"C3H/10T1/2 clone 8 Cell:小鼠胚胎成纤维细胞系
细胞形态:成纤维细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:详见相关文献介绍
95-D细胞系相关产品:Line 870 Emory University-4细胞、SHP77细胞、SCI1细胞
PC3-M细胞系相关产品:Hs 611.T细胞、H-647细胞、HO-8910细胞
CWR22Rv1细胞系相关产品:NCI-H2110细胞、Det 562细胞、HME-1细胞
H-1672细胞系相关产品:PC3M细胞、Calu-3细胞、SK MEL 28细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
C3H/10T1/2 clone 8 Cell:小鼠胚胎成纤维细胞系
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系,大部分的细胞都是要成片生长的,尤其是对于贴壁细胞,单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话,传代后细胞是不能贴壁的,这样抱团的细胞就会死亡。所以,消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态,这个啊是非常考究你的功夫的!细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个,因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开,受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊,这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来,又不能太过,一吹就整片脱落,要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-2细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到70%左右的时候就要传代了,一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞,你在洗的时候如果是用无血清1640去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样,用1640培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话,可以用PBS来洗,洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的,对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清,防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先,是很关键的一点。先补充这么多,还会后续更新。再补充一点:传代时PBS洗是很重要的一步,最近发现,用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置10-15分钟,有些需要更长的时间,等到细胞一个个分离开来的时候,就可以直接吹打下来,但是和胰酶消化一样,要控制好时间,不能时间太过了,要不然损伤细胞,细胞不容易成活,状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候,或者临时没有胰酶了,可以选用此方法。不过一定要试试,看是否适合你的细胞。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
SUM159PT细胞系相关产品:DMS153细胞、KMH2细胞、BJA-B-1细胞
H1184细胞系相关产品:OV-CA 432细胞、KCL22S细胞、YAC细胞
NTera 2细胞系相关产品:N1E115细胞、NK62a细胞、NCI-H295细胞
HEK-A细胞系相关产品:LTPA细胞、VAESBJ细胞、NCIH747细胞
Eph4 1424细胞系相关产品:HDMEC细胞、RBMVEC细胞、LC-2-Ad细胞
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
C3H/10T1/2 clone 8 Cell:小鼠胚胎成纤维细胞系
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。
细胞形态特性:详见细胞说明书
BT-B细胞系相关产品:HET1A细胞、Eph4 1424细胞、G-292 clone A141B1细胞
HEL92.1.7细胞系相关产品:MLMEC细胞、MDA157细胞、GM05372细胞
HC11细胞系相关产品:MM6细胞、HEC-251细胞、NUGC4细胞
D341MD细胞系相关产品:SHI-1细胞、Verda reno细胞、COLO-320-HSR细胞
TF-1a细胞系相关产品:Karpas299细胞、KYSE-140细胞、S37细胞
LOU-NH91细胞系相关产品:CAL-33细胞、MDA-MB-468细胞、RINm-5F细胞
KS-SLK细胞系相关产品:SNU-668细胞、Mink Lung细胞、Nthy-ori 3-1细胞
C3H/10T1/2 clone 8 Cell:小鼠胚胎成纤维细胞系
SuperTube细胞系相关产品:H1930细胞、TGW-I-nu细胞、LM6细胞
H64细胞系相关产品:EC109细胞、NCI H82细胞、PLC PRF 5细胞
