"L-540 Cell:人霍奇金淋巴瘤细胞系
细胞形态:淋巴母细胞样
细胞生长:悬浮
细胞背景资料:霍奇金淋巴瘤;女性
N-2a细胞系相关产品:SUDHL16细胞、B16-BL6细胞、NCI.H226细胞
VMRCLCD细胞系相关产品:L-5178-Y-R细胞、PaTu-8988s细胞、Astrocyte type I clone细胞
OVCAR 4细胞系相关产品:TSCC1细胞、HIEC细胞、NPA-87细胞
CCD 841 CoTr细胞系相关产品:COLO-320HSR细胞、CHP212细胞、C3H-10T1/2细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
L-540 Cell:人霍奇金淋巴瘤细胞系
细胞的冻存:目前,细胞冻存最常用的技术是液氮冷冻保存法,主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。主要操作步骤为:(1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为3×10(6)~1×10(7)/mL之间。(3)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中,安瓿装1~1.5mL在火焰喷灯上封口,封口处要完全封闭,圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(4)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜,次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤:先将安瓿置入4℃冰箱中2~3小时,再移至冰箱冷冻室内3~4小时,再吊入液氮容器颈气态部分存放2小时,最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,取出一只安瓿细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
培养细胞真的不难,最关键几点:1)所有的东西使用,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,最近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
Z138细胞系相关产品:NCI-H520细胞、HeLa 229细胞、KATOIII细胞
HEC-1-A细胞系相关产品:WSU-DLCL2细胞、U-87 MG细胞、Ramos.2G6.4C10细胞
JHH2细胞系相关产品:DMS 153细胞、KCL22细胞、675T细胞
LA-N-1细胞系相关产品:HOP-62细胞、B16F10细胞、CHG-5细胞
DoTc2-4510细胞系相关产品:MS-751细胞、RPMI no. 8226细胞、SG231细胞
细胞生长特性:悬浮
L-540 Cell:人霍奇金淋巴瘤细胞系
细胞复苏相关注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。4.离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞形态特性:详见细胞说明书
18G3.cl 1细胞系相关产品:SNU-216细胞、NCI H157细胞、SKGIIIA细胞
MDCC-MSB-1细胞系相关产品:C-33-A细胞、RDES-1细胞、NCI-H1623细胞
MRC-9细胞系相关产品:NCIH1155细胞、Hep-3B细胞、SNU-C2A细胞
ABE8.1/2细胞系相关产品:Bovine ENDometrial cells细胞、RC-K8细胞、FL 62891细胞
MOLT3细胞系相关产品:NCI-H660细胞、P3 (Jiyoye)细胞、293 c18细胞
NIH:OVCAR-5细胞系相关产品:Ca9-22细胞、HCT-GEO细胞、Hs870T细胞
RL-952细胞系相关产品:B16细胞、BEND细胞、TE3A细胞
L-540 Cell:人霍奇金淋巴瘤细胞系
Fetal Bovine Heart Endothelial细胞系相关产品:HT22细胞、U 266细胞、PLCPRF5细胞
HPAF/CD18细胞系相关产品:MUS-M1细胞、PANC 813细胞、BSC-40细胞
Caki2细胞系相关产品:BE2C细胞、OKT 3细胞、CAL-78细胞
SMMC-7721细胞系相关产品:CCD841CoN细胞、NCIH1651细胞、L Wnt-3A细胞
CL1细胞系相关产品:BEL 7404细胞、HEL-92细胞、MiaPaCa-2细胞
RD细胞系相关产品:MDA MB231细胞、Hs281T细胞、KYSE0410细胞
CHOK1细胞系相关产品:SKRC20细胞、R 1610细胞、KHYG-1细胞
OVCAR420细胞系相关产品:SiHa细胞、MDA MB 134VI细胞、SF767细胞
