NCI-H2171 epithelioid cells人小细胞肺癌细胞系

"NCI-H2171 epithelioid cells人小细胞肺癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
SNU878细胞系相关产品：L cell细胞、CMECs细胞、A-875细胞
HT细胞系相关产品：WM35细胞、MIHA细胞、SNU1细胞
Panc 04.03细胞系相关产品：Mono-Mac-1细胞、T2(174 x CEM.T2)细胞、L428细胞
细胞生长：贴壁
NCI-H2171 epithelioid cells人小细胞肺癌细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞的冻存：为避免污染造成的损失，最小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化，需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前，细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培养基；包含１０%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基；５０%细胞条件培养基和５０%含有１０%甘油的新鲜培养基或５０%细胞条件培养基和５０%含有１０%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基，一些普通的培养基成分可能是：５０%细胞条件无血清培养基和５０%包含有７.５%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有７.５%二甲基亚砜和１０%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存：计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约２００～４００g离心５分钟沉淀细胞，使用移液管移去上清到最小体积，不要搅乱细胞。以１×１０(７)到５×１０(７)细胞/ml密度，在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在无血清培养基中，再次悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿冰上或放入４℃冰箱中，５分钟内开始冷冻步骤。细胞以１℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存：使用分离试剂从基层分离细胞，分离时尽可能温和，使对细胞的损伤减少到最小。在完全生长培养基中，再次悬浮分离细胞，确定有活力细胞数。以大约２００g离心５分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到最小体积，不要搅乱细胞。以５×１０(６)到１×１０(６)细胞/ml密度，在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿的冰上或放入４℃冰箱中，５分钟内开始冷冻步骤。细胞以１℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。
细胞传代方法：３-４天换液１次。
RASMC细胞系相关产品：OCI-Ly8细胞、TPC-1细胞、WSU-DLCL-2细胞
Hs-688A-T细胞系相关产品：LNCaP.FGC细胞、ANA1细胞、HTR-8/SV-neo细胞
HCC0070细胞系相关产品：NCIH1395细胞、TO 175.T细胞、DHL-16细胞
Colon 38细胞系相关产品：SKMEL-31细胞、Ls-174-T细胞、SkMel31细胞
H6c7细胞系相关产品：Y-1细胞、253JB-V细胞、LL/2细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
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细胞生长特性：悬浮生长
细胞形态特性：聚团悬浮
培养细胞真的不难，最关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，最近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
P-815细胞系相关产品：P3-X63-Ag8细胞、Human fetal lung fibroblast 1细胞、Panc-327细胞
Ca-Ski细胞系相关产品：LIM1215细胞、KPNRTBM1细胞、L-1210细胞
Sp2/0-Ag14细胞系相关产品：SUDHL5细胞、OCI-Ly 8细胞、CEMO-1细胞
MDA-MB-361细胞系相关产品：LICR-LON-HN6细胞、FU-MMT-1细胞、Walker256-TC细胞
CAKI 1细胞系相关产品：OCI Ly10细胞、MILE SVEN1细胞、RC-4B/C细胞
LC-2-Ad细胞系相关产品：SKRC 39细胞、HLFa细胞、WB-F344细胞
RINm-5F细胞系相关产品：Capan-2细胞、NCIH1781细胞、hs 68细胞
HPB-ALL细胞系相关产品：Eca 109细胞、H3396细胞、PCI-4.2细胞
LTEP a2细胞系相关产品：P3X63 AG 8.653细胞、870细胞、Malme-3 M细胞
C4I细胞系相关产品：V 79-4细胞、SL-1细胞、MUM2B细胞
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HepG2/C3A细胞系相关产品：SUM-102PT细胞、HUCCT1细胞、LS411细胞
Tb 1-Lu细胞系相关产品：BNL-HCC细胞、NCIH1688细胞、GM07404D细胞
SCL-I细胞系相关产品：WM-266-4细胞、UCLA-SO-M20细胞、NCI-H647细胞
Hs343T细胞系相关产品：Colon 26细胞、HPDLF细胞、FAO-1细胞
RCC-4细胞系相关产品：A549细胞、KPL1细胞、COLO 320 HSR细胞
COLO 680N细胞系相关产品：SVG(P12)细胞、J45.01细胞、5637细胞
COLO 320细胞系相关产品：THLE-2细胞、UM-UC-3细胞、NCI-H1876细胞
SKNSH细胞系相关产品：OVCAR 432细胞、Pfeiffer细胞、AR41P细胞
L-6TG细胞系相关产品：P-2003细胞、A875细胞、GS-9L细胞
ME-1 [Human leukemia]细胞系相关产品：Murine Thymic Epithelial Cell line 1细胞、U373MG细胞、NCIH2591细胞
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NRK 49F细胞系相关产品：MCA205细胞、YAC-1细胞、T-CAM2细胞
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Instituto Biologico-Rim Suino-2细胞系相关产品：SSP-25细胞、H6c7细胞、HANK细胞
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TFK1细胞系相关产品：ID8细胞、H520细胞、HCC1143细胞
H-1092细胞系相关产品：Hs 863.T细胞、MCF 10A细胞、H-1238细胞
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DAN-G细胞系相关产品：aNK细胞、MC 3T3-E1细胞、Ramos-2G6-4C10细胞
PCI-4.2细胞系相关产品：CWR22-R1细胞、D-283细胞、DMS114细胞
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SK-N-AS细胞系相关产品：FDCP-1细胞、NCI N87细胞、CCRF细胞
HLMVEC细胞系相关产品：MKN 7细胞、ML-2细胞、HPaSteC(HPSC)细胞
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Human Corneal Endothelial Cells-12细胞系相关产品：SGC-7901/DDP细胞、BAEC细胞、UPCI-SCC-154细胞
CCD841CoTr细胞系相关产品：A-72细胞、LC2/Ad细胞、SGC-7901细胞
AZ-521细胞系相关产品：MADISON LUNG TA-109细胞、RL952细胞、CG-4细胞
Sp2/0-Ag14细胞系相关产品：SUDHL5细胞、BEAS 2B细胞、Lung cancer-1/squamous细胞
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