"SUM159PT epithelioid cells人乳腺癌细胞系
细胞背景资料:乳腺癌;女性
细胞形态:上皮细胞样
正确的细胞复苏需知事项:细胞冻存好了,接下来要注意什么问题呢?没错,就是记得到时间了,拿出来复苏。那么,细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢?细胞活力和形态检查的作用何在?活力检查——千万不要使用不健康的细胞,可能有污染(真菌、支原体等),如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞:补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至70%单层时收获细胞,计数活细胞数,用冻存液调整细胞密度~5 x106 Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整);冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞,有不同类型的冻存液,根据细胞类型选择最合适的冻存液(常用的冻存液成分有):5-10% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质;5-15%甘油;如果细胞在无血清培养基内生长,应在50%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长24小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记好细胞类型,日期,冻存人等信息,并保证每冻存管不超过1.5ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以最快的速度转移冻存管知液氮罐内,因此,此步骤使用干冰,或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意,在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息,做好记录是非常非常重要的!还有一个最重要的,一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞,以免其中的一个液氮罐出现问题!细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要,熟记以下要点:当从液氮罐内取出细胞时,有可能会出现冻存管破裂的情况,使用保护面罩和防护服十分必要;其实,细胞复苏只是一个简单的实验,不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节,不然,也不一定会尽如人意。例如说,人身健康方面:一定要记得做好防冻工作,戴上护目镜;尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。
SNU668细胞系相关产品:Malme-3M细胞、H-446细胞、DU 4475细胞
EoL-1细胞系相关产品:MEG-01细胞、U-138-MG细胞、C-Li-7细胞
G-361细胞系相关产品:U-118MG细胞、U-87MG细胞、HCMEC细胞
细胞生长:贴壁
SUM159PT epithelioid cells人乳腺癌细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
血清必须贮存于–20~-70℃,若存放于4℃,请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶,可将40~45ml分装于无菌50ml离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10%,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌,不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物,则可将血清加入培养基内一起过滤,勿直接过滤血清。瓶装(500ml)血清解冻步骤(逐步解冻法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室温下全溶后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40~45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沈淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏,而影响血清之品质。血清凝絮物:发生之原因有许多种,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成,这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物,可用离心3000rpm,5min去除,或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物,因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”:通常经过热处理之血清,沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”,常会误认为血清遭受污染,而将血清放在37℃中欲培养此“微生物”,但在37℃环境下,又会使此沈淀物增多,更会误认为微生物之增殖,但以培养细菌之培养基检测,又没有污染。一般而言,此小黑点应不会影响细胞之生长,但若怀疑此血清之品质,应立即停用,更换另一批号的血清。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
DSL6A/C1细胞系相关产品:HSC-4细胞、SW 900细胞、LK-2细胞
HFT-8810细胞系相关产品:NCI-H1155细胞、TJ905细胞、Capan2细胞
MC3T3-E细胞系相关产品:SK-RC-42细胞、LNCaP细胞、FLC7细胞
SUM 149PT细胞系相关产品:3-LL细胞、SHEE细胞、PE CA PJ34细胞
Colo205细胞系相关产品:KBM-7细胞、RAG细胞、MHCC 97细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
SUM159PT epithelioid cells人乳腺癌细胞系
细胞生长特性:贴壁
细胞形态特性:详见细胞说明书
常见细胞培养中一些问题总结:1)培养基中血清的比例多少合适?血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为5%-15%,不要低于5%或高过20%,因为含量过低会导致细胞营养不足,过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为10%,可以适量加减;2)何时须更换培养基?视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本数据上的更换时间,按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换;3)购买的复苏细胞,为何会有脱落?因为运输的过程中不可避免的会有震荡,收到后可以离心收集;4)购买的细胞冷冻管经解冻后,为何会发生细胞数目太少之情形?研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少,大都是因为离心过程操作上的失误,造成细胞的物理性损伤,以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心,应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可;5)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久;6)收到的冷冻管瓶身破裂,瓶盖有裂纹,或瓶盖脱落之原因?冷冻管瓶盖裂纹,或瓶身破裂,可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当,造成冷冻管裂损,建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱,乃因热胀冷缩之物理现象,冷冻管有可能因此而造成细胞污染,故冷冻管于放入和取出液氮桶时,均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