210RCY3-Ag1.2.3细胞系相关产品:C32 [Human melanoma]细胞、QSG-7701细胞、NCIH650细胞
NCI-H1694细胞系相关产品:H1048细胞、OKAC1细胞、NCI-H441细胞
UMNSAH/DF#1细胞系相关产品:SUM 149细胞、HELF细胞、IEC-18细胞
MLOY4细胞系相关产品:PC615.3细胞、GM346细胞、GM00346细胞
KRC Y细胞系相关产品:L540细胞、B-95-8细胞、McG-1细胞
EA.hy 926细胞系相关产品:RAMSCs细胞、SKMel-5细胞、HEI-193细胞
3T3 Swiss Albino细胞系相关产品:OVTOKO细胞、BNL CL2细胞、CCK81细胞
2B4-L细胞系相关产品:SKNF1细胞、Hs 343.T细胞、GM04680细胞
KOPN8细胞系相关产品:HCC 94细胞、OE-19细胞、BS-C-1细胞
MV-4-11细胞系相关产品:OCILY-3细胞、SPC-A1细胞、UACC-893细胞
AM38细胞系相关产品:RPMI8226/S细胞、VMRCLCD细胞、Co 205细胞
UACC-893细胞系相关产品:HGC27细胞、NCIH810细胞、NB19细胞
RCSMC细胞系相关产品:OVCAR.8细胞、H-2073细胞、LAN-5细胞
RL-95-2细胞系相关产品:SK-ES-1细胞、Y3-Ag123细胞、SUDHL2细胞
NCI-H1048细胞系相关产品:TE 85.T细胞、CMT 167细胞、RAG细胞
MFE-296细胞系相关产品:PIG1细胞、H-747细胞、A375mel细胞
JeKo-1细胞系相关产品:UM2细胞、BCP-1细胞、H1734细胞
373MG细胞系相关产品:624 MEL细胞、ARPE19细胞、HMEL细胞
HCC-2279细胞系相关产品:HPAEC细胞、UMRC2细胞、UO31细胞
D283MED细胞系相关产品:Lu99A细胞、HEK293S细胞、DoTc2细胞
HARAB细胞系相关产品:EA. hy 926细胞、Jurkat FHCRC细胞、FUOV1细胞
Hep G2-Luc细胞系相关产品:SUDHL-5细胞、A673细胞、Ls-174-T细胞
HCC2935细胞系相关产品:GLC82细胞、L5178Y TK+/-3.7.2c细胞、OC-3-VGH细胞
BJA-B1细胞系相关产品:Me Wo细胞、Granta 519细胞、TR146细胞
OCI/AML-5细胞系相关产品:EC-GI-10细胞、253J-Bladder-V细胞、MHCC97-H细胞
H747细胞系相关产品:SUD-4细胞、MDA MB 231细胞、SUM-52PE细胞
HuO9细胞系相关产品:SW1990细胞、MDA-436细胞、BT.549细胞
NIE-115细胞系相关产品:MRASMC细胞、Hs852细胞、L5178Y细胞
SK-N-BE-2c细胞系相关产品:H-1915细胞、Human Foreskin Fibroblast细胞、ABC-1细胞
MDA-MB-468细胞系相关产品:V79-4细胞、H82细胞、Ra No. 1细胞
MUS-M1细胞系相关产品:KE-37细胞、PCI-4M细胞、BNCL2细胞
MN-60细胞系相关产品:Wien133细胞、H-838细胞、HCC1599细胞
MES 23.5细胞系相关产品:C2A细胞、Mono Mac6细胞、P3/ag细胞
FU-OV-1细胞系相关产品:NCIH526细胞、MDA-MB-231-GFP细胞、U-CH1细胞
EOMA细胞系相关产品:P3/NSI/1-AG4-1细胞、OB2细胞、H-548细胞
L-540 Cell:人霍奇金淋巴瘤细胞系
AMO1细胞系相关产品:RKO-AS-45-1细胞、MHCC 97-L细胞、OPM2细胞
NTera 2细胞系相关产品:N1E115细胞、NK62a细胞、NCI-H295细胞
T47D细胞系相关产品:AR-42J细胞、Hs895T细胞、Hs888T细胞
NTERA-2 cl.D1细胞系相关产品:GM02219细胞、HMC3细胞、B16/F1细胞
COLO-679细胞系相关产品:TE-6细胞、H283细胞、3T3-442A细胞
HCC2157细胞系相关产品:IMR-32细胞、Panc10.05细胞、OV433细胞
BLO11细胞系相关产品:H508细胞、H522细胞、C918细胞
Institute for Medical Research-90细胞系相关产品:CACO2细胞、NCIH2009细胞、NCI-H322T细胞
U-2OS细胞系相关产品:RT 112细胞、OLN93细胞、NS653细胞
P3-x63-Ag8 653细胞系相关产品:H23细胞、NCIH2126细胞、MV3细胞
BJ1细胞系相关产品:MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞、T241细胞、NCI-H510A细胞
M-20细胞系相关产品:HCCC9810细胞、3T3-442A细胞、HOEC细胞
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