NCIH1581细胞系相关产品:H-125细胞、EB-2细胞、Soleus clone 8细胞
MUVEC细胞系相关产品:SCC-25细胞、MOLT-3细胞、SNB19细胞
RD-2细胞系相关产品:Hs 675.T细胞、MDA453细胞、MES-13细胞
G-Olig2细胞系相关产品:C3H10T1-2细胞、SNUC1细胞、Calu 6细胞
WC00079细胞系相关产品:A549ATCC细胞、MKN74细胞、D 407细胞
H35细胞系相关产品:OV 2008细胞、6T-CEM细胞、OVCAR8细胞
KNS62细胞系相关产品:LLC-MK-2细胞、AML12细胞、SKNEP-1细胞
KNS62细胞系相关产品:LLC-MK-2细胞、AML12细胞、SKNEP-1细胞
Hs729T细胞系相关产品:NIHOVCAR3细胞、EJ细胞、MDA361细胞
RKO_AS45细胞系相关产品:NCL-H548细胞、X63-Ag8.653细胞、Saos2细胞
SUSM-1细胞系相关产品:NCIH2073细胞、Hs604T细胞、MKN45细胞
HT22细胞系相关产品:Ramos细胞、Kato-III细胞、MDA-MB453细胞
IPLB-Sf21AE细胞系相关产品:NCI-H378细胞、NCI-SNU-520细胞、hFOB细胞
H1618细胞系相关产品:TE-12细胞、TCMK-1细胞、H810细胞
NCI-H650细胞系相关产品:SK 1细胞、COLO394细胞、Hs 600.T细胞
RIN-m5F细胞系相关产品:NCIN87细胞、CCC-HHM-2细胞、639V细胞
L cells (TK-)细胞系相关产品:Karpas 422细胞、H1882细胞、OV-CA 432细胞
MDA-MB-435-S细胞系相关产品:Kit225-K6细胞、NTERA2D1细胞、Hs 737.T细胞
CHP-212细胞系相关产品:RGM-1细胞、NCl-H157细胞、P3-X63-Ag8-6-5-3细胞
MDA134细胞系相关产品:RBL 1细胞、H-1993细胞、MDCK细胞
GM03320D细胞系相关产品:TK.10细胞、HLEB3细胞、RH35细胞
COLO-205细胞系相关产品:NCI-H1105细胞、COV 434细胞、NMCG-1细胞
HOP 92细胞系相关产品:WiDr/S细胞、624mel细胞、DI-TNC1细胞
UMC-11细胞系相关产品:Human Embryo Kidney-2细胞、TSCCa细胞、SNU-620细胞
H524细胞系相关产品:MN-60细胞、H1781细胞、GM3569细胞
MLTC-1细胞系相关产品:MV3细胞、HemECs细胞、SK N SH细胞
Huh7.5细胞系相关产品:Hs819.T细胞、L-WRN细胞、Mono Mac6细胞
L-cell细胞系相关产品:MC116细胞、TW-039细胞、NCI-H1755细胞
293-EBNA1细胞系相关产品:NS-1-Ag4-1细胞、RAW264.7细胞、Blotchy fibroblast-11细胞
Dakiki细胞系相关产品:LS411N细胞、DU 145细胞、U031细胞
NCIH2405细胞系相关产品:H-865细胞、SHG 44细胞、143TK-细胞
U-138MG细胞系相关产品:NS-20Y细胞、PC-9S1细胞、HFTF细胞
HRPEpiC细胞系相关产品:HDQ-P1细胞、RSC-364细胞、QBI-HEK 293A细胞
EBC-1/original细胞系相关产品:Caki-2细胞、ACC-3细胞、AN-3细胞
GM05384细胞系相关产品:RWPE1细胞、MCF10-A细胞、SW403细胞
HCC0078细胞系相关产品:HT144细胞、OVCAR-4细胞、HRCEC细胞
BEL7402细胞系相关产品:Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS细胞、2PK3细胞、Potorous tridactylus Kidney 2细胞
HCC1954细胞系相关产品:MFE280细胞、A549-Taxol细胞、SKO3细胞
SACC83细胞系相关产品:BMSCs(mBMSCs)细胞、MLMA细胞、SF17细胞
MCF-10A细胞系相关产品:NALM6细胞、Human Embryo Kidney-2细胞、MCF7-CTRL细胞
MDCK II细胞系相关产品:SC1细胞、G-292细胞、130 T细胞
C3H/10T1/2 clone 8 Cell:小鼠胚胎成纤维细胞系
SHG44细胞系相关产品:HEK293S细胞、SGC-7901/DDP细胞、T24(ECV304)细胞
H1836细胞系相关产品:H-1581细胞、MUGCHOR1细胞、GM00215A细胞
C-Li-7细胞系相关产品:SW-780细胞、SJSA1细胞、KU 812F细胞
SUD-4细胞系相关产品:CHOK1细胞、H4-II-E-C3细胞、CHL-IU细胞
NCIH524细胞系相关产品:SDBMSC细胞、MDA-415细胞、Kit225细胞
MFM-223细胞系相关产品:SKLU-1细胞、KM12-SM细胞、P3X63Ag8-6-5-3细胞
HMC3细胞系相关产品:LC-1Sq细胞、CG-4细胞、HConEpic细胞
OCILY-19细胞系相关产品:HLEB3细胞、SUM149细胞、CV-1细胞
Centre Antoine Lacassagne-78细胞系相关产品:H-548细胞、LNT-229细胞、NTERA2-cloneD1细胞
CTV-1细胞系相关产品:P3/NS1/Ag4-1细胞、T-98G细胞、FLS细胞
TE15细胞系相关产品:N-Tera-2细胞、PAEC细胞、4T1-LUC细胞
NTera 2/cl.D1细胞系相关产品:H-1155细胞、293-EBNA1细胞、IR983F细胞
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