"RAT2 Cell:大鼠成纤维细胞系
细胞形态:成纤维细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:成纤维细胞;自发永生;Fischer 344
WSU-HN13细胞系相关产品:RPMI 8402细胞、H2073细胞、DAN-G细胞
SuDHL 10细胞系相关产品:Madin-Darby Canine Kidney细胞、CATHa细胞、SK-MEL 28细胞
TE 85.T细胞系相关产品:BE(2)M17细胞、RPTEC/TERT1细胞、GA-10 (Clone 4)细胞
CCRF细胞系相关产品:EC9706细胞、SP2/0 Ag-14细胞、EA hy 926细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
RAT2 Cell:大鼠成纤维细胞系
细胞培养过程中相关问题总结:悬浮性细胞应如何继代处理?一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,可将培养角瓶口端稍微抬高,直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶,加入新鲜培养基稀释至适当浓度,重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来,其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞,其离心速率一般为300xg(约1,000rpm),5-10分钟,过高之转速,将造成细胞死亡;细胞之接种密度为何?依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因;细胞冷冻培养基之成份为何?动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意:由于DMSO稀释时会放出大量热能,故不可将DMSO直接加入细胞液中,必须使用前先行配制完成;DMSO之等级和无菌过滤之方式为何?冷冻保存使用之DMSO等级,必须为Tissue culture grade之DMSO,其本身即为无菌状况,次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中,保存于4°C,避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质,并可减少污染之机会。若要过滤DMSO,则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜;冷冻保存细胞之方法?冷冻保存方法一:冷冻管置于4°C 30~60分钟→ (-20°C 30分钟)→-80°C 16~18小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase长期储存。-20°C不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;细胞欲冷冻保存时,细胞冷冻管内应有多少细胞浓度?冷冻管内细胞数目一般为1x10(6)cells/ml vial,融合瘤细胞则以5x10(6)cells/ml vial为宜;应如何避免细胞污染?细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法;如果细胞发生微生物污染时,应如何处理?直接灭菌后丢弃之。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作):1)吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在1-2min);2)镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散;3)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养;4)注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存;特别注意:(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养,建议添加双抗培养)1)收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清,(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时);2)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化,请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代,请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养;3)如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
T2 (174 x CEM.T2)细胞系相关产品:Bowes melanoma cells细胞、NCIH2347细胞、GP2d细胞
WM 2664细胞系相关产品:TE-9细胞、SK-MEL24细胞、MV411细胞
JB-6 Cl 30细胞系相关产品:U-343 MG细胞、EC-109细胞、V79细胞
H-838细胞系相关产品:CCLP-1细胞、ACC3细胞、IMR 90细胞
CCRF-CEM C7细胞系相关产品:1301细胞、Colon 26细胞、Alexander细胞
细胞生长特性:贴壁
RAT2 Cell:大鼠成纤维细胞系
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法:一、加入胰酶等细胞脱落后,再加培养基中止胰酶作用,离心传代;二、加入胰酶后,镜下观察待细胞始脱落时,弃胰酶,加培养液分瓶。但前者太麻烦,而后者有可能对细胞施加胰酶选择,因为总是贴壁不牢的细胞先脱落,对肿瘤细胞来说,这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),弃之,再加入适量胰酶作用10s-40s(根据细胞消化的难易程度),弃之,这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞,可以用2%利多卡因消化5-8分钟,然后再弃去,加培养基吹打也可以,对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把旧培养液吸的干净一点,直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后,用0.04%的EDTA冲洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室温孵育5min,弃取大部分EDTA,加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积1/10v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好,有证据吗?培养的BASMC:倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶约6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入适量新培养基中和,并分瓶这种方法简单、省事;效果很好并且不损失细胞!
