"IMR-90 Cell:人胚肺成纤维细胞系
细胞形态:成纤维细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:W.W. Nichols及其同事从一位16周女婴的肺中取材,建立了人二倍体成纤维细胞株IMR-90。分裂潜能,病毒感受性和其它性质都得到了充分研究,因而这株细胞可以作为WI-38或其它标准人肺细胞株的替代株。有报道称这株细胞在表现出衰老前可倍增58次。
H358细胞系相关产品:P3/NS1/1-Ag4.1细胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2细胞、ACC-2细胞
P1-Raji细胞系相关产品:RCC-10RGB细胞、MG-HU-3细胞、OCI-AML-5细胞
HSC2细胞系相关产品:HUT125细胞、HEC251细胞、NKM-1细胞
MiaPaca.2细胞系相关产品:MGHU1细胞、L-428细胞、MDA-MB-330细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
IMR-90 Cell:人胚肺成纤维细胞系
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系,大部分的细胞都是要成片生长的,尤其是对于贴壁细胞,单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话,传代后细胞是不能贴壁的,这样抱团的细胞就会死亡。所以,消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态,这个啊是非常考究你的功夫的!细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个,因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开,受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊,这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来,又不能太过,一吹就整片脱落,要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-2细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到70%左右的时候就要传代了,一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞,你在洗的时候如果是用无血清1640去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样,用1640培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话,可以用PBS来洗,洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的,对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清,防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先,是很关键的一点。先补充这么多,还会后续更新。再补充一点:传代时PBS洗是很重要的一步,最近发现,用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置10-15分钟,有些需要更长的时间,等到细胞一个个分离开来的时候,就可以直接吹打下来,但是和胰酶消化一样,要控制好时间,不能时间太过了,要不然损伤细胞,细胞不容易成活,状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候,或者临时没有胰酶了,可以选用此方法。不过一定要试试,看是否适合你的细胞。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2传代
细胞冻存的步骤:1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为5×106~1×107/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具体要看培养的细胞类型来选择;3)将分装上述细胞悬液于2ml冻存管中,每管0.25ml。冻存管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数);4)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中,-80℃冰箱过夜。;如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后转到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,取出一只冻存管细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NCIH208细胞系相关产品:L6565细胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4细胞、M-G63细胞
PK136细胞系相关产品:NFS60细胞、Vero-76细胞、Institute for Medical Research-90细胞
VMRCLCD细胞系相关产品:L-5178-Y-R细胞、PaTu-8988s细胞、Astrocyte type I clone细胞
MeT5A细胞系相关产品:OCIAML5细胞、H2066细胞、Mouse Forestomach Carcinoma细胞
SW 1463细胞系相关产品:HCC202细胞、H-345细胞、GT38细胞
细胞生长特性:贴壁生长
IMR-90 Cell:人胚肺成纤维细胞系
细胞传代培养实验:体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代,以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞,并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后,由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭,将培养的细胞分散,从容器中取出,以1:2或1:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养,即为传代培养;细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间,与细胞世代或倍增不同。在一代中,细胞培增3~6次。细胞传代后,一般经过三个阶段:游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度,即细胞群的分裂相数/100个细胞。一般细胞分裂指数介于0.2%~0.5%,肿瘤细胞可达3~5%;细胞接种2~3天分裂增殖旺盛,是活力时期,称指数增生期(对数生长期),适宜进行各种试验。实验步骤:1.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出,在超净工作台中倒掉瓶内的培养液,加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜),静置5~10分钟。2.在倒置镜下观察被消化的细胞,如果细胞变圆,相互之间不再连接成片,这时应立即在超净台中将消化液倒掉,加入3~5ml新鲜培养液,吹打,制成细胞悬液。3.将细胞悬液吸出2ml左右,加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加3ml左右培养液,盖好瓶塞,送回二氧化碳培养箱中,继续进行培养。一般情况,传代后的细胞在2小时左右就能附着在培养瓶壁上,2~4天就可在瓶内形成单层,需要再次进行传代。
