"GCT epithelioid cells纤维组织瘤细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
贴壁消化难题:1,先用PBS 把细胞洗两遍,使瓶内没有血清了,减少对胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在细胞有些消化下来时,拿着瓶口,运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体,这样细胞很快就下来了,还不需要吹打,分散也均匀;2,成团、絮状:消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象,血清可以终止胰酶的作用,如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清终止,如果消化液中加入了edta的话,就要将消化液倒干净,如果细胞贴壁要求不是很严格的话,一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基,加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性最强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势),随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验,则不能弃去胰酶),加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代,否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片);消化过度:马上用培养基中和,用吸管吹打细胞,收集全部的细胞到以无菌的离心管中800RPM 3分钟。弃上清,用全培重悬,换新的培养瓶继续培养,状态不好的细胞在培养的过程中会死亡脱落,在换液的时候可以清除掉!
COLO680N细胞系相关产品:CCC-HSF-1细胞、SNU182细胞、LS411N细胞
MAD109细胞系相关产品:Karpas422细胞、S16细胞、Hs-940细胞
J82 COT细胞系相关产品:TE-1细胞、Namalva细胞、NCIH196细胞
细胞生长:贴壁
GCT epithelioid cells纤维组织瘤细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
最近在培养细胞时,发现其状态不是很好,很容易扎堆生长,用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来,很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的,传代的第二天,有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢?你好,我养的细胞和你一样,消化下来也是一团的,但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀,分皿后在镜下看一看,移动培养皿的时候尽量动作轻,避免晃动。细胞生长挺快,那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能:一、细胞消化后吹打不均匀,造成细胞成团生长:二、细胞细化太过,细胞成片脱落,吹打时没有受力点,细胞聚团生长。解决办法:根据细胞生长的情况进行多次消化,将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养:一般步骤为:真空泵吸走培养基,1XPBS漂洗两次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿为例),37度放置数分钟,轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落,加入适量血清,以吸管上下吸放数次以打散细胞团块,离心后加入新鲜培养基,按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间,若胰酶处理太久,容易造成细胞贴壁不紧,显微镜下观察立体感不强,严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901几种癌细胞处理时间可适当放长,一般处理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比较容易脱落,2min足矣,P19Cl6和293细胞贴壁不紧,可在PBS漂洗后,直接换新鲜培养基打散。
细胞传代方法:1:2-1:4传代;每周换液2次。
NCIH211细胞系相关产品:NIH:OVCAR-10细胞、MDA-361细胞、NCI-H740细胞
MLE12细胞系相关产品:KATO 3细胞、Hs 606.T细胞、SK-ES1细胞
Caco2-BBE细胞系相关产品:Hs729细胞、OCI-AML5细胞、Embryonic Bovine Tracheal cells细胞
U373-MG细胞系相关产品:Human Melanoma Cell Bowes细胞、HCC1954细胞、Me-Wo细胞
CAMA细胞系相关产品:CAL 51细胞、TSU-Pr1细胞、H929细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
GCT epithelioid cells纤维组织瘤细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
细胞形态特性:详见细胞说明书
细胞接收后的操作流程与注意事项:1)如果细胞为贴壁细胞,而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡,请及时联系实验室技术人员会跟进解决;2)贴壁细胞生长缓慢;适当提高血清浓度(最高不能超过20%),或可根据该细胞生长密度,考虑胰酶消化后,转移到新的培养瓶继续培养;3)生长不均:贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养。