细胞形态特性:详见细胞说明书
L-Wnt3A细胞系相关产品:Hk-2细胞、Hs1.Tes细胞、MUGCHOR1细胞
HS578细胞系相关产品:CAMA-1细胞、SCCVII/St细胞、MT-3 [Human leukocytes]细胞
Raji细胞系相关产品:VAESBJ细胞、Hs737T细胞、HGC-27细胞
KYSE410细胞系相关产品:PTK-1细胞、HOS (TE85, Clone F5)细胞、WPE-int细胞
CHO/dhFr-细胞系相关产品:MDBK细胞、NOK细胞、HT 115细胞
HMVEC细胞系相关产品:NCI H226细胞、MCF12A细胞、H4细胞
LA-N-1细胞系相关产品:HOP-62细胞、B16F10细胞、CHG-5细胞
RAT2 Cell:大鼠成纤维细胞系
RCC-4细胞系相关产品:A549细胞、KPL1细胞、COLO 320 HSR细胞
KYSE270细胞系相关产品:2780CP细胞、P3JHR1细胞、BALB/3T3细胞
TE-3A细胞系相关产品:COLO 741细胞、GM06141B细胞、SuperTube细胞
HCT-FET细胞系相关产品:KYSE 50细胞、H3255细胞、HCT-8细胞
GTL 16细胞系相关产品:FO [Mouse myeloma]细胞、UPCISCC154细胞、MDAMB436细胞
TC-1 [Mouse lung]细胞系相关产品:Hs 274细胞、HuH-28细胞、NCIH2023细胞
GH3细胞系相关产品:UPCI-SCC090细胞、HCT15细胞、293T细胞
CV-1细胞系相关产品:CCD 1112SK细胞、HCPEpiC细胞、WiDrTC细胞
Panc 02细胞系相关产品:T47-D细胞、Hs675T细胞、Pan02细胞
Panc 02细胞系相关产品:T47-D细胞、Hs675T细胞、Pan02细胞
CAL-33细胞系相关产品:COLO 678细胞、WM451细胞、hTERT-HPNE细胞
HBEpiC细胞系相关产品:RWPE-2细胞、SKO3细胞、GM03571细胞
Fao细胞系相关产品:RPMI #8226细胞、Keio University-19-19细胞、BEL 7402细胞
NCIH358细胞系相关产品:NOMO-1细胞、Giant Cell Tumor细胞、COS-1细胞
32D.cl3细胞系相关产品:Mouse Podocyte Clone-5细胞、LS-411N细胞、QBC939细胞
NHA细胞系相关产品:MPP-89细胞、CNE细胞、NIE 115细胞
HL-60细胞系相关产品:Panc-813细胞、CX-1细胞、KNS62细胞
X63-Ag8.653细胞系相关产品:LU451细胞、H-196细胞、SHIN3细胞
U-373MG ATCC细胞系相关产品:IPLB-Sf21-AE细胞、A2780-CP细胞、HK-2 [Human kidney]细胞
BJA-B1细胞系相关产品:Me Wo细胞、Granta 519细胞、TR146细胞
CCRF/CEM-C7细胞系相关产品:SLMT-1细胞、COLO206细胞、SCCVII/St细胞
SCL-II细胞系相关产品:C41细胞、LL/2(LLc1)细胞、CCFSTTG1细胞
B95-8细胞系相关产品:TE 32.T细胞、CoC1细胞、118MG细胞
Cates-1B细胞系相关产品:BHK 21细胞、AAV-293细胞、DC 2.4细胞
NCI-H2052细胞系相关产品:KYSE 180细胞、H22细胞、16HBE140细胞
Tu-212细胞系相关产品:SNU-475细胞、NCI-H526细胞、V79-4细胞
T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞系相关产品:Hs 766细胞、H-676细胞、RPVSMC细胞
SU86.86细胞系相关产品:NT2D1细胞、BIC细胞、H-1435细胞
HEK.EBNA细胞系相关产品:NCIH2196细胞、WM115F细胞、NCIH226细胞
CAL851细胞系相关产品:CPA 47细胞、SNU216细胞、hTERT-RPE-1细胞
Hs 729细胞系相关产品:SK Hep1细胞、YES-2细胞、JB-6 Cl 30细胞
HS-695T细胞系相关产品:HCV29细胞、SCC 25细胞、L M (TK-)细胞
MCF10A细胞系相关产品:NCI-H647细胞、GP5d细胞、CV-1.K细胞
SCL-1细胞系相关产品:MDA-MB-175-VII细胞、SO-RB50细胞、NCI-H1581细胞
MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞系相关产品:SHP-77细胞、JF305细胞、SKMEL28细胞
TE 85.T细胞系相关产品:BE(2)M17细胞、RPTEC/TERT1细胞、GA-10 (Clone 4)细胞
P3JHR1细胞系相关产品:CEMC7细胞、ECC-10细胞、JB6Cl30细胞
H69C细胞系相关产品:H522细胞、MEF (CF-1)细胞、Jurkat E6-1细胞
HB611细胞系相关产品:HTR8/SVneo细胞、Human Kidney-2细胞、HCFB(HCF)细胞
Clone 166细胞系相关产品:CCD-33Co细胞、COLO 320F细胞、SV40 MES 13细胞
Clone 166细胞系相关产品:CCD-33Co细胞、COLO 320F细胞、SV40 MES 13细胞
HLEB3细胞系相关产品:McA-RH 7777细胞、2780CP细胞、NRK-52E细胞
COLO-829细胞系相关产品:A-10细胞、SW48细胞、CA 46细胞
RAT2 Cell:大鼠成纤维细胞系
FF-WT-BJ细胞系相关产品:hTERT-HPNE细胞、R 2 C细胞、H-4细胞
HO-8910PM细胞系相关产品:3T6细胞、TYKnu细胞、T98G细胞
JIMT1细胞系相关产品:SKMel-28细胞、CL40细胞、Calu-6细胞
SW 1990细胞系相关产品:MLE12细胞、NB19细胞、R2C细胞
P31 FUJ细胞系相关产品:MDA-MB453细胞、PAMC82细胞、NT2/D1细胞
NP69SV40T细胞系相关产品:MC3T3E1细胞、HOEC细胞、MGHU1细胞
L-Wnt3A细胞系相关产品:Hk-2细胞、Hs1.Tes细胞、MUGCHOR1细胞
mRTEC细胞系相关产品:MOLM-14细胞、MES13细胞、LL2细胞
KPNRTBM1细胞系相关产品:32D clone3细胞、H 9细胞、CP-70细胞
Bx-PC3细胞系相关产品:Hs832T细胞、HOMEC细胞、L78细胞
Statens Seruminstitut Rabbit Cornea细胞系相关产品:SUDHL4细胞、HT细胞、HCEC-B4G12细胞
JM1细胞系相关产品:MG-HU-3细胞、KYSE140细胞、H-1993细胞
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