"CNLMG-B5537SKIN Cell:人成纤维细胞系
细胞形态:成纤维细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:成纤维细胞
H-1819细胞系相关产品:5637细胞、SKNDZ细胞、OCI-Ly3细胞
ES-2细胞系相关产品:OCI/AML-2细胞、GMK,BSC-1细胞、TOV-112细胞
PANC0203细胞系相关产品:SK-BR3细胞、SNU423细胞、HeLa 229细胞
R1610细胞系相关产品:H510细胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1细胞、HUT 28细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
CNLMG-B5537SKIN Cell:人成纤维细胞系
细胞消化过程总结:其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足够了,一般我加300ul。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候,比如tsDC细胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙状移动。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
常见细胞培养中一些问题总结:1)培养基中血清的比例多少合适?血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为5%-15%,不要低于5%或高过20%,因为含量过低会导致细胞营养不足,过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为10%,可以适量加减;2)何时须更换培养基?视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本数据上的更换时间,按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换;3)购买的复苏细胞,为何会有脱落?因为运输的过程中不可避免的会有震荡,收到后可以离心收集;4)购买的细胞冷冻管经解冻后,为何会发生细胞数目太少之情形?研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少,大都是因为离心过程操作上的失误,造成细胞的物理性损伤,以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心,应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可;5)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久;6)收到的冷冻管瓶身破裂,瓶盖有裂纹,或瓶盖脱落之原因?冷冻管瓶盖裂纹,或瓶身破裂,可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当,造成冷冻管裂损,建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱,乃因热胀冷缩之物理现象,冷冻管有可能因此而造成细胞污染,故冷冻管于放入和取出液氮桶时,均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
CORL88细胞系相关产品:H-1819细胞、Vx2细胞、MESSA/Dx5细胞
NBL-7细胞系相关产品:KU 812F细胞、M14细胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized细胞
KTCTL-140细胞系相关产品:C518细胞、COLO 684细胞、H-1954细胞
Huh-7.5细胞系相关产品:HEK 293-H细胞、NCI-H510细胞、MA104细胞
X63-Ag8.653细胞系相关产品:LU451细胞、H-196细胞、SHIN3细胞
细胞生长特性:贴壁
CNLMG-B5537SKIN Cell:人成纤维细胞系
正确的细胞复苏需知事项:细胞冻存好了,接下来要注意什么问题呢?没错,就是记得到时间了,拿出来复苏。那么,细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢?细胞活力和形态检查的作用何在?活力检查——千万不要使用不健康的细胞,可能有污染(真菌、支原体等),如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞:补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至70%单层时收获细胞,计数活细胞数,用冻存液调整细胞密度~5 x106 Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整);冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞,有不同类型的冻存液,根据细胞类型选择最合适的冻存液(常用的冻存液成分有):5-10% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质;5-15%甘油;如果细胞在无血清培养基内生长,应在50%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长24小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记好细胞类型,日期,冻存人等信息,并保证每冻存管不超过1.5ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以最快的速度转移冻存管知液氮罐内,因此,此步骤使用干冰,或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意,在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息,做好记录是非常非常重要的!还有一个最重要的,一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞,以免其中的一个液氮罐出现问题!细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要,熟记以下要点:当从液氮罐内取出细胞时,有可能会出现冻存管破裂的情况,使用保护面罩和防护服十分必要;其实,细胞复苏只是一个简单的实验,不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节,不然,也不一定会尽如人意。例如说,人身健康方面:一定要记得做好防冻工作,戴上护目镜;尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。
细胞形态特性:详见细胞说明书
Panc-10.05细胞系相关产品:OVCA432_Bast细胞、GP2-293细胞、Rat1细胞
