"GP2-293 epithelioid cells人胚肾上皮包装细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
正确的细胞复苏需知事项:细胞冻存好了,接下来要注意什么问题呢?没错,就是记得到时间了,拿出来复苏。那么,细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢?细胞活力和形态检查的作用何在?活力检查——千万不要使用不健康的细胞,可能有污染(真菌、支原体等),如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞:补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至70%单层时收获细胞,计数活细胞数,用冻存液调整细胞密度~5 x106 Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整);冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞,有不同类型的冻存液,根据细胞类型选择最合适的冻存液(常用的冻存液成分有):5-10% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质;5-15%甘油;如果细胞在无血清培养基内生长,应在50%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长24小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记好细胞类型,日期,冻存人等信息,并保证每冻存管不超过1.5ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以最快的速度转移冻存管知液氮罐内,因此,此步骤使用干冰,或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意,在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息,做好记录是非常非常重要的!还有一个最重要的,一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞,以免其中的一个液氮罐出现问题!细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要,熟记以下要点:当从液氮罐内取出细胞时,有可能会出现冻存管破裂的情况,使用保护面罩和防护服十分必要;其实,细胞复苏只是一个简单的实验,不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节,不然,也不一定会尽如人意。例如说,人身健康方面:一定要记得做好防冻工作,戴上护目镜;尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。
NB19细胞系相关产品:IHC-ST1细胞、U-251 MG细胞、NCI-H1869细胞
UCLA SO M14细胞系相关产品:H-220细胞、CEF细胞、C2BBe 1细胞
K-1735细胞系相关产品:786.O细胞、Calu 6细胞、HSAS3细胞
细胞生长:贴壁
GP2-293 epithelioid cells人胚肾上皮包装细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞的冻存:为避免污染造成的损失,最小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化,需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前,细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培养基;包含10%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基;50%细胞条件培养基和50%含有10%甘油的新鲜培养基或50%细胞条件培养基和50%含有10%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基,一些普通的培养基成分可能是:50%细胞条件无血清培养基和50%包含有7.5%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有7.5%二甲基亚砜和10%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存:计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约200~400g离心5分钟沉淀细胞,使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以1×10(7)到5×10(7)细胞/ml密度,在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在无血清培养基中,再次悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存:使用分离试剂从基层分离细胞,分离时尽可能温和,使对细胞的损伤减少到最小。在完全生长培养基中,再次悬浮分离细胞,确定有活力细胞数。以大约200g离心5分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以5×10(6)到1×10(6)细胞/ml密度,在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿的冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。
细胞传代方法:1:2传代
LA-N-1细胞系相关产品:HOP-62细胞、B16F10细胞、CHG-5细胞
OS-732细胞系相关产品:6T-CEM细胞、H-EMC-SS细胞、M-1细胞
NCI-H2228细胞系相关产品:HEM细胞、CaES-17细胞、Jiyoye(P-2003)细胞
Hs832T细胞系相关产品:PA I细胞、SCL I细胞、mIMCD-3细胞
L-M (TK-)细胞系相关产品:Sp2/0细胞、SKGT2细胞、SKG IIIa细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
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细胞生长特性:贴壁生长
细胞形态特性:上皮样
常见细胞培养中一些问题总结:1)培养基中血清的比例多少合适?血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为5%-15%,不要低于5%或高过20%,因为含量过低会导致细胞营养不足,过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为10%,可以适量加减;2)何时须更换培养基?视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本数据上的更换时间,按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换;3)购买的复苏细胞,为何会有脱落?因为运输的过程中不可避免的会有震荡,收到后可以离心收集;4)购买的细胞冷冻管经解冻后,为何会发生细胞数目太少之情形?研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少,大都是因为离心过程操作上的失误,造成细胞的物理性损伤,以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心,应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可;5)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久;6)收到的冷冻管瓶身破裂,瓶盖有裂纹,或瓶盖脱落之原因?冷冻管瓶盖裂纹,或瓶身破裂,可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当,造成冷冻管裂损,建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱,乃因热胀冷缩之物理现象,冷冻管有可能因此而造成细胞污染,故冷冻管于放入和取出液氮桶时,均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
