"D283 Med epithelioid cells人脑髓母细胞瘤细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。
L1210细胞系相关产品:HCA-7细胞、SVG p12细胞、TE9细胞
AMJ2-C8细胞系相关产品:ANA1细胞、CHO K1细胞、SGC 7901细胞
SBC-3细胞系相关产品:HCC4006细胞、NCIH716细胞、RM-1细胞
细胞生长:贴壁
D283 Med epithelioid cells人脑髓母细胞瘤细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞的冻存:为避免污染造成的损失,最小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化,需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前,细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培养基;包含10%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基;50%细胞条件培养基和50%含有10%甘油的新鲜培养基或50%细胞条件培养基和50%含有10%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基,一些普通的培养基成分可能是:50%细胞条件无血清培养基和50%包含有7.5%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有7.5%二甲基亚砜和10%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存:计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约200~400g离心5分钟沉淀细胞,使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以1×10(7)到5×10(7)细胞/ml密度,在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在无血清培养基中,再次悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存:使用分离试剂从基层分离细胞,分离时尽可能温和,使对细胞的损伤减少到最小。在完全生长培养基中,再次悬浮分离细胞,确定有活力细胞数。以大约200g离心5分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以5×10(6)到1×10(6)细胞/ml密度,在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿的冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。
细胞传代方法:每周换液2-3次。
THP-1细胞系相关产品:OVCAR420细胞、P388-D1细胞、High Five细胞
RGCs细胞系相关产品:SK-MES-1细胞、C81-61细胞、3T6 Swiss Albino细胞
SW 1417细胞系相关产品:OB2细胞、SKMEL1细胞、U-2 OS细胞
SUPT-1细胞系相关产品:RIN14B细胞、Hs852T细胞、Cates 1B细胞
J 774A.1细胞系相关产品:Panc4.03细胞、SKCol1细胞、KBM-5细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
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细胞生长特性:悬浮细胞的多细胞聚集体,和一些贴壁细胞
细胞形态特性:上皮细胞
细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
PaTu 8988 S细胞系相关产品:Panc 02细胞、PLC细胞、NCTC clone 929细胞
Microbiological Associates-104细胞系相关产品:HR1K细胞、KG-1a细胞、LN 382细胞
4T1细胞系相关产品:BSC40细胞、T173细胞、SK_HEP1细胞
NCIH1155细胞系相关产品:LS 1034细胞、IEC18细胞、Opossum Kidney细胞
NCI-H2405细胞系相关产品:MDA-MB-134VI细胞、OV3121细胞、MHHCALL2细胞
Colo205细胞系相关产品:KBM-7细胞、RAG细胞、MHCC 97细胞
MC-CAR细胞系相关产品:NSH细胞、SKLU1细胞、BE2M17细胞
HepG2-luc细胞系相关产品:SKNO1细胞、TE 671细胞、NRK clone 49F细胞
IEC18细胞系相关产品:MB231细胞、SU-DHL1细胞、QBC-939细胞
B95.8细胞系相关产品:BC-3-H-I细胞、HT29细胞、Kit-225-K6细胞
D283 Med epithelioid cells人脑髓母细胞瘤细胞系
3LL细胞系相关产品:HT-22细胞、PA-TU S细胞、SH-SY5Y Parental细胞
Hs675细胞系相关产品:H-1755细胞、Calf Pulmonary Artery 47细胞、Panc 1细胞
HFSF细胞系相关产品:526-mel细胞、C4-I细胞、TE15细胞
HCC70细胞系相关产品:NCIH1819细胞、KHYG-1细胞、MCF-10 Attached细胞
EAC-E2G8细胞系相关产品:OVCAR3细胞、TM-3细胞、A9 (Hamprecht)细胞