U-266 AR1细胞系相关产品:DI TNC1细胞、SU86.86细胞、H1819细胞
COLO 684细胞系相关产品:NCI-SNU-620细胞、AtT-20细胞、SKMEL2细胞
GM3569细胞系相关产品:P3.NS-1/1.Ag4.1细胞、MDA-MB361细胞、KNS-81细胞
WM 115细胞系相关产品:FU-OV-1细胞、N-2a细胞、BT325细胞
hTERT-HPNE细胞系相关产品:OVCAR-8/ADR细胞、LUDLU1细胞、Lewis lung carcinoma细胞
HOS (TE85, Clone F5)细胞系相关产品:JurkatE6-1细胞、HGE细胞、OCI-Ly03细胞
CNLMG-B5537SKIN Cell:人成纤维细胞系
Rh30细胞系相关产品:HT 115细胞、Ramos.G6.C10细胞、JM-Jurkat细胞
SUDHL10细胞系相关产品:CV-1 in Origin Simian-7细胞、B16 BL6细胞、SW1271细胞
D-324MED细胞系相关产品:SF 539细胞、A-875细胞、OE-33细胞
HPDEC细胞系相关产品:COLO_320DM细胞、Jurkat Clone E6-1细胞、HRGEC细胞
HCCC9810细胞系相关产品:Hs 840.T细胞、MEL细胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a细胞
MRC 5细胞系相关产品:BE2-C细胞、PE CA PJ34细胞、RC-4B细胞
HFT 8810细胞系相关产品:CAL-85-1细胞、MPC 11细胞、HEC-151细胞
U-118 MG细胞系相关产品:DH82细胞、NTHY-ORI3.1细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3细胞
Rat podocyte细胞系相关产品:WM 239-A细胞、HCC2185细胞、CHL-1细胞
Rat podocyte细胞系相关产品:WM 239-A细胞、HCC2185细胞、CHL-1细胞
CCD-841CoTr细胞系相关产品:Fao细胞、NuTu 19细胞、UPCI-SCC-090细胞
SKNBE(1)细胞系相关产品:WERI-Rb 1细胞、HCC-1588细胞、NBL_S细胞
T-HSC细胞系相关产品:SNU-119细胞、Leghorn Male Hepatoma cell line细胞、ROS17/2.8细胞
B35细胞系相关产品:HT-3细胞、NCI-H1688细胞、MeT-5A细胞
L-02细胞系相关产品:H4IIE细胞、H-2330细胞、ECC 12细胞
Z138细胞系相关产品:NCI-H520细胞、HeLa 229细胞、KATOIII细胞
RMS1598细胞系相关产品:NCIH1355细胞、T2细胞、Ramos 1细胞
OLN93细胞系相关产品:Medical Research Council cell strain-5细胞、Panc 02.03细胞、SCC 15细胞
HCT/FU细胞系相关产品:Hs 27细胞、Panc-1-P细胞、HUVSMC细胞
KG-1a细胞系相关产品:HVSMC细胞、ROS17/28细胞、QG-56细胞
HET1A细胞系相关产品:COR-L279细胞、Mv 1 Lu细胞、HAVSMC细胞
Hs 578Bst细胞系相关产品:HCC1171细胞、Tu686细胞、J82细胞
MC26细胞系相关产品:Hs-274-T细胞、TW 01细胞、HC-11细胞
EFM-19细胞系相关产品:SKMES细胞、RD-ES细胞、HT-115细胞
CEK细胞系相关产品:BEAS 2B细胞、HS 445T细胞、Calu-1细胞
CL-34细胞系相关产品:MDA134细胞、IOSE-29细胞、Hep 3B细胞
PANC0327细胞系相关产品:3T3 L1细胞、EU-2细胞、Granta-519细胞
KLE细胞系相关产品:Chinese Hamster Ovary细胞、T-CAM2细胞、Madison lung细胞
HEK-293-EBNA细胞系相关产品:32Dcl3细胞、Bac 1.2F5细胞、BALB/3T3 clone A31细胞
HRA-19细胞系相关产品:NCI-H441细胞、aTC1-6细胞、HL 60细胞
LU451细胞系相关产品:J82 COT细胞、NCI-H1238细胞、MRC 5细胞
LoVo细胞系相关产品:KYSE 270细胞、SNU878细胞、NCI-H1105细胞
MDA-MB-175VII细胞系相关产品:H-2108细胞、SF767细胞、BNL-HCC细胞
Y3M细胞系相关产品:HCCLM3细胞、DiFi细胞、DHL8细胞
C3H/10T1/2-clone8细胞系相关产品:MSF细胞、SW-962细胞、NSC-34细胞
SUDHL-2细胞系相关产品:LP-1细胞、SK-N-BE-2细胞、8226细胞
L5178Y TK+/-3.7.2c细胞系相关产品:293S细胞、A375mel细胞、H4IIEC3细胞
TN5B14细胞系相关产品:MV4;11细胞、SKES-1细胞、F56 [Human neoplasm]细胞
MOLT 16细胞系相关产品:R.K.13细胞、HANK1细胞、NS20-Y细胞
MDA 231-LM2-4175细胞系相关产品:University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14细胞、Ca761细胞、H719细胞
C-33-A细胞系相关产品:PVEC细胞、293c18细胞、NCI-H2107细胞
CCD 1112SK细胞系相关产品:OVCAR-432细胞、OV1-P细胞、H-1650细胞
HCGC细胞系相关产品:BC3H-1细胞、PG-BE1细胞、OCUM-1细胞
CNLMG-B5537SKIN Cell:人成纤维细胞系
RSC-364细胞系相关产品:NCI-H-128细胞、KMBC细胞、MES-SA细胞
GH 3细胞系相关产品:HLCL9B10细胞、SP-2/0-AG14细胞、SU-DHL2细胞
HRGEC细胞系相关产品:OCI-LY-18细胞、HTR8svn细胞、RERF-LCMS细胞
Hs 766T细胞系相关产品:HRVEC细胞、MDA MB 436细胞、WM-266-4细胞
CMT167细胞系相关产品:NS1/1-Ag4.1细胞、LIM-1215细胞、MC/CAR细胞
BL2141细胞系相关产品:CAL148细胞、MOVAS-1细胞、PL 45细胞
BNL 1ME A.7R.1细胞系相关产品:HCC2218细胞、SW 1573细胞、COLO 684细胞
KS-SLK细胞系相关产品:SNU-668细胞、Mink Lung细胞、Nthy-ori 3-1细胞
Hs 852.T细胞系相关产品:IR 983F细胞、HS852.T细胞、NTC-200细胞
HT 1197细胞系相关产品:RFL 6细胞、HEK293-FT细胞、IALM细胞
JCA-1细胞系相关产品:NTC-200细胞、H-1975细胞、Fox/NY细胞
SK RC 20细胞系相关产品:OV1-P细胞、HT-29/CX-1细胞、CCD18Co细胞
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