"NCI-H69 epithelioid cells人小细胞肺癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很好并且不损失细胞！
NS20Y细胞系相关产品：MA-782细胞、bEnd.3[BEND3]细胞、Mc Coy细胞
C22 (Clara)细胞系相关产品：EFM-192C细胞、HCC1833细胞、NCI/ADRRES细胞
B10BR细胞系相关产品：NCI-H838细胞、OVCA5细胞、IPEC-1细胞
细胞生长：贴壁
NCI-H69 epithelioid cells人小细胞肺癌细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
最近在培养细胞时，发现其状态不是很好，很容易扎堆生长，用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来，很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的，传代的第二天，有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢？你好，我养的细胞和你一样，消化下来也是一团的，但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀，分皿后在镜下看一看，移动培养皿的时候尽量动作轻，避免晃动。细胞生长挺快，那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能：一、细胞消化后吹打不均匀，造成细胞成团生长：二、细胞细化太过，细胞成片脱落，吹打时没有受力点，细胞聚团生长。解决办法：根据细胞生长的情况进行多次消化，将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养：一般步骤为：真空泵吸走培养基，１XPBS漂洗两次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿为例），３７度放置数分钟，轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落，加入适量血清，以吸管上下吸放数次以打散细胞团块，离心后加入新鲜培养基，按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间，若胰酶处理太久，容易造成细胞贴壁不紧，显微镜下观察立体感不强，严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１几种癌细胞处理时间可适当放长，一般处理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比较容易脱落，２min足矣，P１９Cl６和２９３细胞贴壁不紧，可在PBS漂洗后，直接换新鲜培养基打散。
细胞传代方法：１：２—１：４传代，每周换液２次
3396细胞系相关产品：MDA MB 361细胞、Panc 05.04细胞、PC-3M-2B4细胞
SK-N-BE(2C)细胞系相关产品：MOLP8细胞、INS1E细胞、LM2-4175细胞
BT-483细胞系相关产品：C8161细胞、JROECL33细胞、U-87-MG细胞
PC-9S1细胞系相关产品：TK 10细胞、MDA-MB436细胞、RMG-I细胞
LM1细胞系相关产品：MDA231-LM2-4175细胞、TCC Sup细胞、149PT细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NCI-H69 epithelioid cells人小细胞肺癌细胞系
细胞生长特性：悬浮生长，聚团
细胞形态特性：聚团悬浮
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；特别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请优先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
C3A细胞系相关产品：TCC-SUP细胞、GAK细胞、CII细胞
YAC细胞系相关产品：NUGC-2细胞、SUDHL5细胞、MCA-205细胞
NT2/D1细胞系相关产品：H-2170细胞、KYSE0410细胞、Y79细胞
MASMC细胞系相关产品：MDA-MB-468-RED细胞、K562/ADR细胞、RPMI8226细胞
NS20-Y细胞系相关产品：F442-A细胞、HeLa229细胞、FM-88细胞
HT-22细胞系相关产品：HCC 70细胞、Lewis lung carcinoma line 1细胞、Walker 256细胞
CHG5细胞系相关产品：BE2-M17细胞、OCI-Ly1细胞、UCLA-SO-M20细胞
HEK293T/17细胞系相关产品：SKNSH细胞、University of Arizona Cell Culture-893细胞、SUM149PT细胞
OSKM-1细胞系相关产品：CMEC/D3细胞、Hs 839.T细胞、CCD-841-CoTr细胞
H-146细胞系相关产品：HCC-1359细胞、H64细胞、KALS1细胞
NCI-H69 epithelioid cells人小细胞肺癌细胞系
IPLB-SF-21-AE细胞系相关产品：SKMEL24细胞、SCC154细胞、JC细胞
OsACL细胞系相关产品：Instituto Biologico-Rim Suino-2细胞、LU65细胞、SUM-159-PT细胞
BrCL18细胞系相关产品：MUTZ3细胞、SKMEL-2细胞、VK-2/E6E7细胞