细胞形态特性:详见细胞说明书
ACC-3细胞系相关产品:4T1-LUC细胞、HRA 19细胞、SUM-149细胞
PanC1细胞系相关产品:TB1 Lu细胞、OLN-93细胞、M-20细胞
SKMES1细胞系相关产品:MG63细胞、NU-GC-4细胞、SW-982细胞
LuCL4细胞系相关产品:CD 18细胞、BC-025细胞、Baby Hamster Kidney 21细胞
Kit225/K6细胞系相关产品:J111细胞、GM00215细胞、OCI-AML4细胞
P3.653细胞系相关产品:Ect1/E6E7细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2细胞、H446细胞
SK MES 1细胞系相关产品:OVCAR.3细胞、D-283MED细胞、LNCaP C4-2细胞
IMR-90 Cell:人胚肺成纤维细胞系
H-2330细胞系相关产品:Soleus clone 8细胞、RL-952细胞、HEK293FT细胞
IOSE-Mar细胞系相关产品:4T1-A细胞、GM02132细胞、SEG1细胞
Medical University of Graz-Chordoma 1细胞系相关产品:HEH2细胞、CA46细胞、B95-8细胞
NCI-H735细胞系相关产品:OVCA433细胞、MES-SA Dx5细胞、OsACL细胞
J 111细胞系相关产品:NCI-H2030细胞、MRMT-1细胞、L929细胞
CAL 12T细胞系相关产品:HOS-TE85细胞、SW-1990细胞、MES-SA/Dx-5细胞
LED-WiDr细胞系相关产品:SVOG细胞、H1404细胞、ARO-81细胞
CMT 93细胞系相关产品:FaDu细胞、Hs445细胞、P3/NS-1细胞
Henrietta Lacks cells细胞系相关产品:IM 9细胞、OVHM细胞、MOLT16细胞
Henrietta Lacks cells细胞系相关产品:IM 9细胞、OVHM细胞、MOLT16细胞
Roswell Park Memorial Institute 7666细胞系相关产品:G-Olig2细胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1细胞、Wistar Institute-38细胞
U-118 MG细胞系相关产品:DH82细胞、NTHY-ORI3.1细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3细胞
MAVER细胞系相关产品:HuH 6细胞、FL-83B细胞、P3.NS-1/1.Ag4.1细胞
L929细胞系相关产品:NCI-H1792细胞、HuCC-T1细胞、293 EBNA细胞
HMC3细胞系相关产品:LC-1Sq细胞、CG-4细胞、HConEpic细胞
KM932细胞系相关产品:T-24细胞、Caco-2细胞、HRC-99细胞
CEM T4细胞系相关产品:DHL5细胞、Douglas Foster-1细胞、NPA 87细胞
QGY7701细胞系相关产品:U343细胞、CX1细胞、AM细胞
SACC-LM细胞系相关产品:HIEC6细胞、HCC-1187细胞、Tu-177细胞
293F细胞系相关产品:NCIH1876细胞、T_T_细胞、MV4;11细胞
CG-4细胞系相关产品:Panc 4.03细胞、K562/ADP细胞、H647ell细胞
UPCI:SCC090细胞系相关产品:alpha-TC1.6细胞、HP615细胞、EFM-19细胞
SVHUC细胞系相关产品:H-2052细胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1细胞、NCI-H716细胞
BEL-7402细胞系相关产品:5-8F细胞、P-36细胞、Epithelioma Papulosum Cyprini细胞
MT-2细胞系相关产品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16细胞、SKNO-1细胞、RPTEC TERT1细胞
SKG3A细胞系相关产品:IOSE29细胞、B-3细胞、SW-48细胞
BNL.CL2细胞系相关产品:TFK-1细胞、MA-104细胞、NCIH244细胞
NS-1细胞系相关产品:MADB 106细胞、MLOY4细胞、KYSE-140细胞
SUDHL5细胞系相关产品:T98-G细胞、NEC-8细胞、KP 4细胞
NCI-H1155细胞系相关产品:H-146细胞、MDCK-II细胞、RSMC细胞
KG-1细胞系相关产品:SPC-A1细胞、Hs 895.T细胞、AMJ2-C8细胞
NCI.H460细胞系相关产品:THP-1(ATCC)细胞、P3J HR-1细胞、NS-I/1细胞
C-127细胞系相关产品:McARH7777细胞、TOV112细胞、BPH-1细胞
RPMI no 8226细胞系相关产品:NCIH82细胞、KYSE-450细胞、ARH77细胞
NB.4细胞系相关产品:FHL 124细胞、OV-90细胞、FDCP1细胞
3T3J2细胞系相关产品:UMRC2细胞、CAL-39细胞、HEK-293-FT细胞
SUSM1细胞系相关产品:SW 527细胞、KNS-42细胞、Eca109细胞
Clone 15 HL-60细胞系相关产品:Hs-578Bst细胞、CW-2细胞、KU-19-19细胞
MiaPaCa2细胞系相关产品:HEC151细胞、CA 46细胞、KM12SM细胞
NCIH2172细胞系相关产品:MCA-205细胞、KY-50细胞、HBMEC细胞
NCI-128细胞系相关产品:SL1细胞、SW 48细胞、NCIH1651细胞
NCI-SNU-387细胞系相关产品:Scott and White No. 13细胞、SK-BR-3细胞、Y1细胞
NCI-H1435细胞系相关产品:Rat-1细胞、MHCC97L细胞、NCI-H1668细胞
IMR-90 Cell:人胚肺成纤维细胞系
CT 26细胞系相关产品:NCI/ADR-RES细胞、CMT 64细胞、GM-346细胞
Hx147细胞系相关产品:343 MG细胞、BJAB细胞、COLO 394细胞
TE 32.T细胞系相关产品:SF 767细胞、WEHI-3B细胞、C1498细胞
CoC1细胞系相关产品:D324细胞、L540细胞、74Int细胞
LM1细胞系相关产品:MDA231-LM2-4175细胞、TCC Sup细胞、149PT细胞
H520细胞系相关产品:EoL-1 cell细胞、NCIH660细胞、MLA-144细胞
BPH1细胞系相关产品:U118MG细胞、MDA-MB-435-S细胞、Lewis lung carcinoma line 1细胞
LC-2-Ad细胞系相关产品:SKRC 39细胞、HLFa细胞、WB-F344细胞
JROECL33细胞系相关产品:LS-411N细胞、HEK AD293细胞、OCI-AML5细胞
SHSY5Y细胞系相关产品:H1666细胞、MEF细胞、FL-83B细胞
SW-1353细胞系相关产品:AZ521细胞、NCIH146细胞、C42细胞
OVCAR 432细胞系相关产品:ME16C细胞、Tb 1 Lu细胞、SUM-149细胞
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