686LN-M4e细胞系相关产品:HSC-2细胞、Dx5细胞、786-O RCC细胞
H250细胞系相关产品:VM-CUB1细胞、RERF-LC-MS细胞、NU-GC-2细胞
HepG2/C3A细胞系相关产品:SUM-102PT细胞、HUCCT1细胞、LS411细胞
NRK clone 52E细胞系相关产品:PBL细胞、ARO81细胞、NIH:OVCAR-5细胞
HMEC1细胞系相关产品:LTEP-sm 1细胞、PCI-4B细胞、MDA-MB-134 VI细胞
NCI-HUT-520细胞系相关产品:P3J HR-1细胞、RS(4;11)细胞、MF2059细胞
H64细胞系相关产品:EC109细胞、NCI H82细胞、PLC PRF 5细胞
DoHH-2细胞系相关产品:MSCs(mUCMSCs)细胞、Lung cancer-1/squamous细胞、RAW264.7细胞
HOS TE 85细胞系相关产品:293AD细胞、LI7细胞、MOVAS-1细胞
G 292 Clone A 141B1细胞系相关产品:T-HEECs细胞、COV504细胞、X63-AG 8.653细胞
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BNCL2细胞系相关产品:H647细胞、IGR.OV1细胞、U-251_MG细胞
RL95-2细胞系相关产品:Clone 166细胞、GM03570细胞、Molm 13细胞
UCLA SO M14细胞系相关产品:H-220细胞、CEF细胞、C2BBe 1细胞
LAPC4细胞系相关产品:EVSAT细胞、SNU886细胞、Bovine ENDometrial cells细胞
NCI-UMC-11细胞系相关产品:WM-115细胞、H1623细胞、NK-92 MI细胞
PC 61.5.3细胞系相关产品:alpha TC1 clone 6细胞、SK-MEL-MeWo细胞、U-251-MG细胞
PC 61.5.3细胞系相关产品:alpha TC1 clone 6细胞、SK-MEL-MeWo细胞、U-251-MG细胞
SNU182细胞系相关产品:U266细胞、CC-LP-1细胞、hTERT-RPE1细胞
MRMT-1细胞系相关产品:HOEC细胞、SNU-638细胞、CORL88细胞
OCI-Ly10细胞系相关产品:RIN-m 14B细胞、Hs 578T细胞、P388.D1细胞
C-Lu65细胞系相关产品:MOLP-2细胞、RCC10细胞、NCIH2009细胞
LAN-6细胞系相关产品:H82sclc细胞、207细胞、CFPAC细胞
Tu686细胞系相关产品:UCLA-RO 81细胞、SUM102细胞、RPMI8402细胞
RM1细胞系相关产品:NCIH208细胞、RAMSCs细胞、CFPAC-1细胞
H-128细胞系相关产品:NCI-H125细胞、UO-31细胞、H-9细胞
NCI-H-128细胞系相关产品:RPMI 8226/S细胞、NRK-49F细胞、C-127细胞
LuCL4细胞系相关产品:CD 18细胞、BC-025细胞、Baby Hamster Kidney 21细胞
OCI-LY-7细胞系相关产品:HEC-251细胞、SK-ES-1细胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15细胞
SK-MEL-1细胞系相关产品:BV173细胞、ACC-M细胞、MDA-436细胞
Ha Fe细胞系相关产品:HCC1008细胞、AN3CA细胞、OVCAR.8细胞
Mia PACA 2细胞系相关产品:U118细胞、Ramos 1细胞、GM06141B细胞
LNCaP-ATCC细胞系相关产品:MLA 144细胞、Japanese Tissue Culture-28细胞、P3HRI细胞
A101D细胞系相关产品:SNU-C2B细胞、NCI-A549细胞、B6Tert-1细胞
3T3NIH细胞系相关产品:LX-2细胞、HCC1395细胞、OV1-P细胞
TW-039细胞系相关产品:RT-4细胞、102PT细胞、GalK 1细胞
FOX-NY细胞系相关产品:A-875细胞、C8161细胞、MLO-Y4细胞
NRK clone 49F细胞系相关产品:H322T细胞、OVCA-420细胞、OE21细胞
BALB/3T3细胞系相关产品:GM03573细胞、HEL 92.1.7细胞、T9细胞
KE-37细胞系相关产品:KE39细胞、6-T CEM细胞、HM1900细胞
H-2452细胞系相关产品:S-16细胞、hOMF细胞、BCaP 37细胞
HBZY1细胞系相关产品:VeroE6细胞、Mac-1细胞、LS 174T细胞
MGC803细胞系相关产品:A2780-CP细胞、SK-GT-4细胞、CEM细胞
Mouse Forestomach Carcinoma细胞系相关产品:MCA 205细胞、GM00346B细胞、Capan-1细胞
SK Mel 2细胞系相关产品:VK2细胞、H.Ep. No. 2细胞、GH3细胞
3T3NIH细胞系相关产品:LX-2细胞、HCC1395细胞、OV1-P细胞
BLO 11细胞系相关产品:COR-L105细胞、HEK-2细胞、MKN28细胞
COLO-320DM细胞系相关产品:NCI-H510A细胞、L-cell细胞、PK-15细胞
CA46细胞系相关产品:H-69细胞、C22 (Clara)细胞、Kasumi-6细胞
Medical Research Council cell strain-9细胞系相关产品:NCIH441细胞、T24(ECV304)细胞、H4-II-E-C3细胞
NCIH2170细胞系相关产品:Karpas-422细胞、Roswell Park Memorial Institute 8226细胞、OCILY7细胞
LLC-PK-1细胞系相关产品:KHYG细胞、INS-1细胞、HEK293EBNA细胞
KOSC-2 cl3-43细胞系相关产品:Calu6细胞、MDCC-MSB1细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞
RCCJF细胞系相关产品:HSC-1细胞、UMUC1细胞、CLONE M3细胞
TGBC11TKB细胞系相关产品:NCIH2085细胞、NCTC-3960细胞、OVCAR-433细胞
UWB1.289细胞系相关产品:118MG细胞、NCIH196细胞、FD-LSC-1细胞
SJRH 30细胞系相关产品:NCI-H498细胞、GA-10(Clone 4)细胞、HVSMC细胞
MDAMB435细胞系相关产品:NCIH647细胞、PTK1细胞、UACC 812细胞
CCD 1112SK细胞系相关产品:OVCAR-432细胞、OV1-P细胞、H-1650细胞
G-402细胞系相关产品:FU-MMT-1细胞、NCI-H2141细胞、MGH-U1 (EJ)细胞
Ramos (RA 1)细胞系相关产品:hESC细胞、K7M2 wt细胞、SW-1990细胞
MKN-45细胞系相关产品:SHSY-5Y细胞、HPB/ALL细胞、MCF-7细胞
GP2-293 epithelioid cells人胚肾上皮包装细胞系
H2195细胞系相关产品:NCI-SNU-449细胞、COLO679细胞、NCI H716细胞
H889细胞系相关产品:MDAMB415细胞、CAL-62细胞、HLE B-3细胞
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Hep-G2/C3A细胞系相关产品:alpha TC1-6细胞、SNU-16细胞、HUSMC细胞
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