hTERT-HME1细胞系相关产品：A-673细胞、COLO 320 HSR细胞、NL-20细胞
beta-TC6细胞系相关产品：BCPAP细胞、TE3细胞、Normal Rat Kidney-52E细胞
JJN3细胞系相关产品：DrG细胞、SK-RC 39细胞、MiaPaca.2细胞
JJN3细胞系相关产品：DrG细胞、SK-RC 39细胞、MiaPaca.2细胞
2780CP细胞系相关产品：KOPN8细胞、TFH细胞、CHP-100细胞
SW837细胞系相关产品：MRC 5细胞、293AD细胞、EBC-1细胞
BNL-HCC细胞系相关产品：Walker 256细胞、Vero细胞、QGY细胞
VMM5A细胞系相关产品：CX-1细胞、Fox/NY细胞、7860细胞
KYSE 70细胞系相关产品：REC细胞、Pt-K1细胞、Kit225-K6细胞
Hs 706.T细胞系相关产品：NUGC4细胞、HCC1438细胞、HCC-1599细胞
JM-Jurkat细胞系相关产品：PFSK-1细胞、TE85细胞、Hs274T细胞
NCI-H2405细胞系相关产品：MDA-MB-134VI细胞、OV3121细胞、MHHCALL2细胞
Kit 225 K6细胞系相关产品：H-1385细胞、251 MG细胞、VMM5细胞
VMM5A细胞系相关产品：CX-1细胞、Fox/NY细胞、7860细胞
LTEPsm细胞系相关产品：NCI-H596细胞、ONS76细胞、LC-1/sq细胞
MDAPCa-2b细胞系相关产品：TOV-112D细胞、U-373MG细胞、HS-683细胞
MDAPCa-2b细胞系相关产品：TOV-112D细胞、U-373MG细胞、HS-683细胞
MX1细胞系相关产品：BXPC3细胞、ASH-3细胞、Lu-65细胞
D10细胞系相关产品：HDLM2细胞、ACC-2细胞、AAV293细胞
B16-BL6细胞系相关产品：C6661细胞、COLO 357细胞、HLEC-B3细胞
NBL_S细胞系相关产品：KCL22细胞、HEK.EBNA细胞、Ocular Choroidal Melanoma-1细胞
CEM细胞系相关产品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4细胞、HEK-293H细胞、H740细胞
HL 60细胞系相关产品：SW 948细胞、B-104细胞、RERFLCMS细胞
H-1522细胞系相关产品：KNS-42细胞、CAL-78细胞、Hs 766.T细胞
NCI H82细胞系相关产品：SP2/0 Ag-14细胞、SNU668细胞、Clone Y-1细胞
UM-UC-14细胞系相关产品：CF-1 MEF细胞、GL261细胞、ZYM-DIEC02细胞
ACT-1细胞系相关产品：LC-2-Ad细胞、SW1990细胞、H1688细胞
CEM/C1细胞系相关产品：H-2106细胞、DH-82细胞、NK-92.05细胞
Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2细胞系相关产品：B10BR细胞、C-33A细胞、HuH 6细胞
HT clone H9细胞系相关产品：AsPC-1细胞、KU-19-19细胞、NCI-H2081细胞
OsA-CL细胞系相关产品：TE11细胞、TE6细胞、NRK 52E细胞
D562细胞系相关产品：MIA-PaCa-2细胞、HFT8810细胞、SHSY5Y细胞
KASUMI6细胞系相关产品：NCIH1435细胞、OCI/AML-3细胞、RMG1细胞
HN-6细胞系相关产品：ANA-1细胞、MDA-MB 453细胞、OSA细胞
ssMCF7细胞系相关产品：Mc Coy细胞、NCI-H2106细胞、BEL/FU细胞
ssMCF7细胞系相关产品：Mc Coy细胞、NCI-H2106细胞、BEL/FU细胞
OUMS23细胞系相关产品：LA795细胞、WEHI-164细胞、Panc 03.27细胞
Suzhou Human Glioma-44细胞系相关产品：52PE细胞、H-157细胞、B16 melanoma F10细胞
Hs445细胞系相关产品：SK-RC-39细胞、CAL85-1细胞、CEM-C1细胞
alpha-TC1.6细胞系相关产品：Line 522细胞、MV 4;11细胞、Leydig细胞
KTA7细胞系相关产品：NuTu-19细胞、M07e细胞、QGY7701细胞
TALL-1 [Human adult T-ALL]细胞系相关产品：NCI-1155细胞、H-2052细胞、Panc05.04细胞
HA细胞系相关产品：HOS/MNNG细胞、UCW 100细胞、SCC VII细胞
VMRC-RCZ细胞系相关产品：SW-839细胞、H-358细胞、Panc02.03细胞
LC-2/ad细胞系相关产品：TE-85 clone 5细胞、SDBMSC细胞、AG 9细胞
Be Wo细胞系相关产品：MDAMB330细胞、LNCaP C4-2B细胞、IMR-32细胞
HUT-226细胞系相关产品：RCC23细胞、COLO-699细胞、OVCAR10细胞
H-4细胞系相关产品：MV522细胞、EOC20细胞、RBL 1细胞
NCI-H69 epithelioid cells人小细胞肺癌细胞系
Hs27细胞系相关产品：K299细胞、OS-732细胞、HCC-44细胞
Co 115细胞系相关产品：COLO829细胞、PLB985细胞、P-36细胞
RMC细胞系相关产品：NBL-2细胞、GB-1细胞、SUM 102PT细胞
NT2/D1细胞系相关产品：H-2170细胞、B16F1细胞、MDA-MB-175-VII细胞
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