"PA12 Cell:小鼠胚胎成纤维细胞系
细胞形态:成纤维细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:详见相关文献介绍
NCI-A549细胞系相关产品:M14-MEL细胞、AdHek细胞、U266 Bl细胞
H1703细胞系相关产品:DAKIKI Clone 1细胞、MDA1386细胞、CACO2细胞
SW 1783细胞系相关产品:BEL7404细胞、P-388细胞、LTPA细胞
H-2141细胞系相关产品:67NR细胞、TK10细胞、bEND.3细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
PA12 Cell:小鼠胚胎成纤维细胞系
如何把细胞养的形态更好更漂亮。1.不同的细胞,喜欢的环境是不一样的。这个不仅仅是说培养基的不同,还有就是细胞生长的空间密度问题。有一些细胞是数量多一点比较好生长,生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好,譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞,生长速度非常得快,贴壁速度很快,所以传代时就应该留很少量的细胞,这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长,而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候,细胞形态基本上就会差了,老化的会比较多,对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。2.对于有些人总是会遇到养的细胞形态怎么都不好的问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞,如果细胞形态不好,(或者细胞形态不清晰,表面似有异物等)可以在传代的时候进行如下操作:首先,倒掉旧的培养基,加入3ml新的培养基(有无血清的都可)洗涤一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培养基,进行预吹打,控制吹打力度,轻轻地大概沿着瓶底过一遍,然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。(巨噬细胞我们只吹打,不消化的);其次,把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内,培养瓶事先加入培养基,放入培养箱内培养,按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次,20分钟,30分钟观察一次。选择一个时间点,已经有部分细胞贴壁的情况下,重新置于洁净台,底面朝上迅速倒出其中的培养基,加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。我称之为“二传”。呵呵。如果一次效果还不理想,可重复多次。直到找到细胞完美形态。其中要注意,结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。3.关于培养瓶内加入培养基的量的问题。这个是要靠自己去摸索你所养的细胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些细胞反而是培养基少一点相反细胞形态会长得比较好。(可能也是竞争很大,有优胜劣汰吧。呵呵。)对于生长速度快的细胞,易生长的细胞加少一点培养基细胞形态会更好。但是要注意换液掌握。4.关于选择培养瓶的问题。个人发现生长速度快的细胞在玻璃瓶内生长的状态会比一次性相对好一些。而对于同一种细胞,在其生长旺盛快速的时期在玻璃瓶内的生长状态也比内好。这可能是因为比玻璃瓶更容易贴壁。生长速度快的细胞在这种相对“更安逸”的环境里反而长得状态不如玻璃瓶好。所以对于生长速度慢的细胞如果想要更漂亮的细胞状态,比玻璃瓶会好,对于生长速度慢的细胞,玻璃瓶则会更好。同样,对于同一种细胞,在其生长速度慢的时候,会好一点,比如刚刚复苏的时候,或者原代培养的时候。而在其生长旺盛的时候,玻璃瓶则相对会好一点。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
常见细胞培养中一些问题总结:1)培养基中血清的比例多少合适?血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为5%-15%,不要低于5%或高过20%,因为含量过低会导致细胞营养不足,过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为10%,可以适量加减;2)何时须更换培养基?视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本数据上的更换时间,按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换;3)购买的复苏细胞,为何会有脱落?因为运输的过程中不可避免的会有震荡,收到后可以离心收集;4)购买的细胞冷冻管经解冻后,为何会发生细胞数目太少之情形?研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少,大都是因为离心过程操作上的失误,造成细胞的物理性损伤,以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心,应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可;5)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久;6)收到的冷冻管瓶身破裂,瓶盖有裂纹,或瓶盖脱落之原因?冷冻管瓶盖裂纹,或瓶身破裂,可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当,造成冷冻管裂损,建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱,乃因热胀冷缩之物理现象,冷冻管有可能因此而造成细胞污染,故冷冻管于放入和取出液氮桶时,均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
