"P388 Cell:小鼠白血病细胞系
细胞形态:淋巴母细胞样
细胞生长:悬浮
细胞背景资料:详见相关文献介绍
T/G HA VSMC细胞系相关产品:10T1/2细胞、AsPC-1细胞、HARAB细胞
VCaP细胞系相关产品:Hs274T细胞、LNCaP-C4-2细胞、SKOV-3细胞
Hs675细胞系相关产品:H-1755细胞、Calf Pulmonary Artery 47细胞、Panc 1细胞
SN12PM6细胞系相关产品:COLO679细胞、HeLa细胞、KYSE180细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
P388 Cell:小鼠白血病细胞系
细胞传代时消化的问题:可以这样说,对于需要消化传代的细胞,每一次的消化都是对这个细胞存活与否,状态好与不好最至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题,自己养的细胞开始的几代长的还挺好的,可是穿过几代之后就发现自己的细胞,状态越来越差劲了。对于这个问题,可以非常肯定地说,你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以,越长越差。在消化的过程中,你加入胰酶后,所有细胞都在被胰酶消化着,但是我们忽视了一个问题就是,细胞的生长状态是不一样的,每一个细胞的贴壁情况也是不一样的,有的贴壁牢固,有的贴壁没有那么牢固的,所以,让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的,他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。(以难消化细胞为例);具体操作:1)首先不加胰酶,倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍,(这是前奏,即为步,目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍,这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍,两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步(你可以将这些传入新瓶培养,以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。)3)吸干净瓶内剩余液体,加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍,吸掉弃之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察,待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净子弹头里备用,加入新培养基开始吹打,吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(你也可以传入新瓶培养,以与后面及前面的做对比。)这是第三步。4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶,如果你们那比较富裕的话,呵呵。继续镜下观察,待剩余细胞间隙明显,细胞独立开来的时候,吸掉胰酶,加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养(根据实际情况你自己把握)。这是第四步。其实还可以有第五步,对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话,你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态,更漂亮的样子,没办法,你必须分多批多次消化,这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到最低,保证细胞的状态能够。当然了,如果细胞是属于那种很容易消化的细胞,像RAW264.7,仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较,去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步,除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外,还有一个更重要的作用就是,可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态,不成片不连体。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2传代
培养细胞真的不难,最关键几点:1)所有的东西使用,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,最近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
COLO 16细胞系相关产品:EFM192C细胞、MSTO-211H细胞、MES23.5细胞
16-HBEo细胞系相关产品:Normal Rat Kidney-49F细胞、OSC-19细胞、NCIH1915细胞
NIE 115细胞系相关产品:B16-F10-BL6细胞、Bac1 2F5细胞、NCIH1395细胞
MSTO211H细胞系相关产品:NFS-60细胞、SUM-159PT细胞、CATH-a细胞
UM-UC3细胞系相关产品:HEC1A细胞、H1299细胞、HD-LM-2细胞
细胞生长特性:贴壁生长
P388 Cell:小鼠白血病细胞系
细胞复苏相关注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。4.离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞形态特性:详见细胞说明书
SNU-407细胞系相关产品:HCC-44细胞、SK UT 1细胞、TE-1细胞
NU-GC-2细胞系相关产品:NCI-460细胞、Human Melanoma Cell Bowes细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞
Jurkat77细胞系相关产品:HCEC细胞、P3.times.63 Ag8.653细胞、H766T细胞
16HBE140细胞系相关产品:NCI-SNU-475细胞、LCLC-103H细胞、BTI-TN5B1-4细胞
