"SW1463 epithelioid cells人结肠腺癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。
SNU-387细胞系相关产品:H-1395细胞、NCIH1105细胞、UMNSAH/DF#1细胞
P3X63-Ag8.653细胞系相关产品:8226/S细胞、PC14细胞、OV3121细胞
KYSE0520细胞系相关产品:Caki-1细胞、RM-1细胞、S16细胞
细胞生长:贴壁
SW1463 epithelioid cells人结肠腺癌细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
最近在培养细胞时,发现其状态不是很好,很容易扎堆生长,用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来,很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的,传代的第二天,有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢?你好,我养的细胞和你一样,消化下来也是一团的,但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀,分皿后在镜下看一看,移动培养皿的时候尽量动作轻,避免晃动。细胞生长挺快,那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能:一、细胞消化后吹打不均匀,造成细胞成团生长:二、细胞细化太过,细胞成片脱落,吹打时没有受力点,细胞聚团生长。解决办法:根据细胞生长的情况进行多次消化,将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养:一般步骤为:真空泵吸走培养基,1XPBS漂洗两次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿为例),37度放置数分钟,轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落,加入适量血清,以吸管上下吸放数次以打散细胞团块,离心后加入新鲜培养基,按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间,若胰酶处理太久,容易造成细胞贴壁不紧,显微镜下观察立体感不强,严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901几种癌细胞处理时间可适当放长,一般处理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比较容易脱落,2min足矣,P19Cl6和293细胞贴壁不紧,可在PBS漂洗后,直接换新鲜培养基打散。
细胞传代方法:1:3—1:8传代,每周换液1-2次
NCI-H1650细胞系相关产品:P30/0HK细胞、Normal fibroblast-10细胞、SKRC-42细胞
Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a细胞系相关产品:HS940细胞、S.B.细胞、Ca761细胞
HPMEC细胞系相关产品:Hela-mock细胞、GEO细胞、FAK+/+细胞
LTEPsm细胞系相关产品:NCI-H596细胞、ONS76细胞、LC-1/sq细胞
LCD细胞系相关产品:NCI-SNU-520细胞、ISHI细胞、GM12878细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
SW1463 epithelioid cells人结肠腺癌细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
细胞形态特性:上皮细胞
细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
A2058细胞系相关产品:SW-480细胞、AMC-HN8细胞、A7r5细胞
SUM 52细胞系相关产品:MDA415细胞、SU86-86细胞、SKRC-20细胞
Calu-1细胞系相关产品:KYSE-140细胞、BCAP37细胞、NCI-BL2141细胞
TE354T细胞系相关产品:A2008细胞、RPMI6666细胞、PANC 813细胞
HO8910细胞系相关产品:HEC-1B细胞、HBZY 1细胞、H-2330细胞
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BrCL18细胞系相关产品:MUTZ3细胞、SKMEL-2细胞、VK-2/E6E7细胞
MDAMB134VI细胞系相关产品:R2C细胞、HCC0015细胞、RPMI 1846细胞
TF-1细胞系相关产品:Chang liver细胞、Alexander cells细胞、hTERT RPE1细胞
BHT-101细胞系相关产品:MSTO211H细胞、DV-90细胞、JeKo 1细胞
SW1463 epithelioid cells人结肠腺癌细胞系
HuP-T3细胞系相关产品:SK-CO-1细胞、SMMC-7721细胞、HCT-116细胞
C2C12细胞系相关产品:OC 316细胞、COLO-HSR细胞、RPE D407细胞
BJA-B细胞系相关产品:Y3Ag1.2.3细胞、NE-1细胞、BC-020细胞
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OC-3-VGH细胞系相关产品:SUDHL-6细胞、PJ34细胞、SUD-4细胞
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OVCA433细胞系相关产品:EC-9706细胞、JCA-1细胞、NCI-H2029细胞
Fox/NY细胞系相关产品:ZR751细胞、HCS-2/8细胞、SNB-19细胞
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NCI-H1648细胞系相关产品:CT26-clone 25细胞、UPCI:SCC154细胞、MSTO-211H细胞
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MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞系相关产品:RINm-5F细胞、3T3-Swiss albino细胞、EBC1细胞
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BIU-87细胞系相关产品:HUT 28细胞、COLO320DM细胞、MDA-MB-468-RED细胞
H28细胞系相关产品:H1618细胞、HOK细胞、V79-GalK1细胞
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RMC-1细胞系相关产品:VM-CUB-I细胞、LC-1-sq细胞、HuT102细胞
HPAF II细胞系相关产品:MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI细胞、Caki-1细胞、NUGC2细胞
Hs706T细胞系相关产品:SR786细胞、JC细胞、Panc02细胞
NCI-H498细胞系相关产品:RPE1-hTERT细胞、B16 subline B78细胞、22Rv-1细胞
M109细胞系相关产品:JAR细胞、RGC5细胞、Hs895.T细胞
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Monomac-1细胞系相关产品:H2228细胞、Panc 10.05细胞、SUM190细胞
B16 F10细胞系相关产品:A-704细胞、253JBV细胞、LNCaP subline C4-2细胞
K-562细胞系相关产品:GFP-Olig2细胞、Colo205细胞、H3255细胞
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VCaP细胞系相关产品:Hs274T细胞、LNCaP-C4-2细胞、SKOV-3细胞
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NCIH1105细胞系相关产品:ST 486细胞、CT26.WT细胞、H-1299细胞
SW1463 epithelioid cells人结肠腺癌细胞系
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