SCC 9细胞系相关产品:MLE-12细胞、SK-MEL-24细胞、GM03671C细胞
J774细胞系相关产品:LuCL4细胞、SKM1细胞、H-2066细胞
HuPT4细胞系相关产品:MC-38细胞、Loucy细胞、SJSA1细胞
TALL 1细胞系相关产品:Michigan Cancer Foundation-12F细胞、SW837细胞、MPC-5细胞
Med 341细胞系相关产品:373MG细胞、HG2855细胞、U-87 MG细胞
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
PA12 Cell:小鼠胚胎成纤维细胞系
正确的细胞复苏需知事项:细胞冻存好了,接下来要注意什么问题呢?没错,就是记得到时间了,拿出来复苏。那么,细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢?细胞活力和形态检查的作用何在?活力检查——千万不要使用不健康的细胞,可能有污染(真菌、支原体等),如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞:补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至70%单层时收获细胞,计数活细胞数,用冻存液调整细胞密度~5 x106 Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整);冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞,有不同类型的冻存液,根据细胞类型选择最合适的冻存液(常用的冻存液成分有):5-10% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质;5-15%甘油;如果细胞在无血清培养基内生长,应在50%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长24小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记好细胞类型,日期,冻存人等信息,并保证每冻存管不超过1.5ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以最快的速度转移冻存管知液氮罐内,因此,此步骤使用干冰,或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意,在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息,做好记录是非常非常重要的!还有一个最重要的,一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞,以免其中的一个液氮罐出现问题!细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要,熟记以下要点:当从液氮罐内取出细胞时,有可能会出现冻存管破裂的情况,使用保护面罩和防护服十分必要;其实,细胞复苏只是一个简单的实验,不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节,不然,也不一定会尽如人意。例如说,人身健康方面:一定要记得做好防冻工作,戴上护目镜;尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。
细胞形态特性:详见细胞说明书
M07e细胞系相关产品:BS-C-1细胞、SW 1271细胞、LTEPsm细胞
TEV-1细胞系相关产品:4175细胞、Pan02细胞、Normal fibroblast-10细胞
MDA-231细胞系相关产品:HOS(TE85)细胞、MNNG/HOS Clone F-5细胞、OC 316细胞
NR8383.1细胞系相关产品:NCIH520细胞、COC1/CDDP细胞、A2058细胞
HEK 293T/17细胞系相关产品:SKML-28细胞、FHs 74 Int细胞、BHT-101细胞
PL-12细胞系相关产品:MOLT-3细胞、NCIH747细胞、NIE-115细胞
RT4P细胞系相关产品:Hep 3B2细胞、DMS153细胞、FRhK-4细胞
PA12 Cell:小鼠胚胎成纤维细胞系
NCI-SNU-C2A细胞系相关产品:SU 86.86细胞、TE4细胞、TE4细胞
SU.86细胞系相关产品:TCam-2细胞、IGROV1细胞、HPAF-I细胞
MF2059细胞系相关产品:WM266mel细胞、HBL 100细胞、SU.86细胞
CORL279细胞系相关产品:MILE SVEN1细胞、SR细胞、U87 MG细胞
BJAB细胞系相关产品:COLO 320 DM细胞、SK-N-BE(2)-M17细胞、tdott细胞
PC14细胞系相关产品:LMTK-细胞、Sup T-1细胞、HOPC细胞
