X63 Ag8.653细胞
TE3细胞系相关产品:HT 1376细胞、Y3细胞、343MG细胞
T/GHA-VSMC细胞系相关产品:SGC-7901细胞、OUMS23细胞、MCM细胞
UMC11细胞系相关产品:U-373-MG细胞、Mono Mac 1细胞、A498细胞
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