"KG-1a Cell:人急性骨髓白血病细胞系
细胞形态:淋巴母细胞样
细胞生长:悬浮
细胞背景资料:急性髓系白血病;男性
H2085细胞系相关产品:Epstein-Barr-1细胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone细胞、H1618细胞
CL 1-5细胞系相关产品:PANC-1细胞、H-1563细胞、IBMF-7细胞
SW780细胞系相关产品:TOV-21G细胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]细胞、Vero E6细胞
SK MEL-28细胞系相关产品:Mv 1 Lu细胞、SK-ChA1细胞、RGCs细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
KG-1a Cell:人急性骨髓白血病细胞系
细胞消化过程总结:其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足够了,一般我加300ul。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候,比如tsDC细胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙状移动。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
培养细胞真的不难,最关键几点:1)所有的东西使用,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,最近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
PC 12细胞系相关产品:RPMI-2650细胞、RPMI 6666细胞、SKN-SH细胞
Embryonic Bovine Tracheal cells细胞系相关产品:NCM460细胞、HNE2细胞、DMS 153细胞
PG-4 S+L-细胞系相关产品:PLMVEC细胞、SW-780细胞、HSC-3细胞
SW 837细胞系相关产品:NCIH2122细胞、NCM-460细胞、Kasumi-1细胞
MAVER1细胞系相关产品:SNU-761细胞、HuNS1细胞、FF-WT-BJ细胞
细胞生长特性:悬浮
KG-1a Cell:人急性骨髓白血病细胞系
细胞复苏相关注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。4.离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞形态特性:详见细胞说明书
UPCI:SCC90细胞系相关产品:Jurkat (clone E6-1)细胞、NCIH1155细胞、GM00637B细胞
D-341Med细胞系相关产品:MT2细胞、hTERT-HPNE细胞、RPMI #8226细胞
BMU-S1细胞系相关产品:Caco 2细胞、NCI-H1781细胞、SW 982细胞
OVCA5细胞系相关产品:PANC-10-05细胞、ML2细胞、MDA-MB-134-VI细胞
MFE280细胞系相关产品:EBC1细胞、MG-63细胞、BaF3细胞
CAL78细胞系相关产品:MFE-296细胞、Hs 737.T细胞、OEC19细胞
MCF-7ADR细胞系相关产品:Walker-Ca.256细胞、KASUMI1细胞、EJ 138细胞
KG-1a Cell:人急性骨髓白血病细胞系
HMO6细胞系相关产品:NG 108-15细胞、CNE2Z细胞、H-378细胞
RIN-m5F细胞系相关产品:NCIN87细胞、CCC-HHM-2细胞、639V细胞
EBC1细胞系相关产品:Panc 04.03细胞、NK 10a细胞、KNS-62细胞
SKMel-5细胞系相关产品:WC00097细胞、Hepatoma-22细胞、HL-1细胞
PAI细胞系相关产品:UPCISCC090细胞、MS751细胞、H1404细胞
HIT clone T15细胞系相关产品:NL20细胞、SVEC4-10细胞、NW-38细胞
3396细胞系相关产品:MDA MB 361细胞、Panc 05.04细胞、PC-3M-2B4细胞
TEC细胞系相关产品:BNL.CL2细胞、SK Mel 2细胞、LM3细胞
Bovine Turbinate细胞系相关产品:MARC-145细胞、TCC-PAN2细胞、RPMI-1846细胞
Bovine Turbinate细胞系相关产品:MARC-145细胞、TCC-PAN2细胞、RPMI-1846细胞
H-920细胞系相关产品:JVM3细胞、SNU475细胞、NCIH2052细胞
RT-BM细胞系相关产品:DHL6细胞、H-740细胞、OKAC1细胞
