"NCI-H716 epithelioid cells人结直肠腺癌细胞系
细胞背景资料:从一位经5-尿嘧啶治疗的患者腹水中得到的细胞建立了这个细胞株。 与其它结直肠癌细胞系不同,这株细胞有多巴脱羧酶,细胞质中有核心致密的内分泌型颗粒。 这株细胞不表达TAG-72 或CA19-9抗原,也不生成癌胚抗原(CEA)
细胞形态:上皮细胞样
贴壁消化难题:1,先用PBS 把细胞洗两遍,使瓶内没有血清了,减少对胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在细胞有些消化下来时,拿着瓶口,运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体,这样细胞很快就下来了,还不需要吹打,分散也均匀;2,成团、絮状:消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象,血清可以终止胰酶的作用,如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清终止,如果消化液中加入了edta的话,就要将消化液倒干净,如果细胞贴壁要求不是很严格的话,一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基,加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性最强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势),随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验,则不能弃去胰酶),加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代,否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片);消化过度:马上用培养基中和,用吸管吹打细胞,收集全部的细胞到以无菌的离心管中800RPM 3分钟。弃上清,用全培重悬,换新的培养瓶继续培养,状态不好的细胞在培养的过程中会死亡脱落,在换液的时候可以清除掉!
HuLEC-5a细胞系相关产品:AG06814-M细胞、OCI-AML-5细胞、NBLAN5T细胞
H322细胞系相关产品:P3-x63-Ag8 653细胞、Jiyoye细胞、293F细胞
HEI193细胞系相关产品:DLD1细胞、138MG细胞、UMNSAH/DF-1细胞
细胞生长:贴壁
NCI-H716 epithelioid cells人结直肠腺癌细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代的一般方法:开始细胞传代前,仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全:一般主要有:细胞(单层细胞,镜检适合)、培养液(MEM-0.2%LH培养液或MEM培养液或199等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血清、庆大霉素溶液(1万单位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、胶塞、吸管(10ml、1m1)、细胞吹打管(20ml)(以上用具需经121℃至少15分钟高压灭菌)、C02 孵箱、超净台、倒置显微镜、4℃、-20℃冰箱;操作步骤:镜检细胞,挑选生长状态良好,细胞界限清晰,具有立体感,形态好无污染、无异常及可疑病变细胞。配制细胞培养液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培养液100ml内,加入灭活小牛血清10m1,庆大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸钠溶液3ml。(仅供一般参考)。消化细胞;先用PBS洗液冲洗细胞表面1-2次,每次10m1,弃去洗液,向细胞瓶内加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,细胞瓶平放,使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入10m1细胞培养液吹打分散细胞,按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中,再加入10m1细胞培养液重复吹打一次后分装,然后补加至所需培养量。加塞,置于37±1℃孵箱培养。约2~4天成片。(由细胞接种浓度决定);填写传代记录。
细胞传代方法:1:3—1:6传代,每周换液2—3次
NIH:OVCAR-8细胞系相关产品:X63-Ag8.653细胞、QBI-HEK 293A细胞、IEC-6细胞
MC3T3-E1 Subclone 4细胞系相关产品:RCF细胞、H184A1细胞、CAL 148细胞
RN-c细胞系相关产品:BSC-1细胞、X63细胞、NTERA-2细胞
Huh-7细胞系相关产品:MCM细胞、EAhy926细胞、MDAMB435S细胞
CCRF-CEM C7细胞系相关产品:1301细胞、Colon 26细胞、Alexander细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NCI-H716 epithelioid cells人结直肠腺癌细胞系
细胞生长特性:悬浮生长,聚团,少数贴壁
细胞形态特性:上皮细胞样
细胞接收后的操作流程与注意事项:1)如果细胞为贴壁细胞,而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡,请及时联系实验室技术人员会跟进解决;2)贴壁细胞生长缓慢;适当提高血清浓度(最高不能超过20%),或可根据该细胞生长密度,考虑胰酶消化后,转移到新的培养瓶继续培养;3)生长不均:贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养。