293H细胞系相关产品:SMC-1细胞、HEK (AD293)细胞、MSB-1细胞
SW-1990细胞系相关产品:H-2342细胞、NB19-RIKEN细胞、SKNEP细胞
MCF7-GFP细胞系相关产品:P3/NS-1细胞、SW 1353细胞、CCRF-CEM C1细胞
MCF7-GFP细胞系相关产品:P3/NS-1细胞、SW 1353细胞、CCRF-CEM C1细胞
PTK-2细胞系相关产品:MHCC97L细胞、SUDHL-1细胞、Ramos (RA 1)细胞
WSU-DLCL2细胞系相关产品:RL-95-2细胞、MIO-M1细胞、CEM/C1细胞
P3-NS1/1-Ag4-1细胞系相关产品:NHLF细胞、NCI-H524细胞、Caco 2细胞
CF-PAC1细胞系相关产品:NCIH2452细胞、P30/Ohkubo细胞、NCC-IT细胞
PANC0504细胞系相关产品:ATN1细胞、HIT细胞、SK-MEL-24细胞
DHBE细胞系相关产品:SW900细胞、Suzhou Human Glioma-44细胞、Hep 3B2_1-7细胞
H3255_DA细胞系相关产品:HCS2/8细胞、KPL-4细胞、OCI Ly3细胞
RDES细胞系相关产品:RC-4B/C细胞、CD 18细胞、BT 549细胞
CD-18细胞系相关产品:B16 melanoma F10细胞、NCIH1573细胞、RAEC细胞
LS-411细胞系相关产品:H1693细胞、MC3T3-E1 Subclone 14细胞、OVCA433_Bast细胞
LN382细胞系相关产品:526mel细胞、PL5细胞、GC1-SPG细胞
Vero 76 clone E-6细胞系相关产品:SK HEP 01细胞、JEKO细胞、SKNSH细胞
211H细胞系相关产品:Gejiu Lung Carcinoma-82细胞、TO175T细胞、HSC 3细胞
HCC1954-BL细胞系相关产品:HEK-A细胞、SK-MEL-3细胞、MyLa 2059细胞
HT3细胞系相关产品:FDC-P1细胞、HEK293EBNA细胞、OK细胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).细胞系相关产品:OV1/P细胞、HFL细胞、RBSMC细胞
SK ES 01细胞系相关产品:MKN45细胞、PSN-1细胞、NCI-H1385细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI细胞系相关产品:HIBEpiC细胞、HRA19细胞、P3 NS1 Ag4/1细胞
COLO-741细胞系相关产品:HPAF2细胞、Swiss/3T3细胞、MDA-435细胞
HCO细胞系相关产品:SNU368细胞、Wien 133细胞、SJSA-1细胞
COV434细胞系相关产品:SRS-82细胞、NWA细胞、FL83B细胞
HNE-1细胞系相关产品:SP-2细胞、DMS 79细胞、NCI-SNU-119细胞
AZ-521细胞系相关产品:MADISON LUNG TA-109细胞、MOLT.4细胞、T98-G细胞
Caco 2细胞系相关产品:HEM-L细胞、hSCC-25细胞、FRO细胞
EAC细胞系相关产品:U-373 MG细胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma细胞、Swiss-3T3细胞
Hela-Ap-1细胞系相关产品:LC-2/ad细胞、HSKMC细胞、MKN1细胞
H-2126细胞系相关产品:A253细胞、VCaP细胞、Be Wo细胞
KMS-18细胞系相关产品:MALME.3M细胞、TCam 2细胞、HH [Human lymphoma]细胞
253JBV细胞系相关产品:BT549细胞、Hs 578.T细胞、BJ [Human fibroblast]细胞
LLC PK1细胞系相关产品:U20S细胞、LTEP-s细胞、JTC-28细胞
NCIH1355细胞系相关产品:HMSC细胞、D341细胞、T. T细胞
HT(H9)细胞系相关产品:Jurkat E6-1细胞、PLA-801C细胞、CG-4细胞
MV3细胞系相关产品:TE7细胞、IHH-4细胞、RD-2细胞
PA12 Cell:小鼠胚胎成纤维细胞系
LICR-LON-HN6细胞系相关产品:NW-38细胞、HOP-62细胞、H2023细胞
Hep 3B细胞系相关产品:Factor Dependent Continuous-Paterson 1细胞、SNGM细胞、HEK 293 c18细胞
SEG1细胞系相关产品:NCI H929细胞、MDA-435细胞、Jurkat E6细胞
ECV-304细胞系相关产品:National Medical Center-Glioma 1细胞、F56 [Human neoplasm]细胞、SDBMSC细胞
143B TK-细胞系相关产品:GM03571细胞、MH-22a细胞、SK RC 52细胞
TMK1细胞系相关产品:HMEC细胞、NCIH1819细胞、RSC-96细胞
H2444细胞系相关产品:H1437细胞、NCI-H1568细胞、SW 48细胞
HCE-2 [50.B1]细胞系相关产品:G-401细胞、HRA-19细胞、NCIH378细胞
SVOG细胞系相关产品:Panc-1-P细胞、HCC94细胞、B10BR细胞
Caco-2/BBe细胞系相关产品:TB-1 Lu细胞、NB4细胞、TE 671细胞
Calu 3细胞系相关产品:MV-1-Lu细胞、SW780细胞、RT4-D6-P2T细胞
Neuro2a细胞系相关产品:DKMG细胞、GM-3573细胞、COLO-394细胞
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