2B4-L细胞系相关产品:SKNF1细胞、Hs 343.T细胞、GM04680细胞
SW-1573细胞系相关产品:MDBK (NBL-1)细胞、IM 9细胞、NR 8383细胞
SkMel31细胞系相关产品:CWR22R-V1细胞、LS-174细胞、32D:cl3细胞
NCIH596细胞系相关产品:Tu-212细胞、NCIH2066细胞、CL1细胞
LN-382细胞系相关产品:W256细胞、SVGp12细胞、U-266细胞
HPMEC细胞系相关产品:Hela-mock细胞、GEO细胞、FAK+/+细胞
HCGC细胞系相关产品:BC3H-1细胞、PG-BE1细胞、OCUM-1细胞
NCIH747细胞系相关产品:SK Mel 1细胞、RFL-6细胞、U266BL细胞
KOSC-2细胞系相关产品:OAW42细胞、Mel-MeWo细胞、T-ALL-1细胞
NCI-441细胞系相关产品:SGC-996细胞、HCC-1569细胞、A 253细胞
Bac1 2F5细胞系相关产品:X63Ag8.653细胞、PanC1细胞、Hu-P-T4细胞
ML-2细胞系相关产品:CAMA细胞、H2452细胞、NCIH508细胞
HO-8910PM细胞系相关产品:3T6细胞、TYKnu细胞、T98G细胞
HCC-366细胞系相关产品:NCIH2591细胞、A 549细胞、LC-1细胞
Bac1 2F5细胞系相关产品:X63Ag8.653细胞、PanC1细胞、Hu-P-T4细胞
NCIH2171细胞系相关产品:CAL-148细胞、NCI-H2073细胞、LICR-LON-HN6细胞
Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8细胞系相关产品:L 540细胞、RMC细胞、P3-X63-Ag8-653细胞
R 1610细胞系相关产品:E0771细胞、PA1细胞、MLE12细胞
HNE2细胞系相关产品:SKN-AS细胞、Panc-05.04细胞、HPAEC细胞
HCC1588细胞系相关产品:H-211细胞、MDA-kb2细胞、H-3255细胞
SG231细胞系相关产品:K7M2细胞、32Dc3细胞、MRMT-1细胞
Menschliche Und Tierische Zellkulture-1细胞系相关产品:NCIH1838细胞、H157细胞、SK 1细胞
Soleus clone 8细胞系相关产品:Rat Glomerular Endothelial细胞、HT 1080细胞、OCI-LY-10细胞
MHCCLM3细胞系相关产品:HCC0095细胞、H2110细胞、SNU-719细胞
RBL细胞系相关产品:MMAc.SF细胞、NK92MI细胞、H747细胞
HGC27细胞系相关产品:SK BR 03细胞、MDA-134细胞、Hep G2细胞
KY180细胞系相关产品:SW1353细胞、SW 1088细胞、RKO-E6细胞
MDA1386细胞系相关产品:BT-549细胞、CEM/C1细胞、MN-60细胞
MS1细胞系相关产品:H1522细胞、MS-751细胞、YES-2细胞
BE(2)M17细胞系相关产品:Mhh-Call 2细胞、MPP-89细胞、Normal Rat, August 3, 1983细胞
PLC PRF 5细胞系相关产品:RLE-6TN细胞、U-2932细胞、DMS-53细胞
KG-1a Cell:人急性骨髓白血病细胞系
JIMT-1细胞系相关产品:TFK1细胞、H-1568细胞、BJA-B细胞
HTori-3细胞系相关产品:LM6细胞、Hs 746T细胞、MUG-Chor1细胞
C4-2 B细胞系相关产品:AR41P细胞、EB-3细胞、Panc-813细胞
QBC(939)细胞系相关产品:HSC(Human Schwann)细胞、ARPE-19细胞、MuM-2C细胞
SCC25细胞系相关产品:Hs-940细胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6细胞、P3-Jiyoye细胞
KM12 SM细胞系相关产品:Madin Darby Bovine Kidney细胞、SCH细胞、GAK细胞
293EBNA细胞系相关产品:GM-3573细胞、A375-MEL细胞、Hs-281-T细胞
OVCAR.3细胞系相关产品:Vero C1008细胞、SKNEP1细胞、Madin Darby Canine Kidney细胞
EL 4细胞系相关产品:L5178Y细胞、Hs 294T细胞、HuH-28细胞
NCI-H295细胞系相关产品:NCIH2141细胞、HUC-1细胞、Keio University-19-19细胞
CAL-148细胞系相关产品:253J-Bladder-V细胞、T-47-D细胞、COLO680N细胞
Pfeiffer细胞系相关产品:L-Wnt-3A细胞、Melan-a细胞、HT clone H9细胞
"