HSF细胞系相关产品:C3H10T1/2 clone8细胞、MGECs细胞、NCIH2106细胞
PC.3细胞系相关产品:SK-NM-C细胞、AZ 521细胞、SK-NM-C细胞
CCD-112CoN细胞系相关产品:PC-3M 2B4细胞、EHEB细胞、RPMI 8402细胞
HS-445细胞系相关产品:PC.3细胞、HLE-SRA-01/04细胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3细胞
EA. hy 926细胞系相关产品:SUM190PT细胞、THLE-2细胞、AU 565细胞
DMS114细胞系相关产品:LL/2细胞、Nb 2细胞、HCC-9204细胞
LC-1细胞系相关产品:NCI-H1836细胞、JB6 clone 30, subclone 7b细胞、CO115细胞
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HEL-92细胞系相关产品:Hs 737.T细胞、NCIH1184细胞、PT-K75细胞
S.B.细胞系相关产品:BEL7402细胞、HEK-293-EBNA细胞、DU 145细胞
NCI-H716 epithelioid cells人结直肠腺癌细胞系
SNU-475细胞系相关产品:SuDHL 10细胞、TF-1a细胞、SuDHL 10细胞
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SK-MES细胞系相关产品:624-mel细胞、BBE细胞、MPP 89细胞
Eph4 1424细胞系相关产品:HDMEC细胞、RBMVEC细胞、LC-2-Ad细胞
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GM17219细胞系相关产品:SUM159细胞、BT483细胞、Hs-852-T细胞
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G361mel细胞系相关产品:VP 267细胞、HCC-202细胞、HPB/ALL细胞
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TE-3A细胞系相关产品:COLO 741细胞、GM06141B细胞、SuperTube细胞
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KMBC细胞系相关产品:MKN-28细胞、TE 85 ClF-5细胞、Neukoplast细胞
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PLC/PRF5细胞系相关产品:KYSE 510细胞、SUPB15细胞、LC1sq细胞
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SUM-159-PT细胞系相关产品:Sp2/0-Ag-14细胞、SW1271细胞、OVCAR4细胞
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JROECL19细胞系相关产品:LC1/Sq细胞、U118细胞、BT483细胞
VM-CUB1细胞系相关产品:HSC4细胞、MSCs(mUCMSCs)细胞、SW-948细胞
NK92细胞系相关产品:HSC5细胞、PC-9/S1细胞、N1S1细胞
H-929细胞系相关产品:C3H/10T1/2 CL8细胞、ZR751细胞、NCI-H661细胞
H-929细胞系相关产品:C3H/10T1/2 CL8细胞、ZR751细胞、NCI-H661细胞
mRMEC细胞系相关产品:A375mel细胞、SCL-II细胞、SK-GT-2细胞
HCa/16A3-F细胞系相关产品:SHEP1细胞、CCK-81细胞、RA.1细胞
BC-022细胞系相关产品:EL-4细胞、COLO 206F细胞、RPMI-7666细胞
GM06141细胞系相关产品:RBL-I细胞、THP 1细胞、NCI N87细胞
PC615.3细胞系相关产品:HCC827细胞、LIM1215细胞、BEL7402细胞
MDA-MB231细胞系相关产品:SF-126细胞、NCI-H1184细胞、TW-039细胞
SW-962细胞系相关产品:H2126细胞、Jiyoye (P-2003)细胞、CFPAC1细胞
RPMI 2650细胞系相关产品:JIMT细胞、HuLEC-5a细胞、H-735细胞
H748细胞系相关产品:MJ细胞、H-2009细胞、CAL 27细胞
RC-4B/C细胞系相关产品:SW-948细胞、BA/F3细胞、SK Mel28细胞
Caki-1细胞系相关产品:NPA-87细胞、NCIH929细胞、GM-3573细胞
Hela-Ap-1细胞系相关产品:LC-2/ad细胞、HSKMC细胞、MKN1细胞
NCI-H716 epithelioid cells人结直肠腺癌细胞系
NCIH520细胞系相关产品:SUDHL-16细胞、A 172细胞、DC2.4细胞
Michigan Cancer Foundation-12F细胞系相关产品:HBL 100细胞、NCI-H1385细胞、TE14细胞
AML193细胞系相关产品:NCIH146细胞、Fetal Human Colon细胞、HLEC细胞
CCD-112CoN细胞系相关产品:PC-3M 2B4细胞、HUT28细胞、UM-UC14细胞
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