WM115F细胞系相关产品:WIL2S细胞、KPL-1细胞、LLC PK1细胞
COLO 320F细胞系相关产品:G-402细胞、IAR-20细胞、Immortalized Human Hepatocytes细胞
OUMS-23细胞系相关产品:210RCY3-Ag1.2.3细胞、SF 763细胞、COLO206F细胞
SK-MEL-2细胞系相关产品:SNU638细胞、Mouse Bladder Tumor line-2细胞、CCD 841 CoN细胞
LS 513细胞系相关产品:H292细胞、Molm14细胞、XuanWei Lung Cancer-05细胞
H3255_DA细胞系相关产品:HCS2/8细胞、KPL-4细胞、OCI Ly3细胞
M07e细胞系相关产品:BS-C-1细胞、SW 1271细胞、LTEPsm细胞
H184A1细胞系相关产品:28SC细胞、Baby Hamster Kidney 21细胞、Hs888 Lu细胞
P3-X63-Ag 8.653细胞系相关产品:NCIH1618细胞、NBLS细胞、TGW细胞
293c18细胞系相关产品:NCIH23细胞、UO31细胞、BC-023细胞
GCT epithelioid cells纤维组织瘤细胞系
PLA-801D细胞系相关产品:THP1细胞、PMVEC细胞、NCIH64细胞
95D细胞系相关产品:OCUM-1细胞、C4-2细胞、NTHY-ORI3.1细胞
MDA-MB468细胞系相关产品:MDA MB 453细胞、A375S2细胞、U-343MG细胞
EST81细胞系相关产品:HCC-1954细胞、WB-F344细胞、OVCAR.3细胞
HCC95细胞系相关产品:RN-c细胞、Neuro-2a细胞、SV-HUC细胞
MAVER-1细胞系相关产品:AML-193细胞、NCI-H2170细胞、SNU-520细胞
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HSC4细胞系相关产品:H1105细胞、mIMCD-3细胞、NSH细胞
L78细胞系相关产品:L929(NCTC)细胞、HEC-151细胞、MCF-12F细胞
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LNCaP-Clone-FGC细胞系相关产品:H1954细胞、3T6 Swiss Albino细胞、Tj-905细胞
SK-GT-2细胞系相关产品:D-407细胞、KP-N-RT-BM-1细胞、H-774细胞
IPEC-J2细胞系相关产品:NT2细胞、Det. 562细胞、ACC-M细胞
OS-732细胞系相关产品:6T-CEM细胞、H-EMC-SS细胞、M-1细胞
CHO Lec1细胞系相关产品:Caco-2/BBe细胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19细胞、A375S2细胞
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Jeko1细胞系相关产品:Mel-RM细胞、MMVECs细胞、ChaGo-K1细胞
451-LU细胞系相关产品:U-138 MG细胞、LY-R细胞、HOP92细胞
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CAL62细胞系相关产品:H-2405细胞、NCI-H-82细胞、AgC11x3A细胞
293F细胞系相关产品:NCIH1876细胞、T_T_细胞、MV4;11细胞
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P30/OHK细胞系相关产品:WSU-HN13细胞、LCD细胞、PAEC细胞
MC26细胞系相关产品:Hs-274-T细胞、TW 01细胞、HC-11细胞
NCI-H1703细胞系相关产品:LC1sq细胞、NH-6细胞、OVCAR3细胞
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H-841细胞系相关产品:SUM 102PT细胞、MES-SA细胞、CEM/0细胞
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EB-2细胞系相关产品:Rainbow Trout Embryo细胞、U251n细胞、CHO-S细胞
SHP-77细胞系相关产品:NG108-15细胞、COLO-679细胞、Hs-27细胞
Mel RM细胞系相关产品:MFC细胞、HEK-293-F细胞、H2135细胞
HOC1细胞系相关产品:LIXC-002细胞、H1092细胞、OVCA420细胞
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OV1063细胞系相关产品:KYSE-30细胞、Colon38细胞、KMS-18细胞
LS 123细胞系相关产品:LS1034细胞、GRSL细胞、YTMLC-90细胞
COV 504细胞系相关产品:HGBEC细胞、NCI-H520细胞、L-132细胞
253JBV细胞系相关产品:BT549细胞、Hs 578.T细胞、BJ [Human fibroblast]细胞
UMUC-14细胞系相关产品:HCAEC细胞、NS-20Y细胞、CTLL2细胞
Statens Seruminstitut Rabbit Cornea细胞系相关产品:SUDHL4细胞、HT细胞、HCEC-B4G12细胞
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LCD细胞系相关产品:NCI-SNU-520细胞、ISHI细胞、GM12878细胞
KYSE0030细胞系相关产品:hOMF细胞、P31/Fujioka细胞、Human Epithelioma-2细胞
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T98 G细胞系相关产品:Colon38细胞、MMQ细胞、32D.cl3细胞
GCT epithelioid cells纤维组织瘤细胞系
Nb-2细胞系相关产品:C666-1细胞、SK MEL 5细胞、CL40细胞
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