NCI-SNU-5细胞系相关产品:HRMC细胞、RIN-14B细胞、THC-8307细胞
M1细胞系相关产品:VM-CUB-1细胞、COLO-320细胞、MDA-MB-435S细胞
FLC-7细胞系相关产品:B16 F10细胞、B95-8细胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1细胞
P388 Cell:小鼠白血病细胞系
HFT 8810细胞系相关产品:CAL-85-1细胞、MPC 11细胞、HEC-151细胞
SK-RC-52细胞系相关产品:SC细胞、H4IIE细胞、HT 1080.T细胞
P3 88 D1细胞系相关产品:UM-UC-14细胞、SF-539 BT细胞、MES13细胞
Tissue Culture-1细胞系相关产品:CA-46细胞、HCC1419细胞、WC00059细胞
HNSC细胞系相关产品:HCASMC细胞、MDAMB435S细胞、HEL细胞
Tokyo Medical and Dental university 8细胞系相关产品:CEK细胞、HB 611细胞、FLC-7细胞
NTC-200细胞系相关产品:Panc-05.04细胞、MDAMB-231细胞、K7M2 wt细胞
NCIH2023细胞系相关产品:CHP 100细胞、COLO 206细胞、Glioma-261细胞
TC-1[JHU-1]细胞系相关产品:OCI/AML5细胞、BEL/FU细胞、MLA 144细胞
NCIH1341细胞系相关产品:L5178-R细胞、WRL68细胞、HCC-827细胞
NS20-Y细胞系相关产品:F442-A细胞、HeLa229细胞、FM-88细胞
HEK.EBNA细胞系相关产品:NCIH2196细胞、WM115F细胞、NCIH226细胞
HBEpiC细胞系相关产品:RWPE-2细胞、SKO3细胞、GM03571细胞
SNK-1细胞系相关产品:CCD 966SK细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453细胞、H-2085细胞
HECV细胞系相关产品:CCD 19Lu细胞、NCTC 3960细胞、PANC-28细胞
MDAPCa2b细胞系相关产品:TE3细胞、JM1细胞、Lieming Xu-2细胞
RPE-1细胞系相关产品:Human Hepatocyte Line 5细胞、H-1793细胞、HFLS细胞
SCC-9细胞系相关产品:Ls-174-T细胞、TU 686细胞、A2780/CP70细胞
HIC细胞系相关产品:hA549细胞、GP2d细胞、SF 763细胞
PCI-SG231细胞系相关产品:HT1376细胞、DU-145细胞、DF1细胞
PBL细胞系相关产品:H35细胞、RAW 264.7细胞、MA-782细胞
ARO-81细胞系相关产品:CT-26细胞、RCC4细胞、SK-N-BE(1)细胞
D407 RPE细胞系相关产品:NCI H508细胞、SuDHL 10细胞、GM05384细胞
P3HR1-BL细胞系相关产品:Pan02细胞、MCA-205细胞、SK-ES-1细胞
LICR-LON-HN6细胞系相关产品:NW-38细胞、HOP-62细胞、H2023细胞
T/G HA-VSMC细胞系相关产品:OVCAR-433细胞、PLC/PRF5细胞、NCI-H1563细胞
CAL148细胞系相关产品:Hs895T细胞、QG-56细胞、SKOV-433细胞
CMT 64细胞系相关产品:TGBC11T细胞、M20 [Human melanoma]细胞、NEC8细胞
COLO 394细胞系相关产品:HRPEpiC细胞、NPC-TW-039细胞、MHCC 97-L细胞
Laboratory of Allergic Diseases 2细胞系相关产品:SU-DHL-1细胞、Hep 3B2_1-7细胞、GM-215细胞
NALM-6-M1细胞系相关产品:HCC-15细胞、KRCY细胞、LAD 2细胞
KYSE-410细胞系相关产品:TE1细胞、SKMEL-1细胞、BTT739细胞
MCF-12F细胞系相关产品:COLO-741细胞、FHL 124细胞、GRSL细胞
Rat Basophilic Leukemia-1细胞系相关产品:Sp2/O-Ag14细胞、PG-LH7细胞、CAL-27细胞
Human Hepatocyte Line 5细胞系相关产品:COLO206F细胞、NB.4细胞、Huh7.5细胞
HPBALL细胞系相关产品:HBL100细胞、FDCP1细胞、3T3-F442A细胞
HO-8910细胞系相关产品:H2081细胞、LA-795细胞、SUM159PT细胞
MRC5细胞系相关产品:SKNBE-1细胞、DSL6A/C1细胞、PCI-4B细胞
MIA-Pa-Ca-2细胞系相关产品:451-LU细胞、JEG-3细胞、Panc 08.13细胞
HEL-1细胞系相关产品:SCC 4细胞、Adeno-293细胞、H2052细胞
NBL-3细胞系相关产品:RL952细胞、H-2085细胞、WSUDLCL2细胞
JEKO细胞系相关产品:H-520细胞、NCIH1975细胞、33604细胞
FOXNY细胞系相关产品:B16/F1细胞、P815细胞、251 MG细胞
P388 Cell:小鼠白血病细胞系
HUSMC细胞系相关产品:H-847细胞、Hep G2细胞、COLO 320F细胞
TM4细胞系相关产品:UC-3细胞、CWR22R-V1细胞、TE-11细胞
CFSC-8B细胞系相关产品:L-6 myoblast细胞、HCAEC细胞、M20 [Human melanoma]细胞
PTK1细胞系相关产品:UPCISCC154细胞、CHP 100细胞、GLRK 13细胞
Ca759细胞系相关产品:130T细胞、C3H10T1/2CL8细胞、OAC-P4C细胞
OCI-Ly18细胞系相关产品:HCC9724细胞、C-643细胞、LoVo细胞
HuTu-80细胞系相关产品:Alpha Mouse Liver 12细胞、3T3-L1 ad细胞、Vero from pool #76细胞
MF2059细胞系相关产品:WM266mel细胞、HBL 100细胞、SU.86细胞
CTLL-2细胞系相关产品:M14细胞、CemT4细胞、KLM-1细胞
SNU-16细胞系相关产品:2E8细胞、JurkatE6-1细胞、X63-Ag8.653细胞
NCI-H1299细胞系相关产品:COR-L23细胞、Madison 109细胞、C643细胞
SKml2细胞系相关产品:P3/X63-Ag8细胞、Ra #1细胞、P3-NS1/1Ag 4.1细胞
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