3-LL细胞系相关产品:CCD 966 SK细胞、SRS-82细胞、SW-954细胞
GM-3573细胞系相关产品:CCD18细胞、COLO-394细胞、CCRF-CEM C7细胞
UC-3细胞系相关产品:HCFB(HCF)细胞、NCIH650细胞、DH-82细胞
H-920细胞系相关产品:JVM3细胞、SNU475细胞、NCIH2052细胞
H1688细胞系相关产品:T/G HA VSMC细胞、KLM1细胞、HEL-299细胞
Ramos.G6.C10细胞系相关产品:MC-3T3细胞、ONS-76细胞、HUC细胞
A-375SM细胞系相关产品:HCa/16A3-F细胞、NCIH1355细胞、NR8383细胞
SKG3A细胞系相关产品:IOSE29细胞、B-3细胞、SW-48细胞
KE-39细胞系相关产品:Hs706T细胞、SUP-B1细胞、T47D:A细胞
Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a细胞系相关产品:HS940细胞、S.B.细胞、Ca761细胞
SUM159PT epithelioid cells人乳腺癌细胞系
HPBALL细胞系相关产品:HBL100细胞、FDCP1细胞、3T3-F442A细胞
Nthy-ori 3-1细胞系相关产品:Hs 636 T细胞、LYR细胞、L 929细胞
ST-2细胞系相关产品:SW 756细胞、HEK-293-H细胞、JOSK-M细胞
VMM39细胞系相关产品:A498细胞、SK-ML2细胞、KCL22细胞
SkChA1细胞系相关产品:REC1细胞、H-146细胞、LU165细胞
AtT 20细胞系相关产品:HN13细胞、A549/ATCC细胞、MCF7/WT细胞
AtT 20细胞系相关产品:HN13细胞、A549/ATCC细胞、MCF7/WT细胞
DI TNC-1细胞系相关产品:MXI细胞、KP-4细胞、SW948细胞
HEK 293细胞系相关产品:WM266细胞、PaTu8988s细胞、LN382细胞
MPP-89细胞系相关产品:Adeno-293细胞、COLO 738细胞、IBRS2细胞
TE12细胞系相关产品:UMNSAH/DF#1细胞、Rat podocyte细胞、OCI-Ly 1细胞
10T1/2细胞系相关产品:BGC-823细胞、MT2细胞、NTERA2细胞
LC-MS细胞系相关产品:NCIH1963细胞、SNU601细胞、NCI-H2170细胞
YH-13细胞系相关产品:HEp-2细胞、NT2细胞、SHEE细胞
NCI-322细胞系相关产品:H-2171细胞、H226细胞、NCI-H460细胞
NGP细胞系相关产品:CEM-C1细胞、K299细胞、MRC-9细胞
CESS细胞系相关产品:EFM-19细胞、B16 melanoma细胞、CaSki细胞
33604细胞系相关产品:KMS-18细胞、H-711细胞、U118细胞
Human Melanoma Cell Bowes细胞系相关产品:Jeko1细胞、hEM15A细胞、Ca 9-22细胞
HCC4006细胞系相关产品:KAT-5细胞、HCC-94细胞、H-1184细胞
Porcine Kidney-13细胞系相关产品:H-1048细胞、P3HRI细胞、HPAF II细胞
FOX-NY细胞系相关产品:A-875细胞、C8161细胞、MLO-Y4细胞
KTC1细胞系相关产品:VMM39细胞、3T3 Swiss Albino细胞、HCC-94细胞
Hi-five细胞系相关产品:HTh-74细胞、CAL851细胞、NCIH211细胞
Capan 1细胞系相关产品:CAOV3细胞、BHP 10-3细胞、NCI-SNU-5细胞
H1770细胞系相关产品:H-209细胞、HuH1细胞、Ku812细胞
L-02细胞系相关产品:H4IIE细胞、H-2330细胞、ECC 12细胞
SMA-560细胞系相关产品:MD Anderson-Metastatic Breast-361细胞、801-D细胞、Tu-686细胞
SW954细胞系相关产品:KNS81细胞、MIA-Pa-Ca-2细胞、HCC15细胞
UWB1.289+BRCA1细胞系相关产品:Capan 1细胞、MDA-MB-435细胞、SUM149细胞
AA-Mel细胞系相关产品:SW1463细胞、L 929细胞、HT-1080细胞
NCI-841细胞系相关产品:AML-2细胞、Rat1细胞、LS180细胞
OV-2008细胞系相关产品:IPAM-WT细胞、MHCCLM3细胞、R1610细胞
L-428细胞系相关产品:NBLS细胞、SKGIIIA细胞、SNU-638细胞
RIN Cl-5F细胞系相关产品:SNB19细胞、HCC9204细胞、GM15452细胞
KYSE 520细胞系相关产品:H2122细胞、RC-4B/C细胞、NCIH889细胞
HuH-1细胞系相关产品:NIH:OVCAR-8细胞、DHL10细胞、NCI-H2291细胞
PaTu8988s细胞系相关产品:Hs863T细胞、HCEC-B4G12细胞、HPBALL细胞
B-104细胞系相关产品:COLO-320DM细胞、SaOS细胞、RMS 13细胞
COLO 320DM细胞系相关产品:4T1.2细胞、R2C细胞、C3H/10T1/2 CL8细胞
Hs_578t细胞系相关产品:NOZC-1细胞、MILE SVEN 1细胞、NCIH1876细胞
HBdSMC细胞系相关产品:SUM 52细胞、IHH细胞、H526细胞
IPI-2I细胞系相关产品:KP-N-RT-BM-1细胞、Hs870T细胞、TE-14细胞
Z310细胞系相关产品:NCI660细胞、NCI-H2122细胞、TE354.T细胞
OVCA 420细胞系相关产品:IOSE 80细胞、RT-112细胞、NK92MI细胞
SNGM细胞系相关产品:H2009细胞、RT4-D6-P2T细胞、293-FT细胞
WM 239-A细胞系相关产品:BCP1细胞、H-2106细胞、TE353.SK细胞
H2198细胞系相关产品:Malme3M细胞、NK10a细胞、TB-1 Lu细胞
NCI H929细胞系相关产品:SUM 159细胞、J82COT细胞、CCRF-CEM细胞
H460细胞系相关产品:Karpas 299细胞、87MG细胞、MA 104细胞
SNT8细胞系相关产品:CCD33Co细胞、OCI-LY-10细胞、HP615细胞
SUM159PT epithelioid cells人乳腺癌细胞系
CEM-CCRF细胞系相关产品:PLC-8024细胞、A7r5细胞、COLO 320HSR细胞
AD-293细胞系相关产品:C4-2 Bone metastatic细胞、KB细胞、SKNF1细胞
NCI-H2052细胞系相关产品:KYSE 180细胞、JROECL21细胞、Mel-MeWo细胞
UC-3细胞系相关产品:HCFB(HCF)细胞、Human Kidney-2细胞、Hs 895.T细胞
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