ME1细胞系相关产品:TE9细胞、Tb 1 Lu (NBL-12)细胞、NCI-H2228细胞
HA1800细胞系相关产品:HUSMC细胞、SUDHL-10细胞、K7M2-WT细胞
B4G12细胞系相关产品:MUM2B细胞、PCI:SG231细胞、Hs-578Bst细胞
TI-73细胞系相关产品:Hep 3B2.1-7细胞、KS-SLK细胞、P3J.HR1K细胞
FRTL 5细胞系相关产品:RAW264细胞、OCI/AML-5细胞、NS1-Ag 4/1细胞
IALM细胞系相关产品:DMS273细胞、COS7细胞、C28/I2细胞
SUM-149细胞系相关产品:RAMOS2G64C10细胞、HMEC-1细胞、KYSE-150细胞
P-2003细胞系相关产品:SCC 15细胞、TYK-nu细胞、HSAS4细胞
CAKI.1细胞系相关产品:SK-ChA1细胞、NKM1细胞、HGMC细胞
D341Med细胞系相关产品:NCI-H2405细胞、U20S细胞、MDA-MB-157细胞
MALME.3M细胞系相关产品:P3J细胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]细胞、SP-2细胞
Panc-3_27细胞系相关产品:WiDr细胞、SUIT 2细胞、PC3M-2B4细胞
KOPN8细胞系相关产品:HCC 94细胞、OE-19细胞、BS-C-1细胞
TK 10细胞系相关产品:MC-116细胞、AG06814-N细胞、CAL851细胞
MDCK细胞系相关产品:SK-BR-3细胞、PNEC30细胞、293/EBNA-1细胞
MV 4;11细胞系相关产品:KYSE 140细胞、CV-1.K细胞、RAW2647细胞
FRO81-2细胞系相关产品:RIN-m细胞、SW1088细胞、NCI-H196细胞
HASMC细胞系相关产品:HOS TE 85细胞、LIPF178C细胞、OCI Ly1细胞
DU 145细胞系相关产品:Fetal Human Lens-124细胞、McA-RH 8994细胞、U118-MG细胞
C4 I细胞系相关产品:Alexander cells细胞、CWR-22rv1细胞、CC-LP-I细胞
G-292 clone A141B1细胞系相关产品:EB2细胞、NCIH244细胞、LLC1细胞
MuM-2C细胞系相关产品:Hs688(A)T细胞、Calu6细胞、OV2008细胞
GM06141B细胞系相关产品:MGH-U1 (EJ)细胞、SN12-PM6细胞、H-719细胞
Huh-7.5.1细胞系相关产品:L-cells细胞、NPA87细胞、SMA-560细胞
NRK 49F细胞系相关产品:MCA205细胞、YAC-1细胞、T-CAM2细胞
LS174T细胞系相关产品:Rat Lung-65细胞、Ra #1细胞、P3/X63/Ag8细胞
LC-1 sq细胞系相关产品:CEM/C1细胞、NCI-H1618细胞、Bac1 2F5细胞
WTRL1细胞系相关产品:AAV-293细胞、H-920细胞、DanG细胞
H-508细胞系相关产品:LLCPK1细胞、NCIH727细胞、University of Arizona Cell Culture-812细胞
NCI-841细胞系相关产品:AML-2细胞、Rat1细胞、LS180细胞
RTMC细胞系相关产品:PL 45细胞、J-111细胞、KMH-2细胞
A375-SM细胞系相关产品:RT4-D6-P2T细胞、HepG2细胞、NCI-H165细胞
SNU-119细胞系相关产品:HL7702细胞、IBRS2细胞、PaCa2细胞
G361-mel细胞系相关产品:KBM-5细胞、TK-1细胞、REC 1细胞
MFHL-2细胞系相关产品:Normal fibroblast-10细胞、KLN205细胞、H-2198细胞
LIXC002细胞系相关产品:OCI/AML4细胞、Becker细胞、PC2细胞
SUM-52-PE细胞系相关产品:MDA MB 175 VII细胞、HN13细胞、HuH1细胞
PK13细胞系相关产品:MIA PaCa-2细胞、MM1S细胞、BEAS-2B细胞
JTC-28细胞系相关产品:G 292 Clone A 141B1细胞、HSC2细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415细胞
BALB/3T3 cl. A31细胞系相关产品:RCK-8细胞、HEK 293-F细胞、CTV-1细胞
AN3 CA细胞系相关产品:BV-2细胞、Ishikawa细胞、COLO 679细胞
LWnt-3A细胞系相关产品:A549 ATCC细胞、Epstein-Barr-3细胞、DMS 114细胞
Onda 11细胞系相关产品:SK-N-BE(2)C细胞、GM02219D细胞、COLO206细胞
HCC 2185细胞系相关产品:H-1930细胞、P3X63Ag8-6-5-3细胞、N2a细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6细胞系相关产品:Tsup-1细胞、P3X63Ag8细胞、HTori-3.1细胞
H82细胞系相关产品:FRTL-5细胞、H596细胞、OCM-1细胞
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HL-1细胞系相关产品:HK-2 [Human kidney]细胞、H1792细胞、OCI-Ly7细胞
3T3-A31细胞系相关产品:RBE细胞、DAN-G细胞、U266 B1细胞
4T1-LUC细胞系相关产品:HEL-92.1.7细胞、BL1339细胞、A2780CP70细胞
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