"RFL-6 Cell:大鼠成纤维细胞系
细胞形态：成纤维细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：胚肺；成纤维细胞；SD大鼠
NK-92 MI细胞系相关产品：H2291细胞、GP293细胞、BE(2)M17细胞
NCIH1568细胞系相关产品：THEECs细胞、118 MG细胞、RPMC细胞
HLEB3细胞系相关产品：McA-RH 7777细胞、2780CP细胞、NRK-52E细胞
UCW 100细胞系相关产品：RPTEC/TERT 1细胞、SW839细胞、TCam 2细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
RFL-6 Cell:大鼠成纤维细胞系
细胞消化过程总结：其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足够消化细胞（绝大部分１min不到）。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备１００%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液（不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开）。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的（比如Calu-３细胞），吹打不超过２０次后（一般１０次即可），成小规模聚集（１０个细胞左右），是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打１h，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞（润洗方法５min还不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足够了，一般我加３００ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过５min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙状移动。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；特别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请优先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
RSMC细胞系相关产品：SU-DH-L5细胞、TKB1细胞、UWB1.289细胞
H-929细胞系相关产品：C3H/10T1/2 CL8细胞、ZR751细胞、NCI-H661细胞
TFK-1细胞系相关产品：PNT1A细胞、MES-SA-Dx5细胞、MDA PCa 2b细胞
MDA435细胞系相关产品：NUGC-3细胞、MFE280细胞、JEG3细胞
BC3H-1细胞系相关产品：769P细胞、ETCC007细胞、GEO细胞
细胞生长特性：贴壁
RFL-6 Cell:大鼠成纤维细胞系
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很好并且不损失细胞！
细胞形态特性：详见细胞说明书
SW-527细胞系相关产品：293E细胞、Capan-1细胞、PASMCS细胞
H187细胞系相关产品：NCI-H748细胞、TE-7细胞、H2342细胞
COLO-205细胞系相关产品：NCI-H1105细胞、COV 434细胞、NMCG-1细胞
H1666_DA细胞系相关产品：RK13细胞、NCI-SNU-387细胞、ARO细胞
H1993细胞系相关产品：Calu-1细胞、U20-S细胞、Centre Antoine Lacassagne-39细胞
TE-14细胞系相关产品：A-20细胞、C33A细胞、HEC1A细胞
RMS 13细胞系相关产品：NCI-H1793细胞、EBC1细胞、LC-1Sq细胞
RFL-6 Cell:大鼠成纤维细胞系
PC10细胞系相关产品：MIMVEC细胞、BNCL2细胞、NCI-H2106细胞
HTh 74细胞系相关产品：MDA-MB-415细胞、GM00637细胞、IOSE-Mar细胞
KM-H2细胞系相关产品：HMC-1细胞、CaSki细胞、KP-2细胞
PC-9细胞系相关产品：CWR-22rv1细胞、V79-GalK1细胞、JJN3细胞
A-101D细胞系相关产品：OCI/AML-3细胞、FRTL-5 Cl 2细胞、TE-15细胞
R3/1细胞系相关产品：JS1细胞、NK-10A细胞、HSC2细胞
PaTu 8988 S细胞系相关产品：Panc 02细胞、PLC细胞、NCTC clone 929细胞
UACC893细胞系相关产品：H-841细胞、HEK-293FT细胞、CCRF-CEM/S细胞
TMD8细胞系相关产品：UMNSAH/DF-1细胞、H-1915细胞、SNU387细胞
TMD8细胞系相关产品：UMNSAH/DF-1细胞、H-1915细胞、SNU387细胞
HEY-A8细胞系相关产品：H1395细胞、SNU520细胞、CHO cell clone K1细胞
SKNBE-2细胞系相关产品：Laboratory of Allergic Diseases 2细胞、IMCD3细胞、SCL I细胞
NCIH1573细胞系相关产品：CT26细胞、KYSE50细胞、MOVAS细胞
RK13细胞系相关产品：CCLP1细胞、AMJ2C8细胞、H-2444细胞
HSC-1细胞系相关产品：293 H细胞、HOP 62细胞、WI-38细胞
PANC-02-03细胞系相关产品：HEK-293-EBNA细胞、MSTO211H细胞、MeWo细胞
CTLL-2细胞系相关产品：M14细胞、CemT4细胞、KLM-1细胞
THP-1细胞系相关产品：OVCAR420细胞、P388-D1细胞、High Five细胞
H128细胞系相关产品：Caco2BBe细胞、MBVP细胞、MGH-U3 (RN)细胞
HL1细胞系相关产品：EM-3细胞、KU-812F细胞、Human Foreskin Fibroblast细胞
X63-Ag8-653细胞系相关产品：CemT4细胞、C-4-I细胞、NCIH1155细胞
HNE-1细胞系相关产品：SP-2细胞、DMS 79细胞、NCI-SNU-119细胞
MDAPCa-2b细胞系相关产品：TOV-112D细胞、U-373MG细胞、HS-683细胞
RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]细胞系相关产品：HPDE细胞、TOV-21G细胞、H-2107细胞
TE-4细胞系相关产品：GOS-3细胞、Hs 675.T细胞、SNT-8细胞
HTori3细胞系相关产品：GM637A细胞、MDA330细胞、P30/Ohkubo细胞
MCF7ADR细胞系相关产品：SNU-5细胞、A549ATCC细胞、BrCL12细胞
293细胞系相关产品：NPA87细胞、HT-144细胞、A875细胞
MESSA/Dx5细胞系相关产品：KM12-SM细胞、HLEC-B3细胞、MEG01细胞
H1781细胞系相关产品：MAC1细胞、mREC细胞、HEC151细胞
Hs-27细胞系相关产品：SKNBE2细胞、NTERA2-D1细胞、SNU5细胞
Hs 274细胞系相关产品：CFPAC-1细胞、TK-10细胞、AML 12细胞
OK-WT细胞系相关产品：BBE细胞、AML-193细胞、PLA-801C细胞
SG231细胞系相关产品：K7M2细胞、32Dc3细胞、MRMT-1细胞
CAL51细胞系相关产品：MDA-MB231细胞、HEK/293细胞、HSC细胞
OCI AML2细胞系相关产品：MKN-45细胞、SUNE1细胞、GM00346B细胞
ARH-77细胞系相关产品：RFL-6细胞、NCI-N87细胞、HEK/EBNA细胞
Ramos-2G6-4C10细胞系相关产品：BT 549细胞、PANC0327细胞、COS7细胞
MNNG/HOS细胞系相关产品：H2195细胞、Hs-852-T细胞、OCI-LY-3细胞
CL1-5细胞系相关产品：HuH-1细胞、HEp-2细胞、SW 626细胞
T98G细胞系相关产品：RS4:11细胞、130T细胞、NSI/1-Ag4-1细胞
ChaGo-K1细胞系相关产品：U-118 MG细胞、MDA-330细胞、alpha TC1.6细胞
ANA-1细胞系相关产品：RBE4细胞、Rat 2细胞、NCI-460细胞
RFL-6 Cell:大鼠成纤维细胞系
alpha TC1 clone 6细胞系相关产品：Leukemic 1210细胞、COLO-320-HSR细胞、H19-7细胞
RPMI 6666细胞系相关产品：TOV-112细胞、Fetal Human Colon细胞、NCI-H1437细胞
Jurkat E6.1细胞系相关产品：H-1869细胞、H2291细胞、NCI522细胞
NCIH1568细胞系相关产品：THEECs细胞、118 MG细胞、RPMC细胞
HCC0070细胞系相关产品：NCIH1395细胞、TO 175.T细胞、DHL-16细胞
H1299细胞系相关产品：C-4-I细胞、Jurkat细胞、T8细胞
NCI-H1299细胞系相关产品：COR-L23细胞、Madison 109细胞、C643细胞
OVCAR5细胞系相关产品：SK-NSH细胞、C3H10T1/2 clone8细胞、H524细胞
P30-OHKUBO细胞系相关产品：BALB/3T3 (clone A31)细胞、SW13细胞、Renal Carcinoma细胞
HUT 28细胞系相关产品：NCIH1666细胞、SNU-475细胞、MEG-01细胞
HEL-92.1.7细胞系相关产品：H-35 Reuber细胞、SW620细胞、H-1836细胞
LTEPsm细胞系相关产品：NCI-H596细胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D细胞、C57 Mouse Tumor 64细胞
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