"P388D1 Cell:小鼠淋巴样瘤细胞系
细胞形态:淋巴母细胞样
细胞生长:悬浮
细胞背景资料:详见相关文献介绍
3T3 L1细胞系相关产品:NL20SV细胞、IEC6细胞、NALM 6细胞
Ca-Ski细胞系相关产品:LIM1215细胞、KPNRTBM1细胞、L-1210细胞
PCI-4.2细胞系相关产品:CWR22-R1细胞、D-283细胞、DMS114细胞
Kupffer细胞系相关产品:Hs-729-T细胞、HN 4细胞、SUM 190PT细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
P388D1 Cell:小鼠淋巴样瘤细胞系
细胞消化过程总结:其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足够了,一般我加300ul。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候,比如tsDC细胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙状移动。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞接收后的操作流程与注意事项:1)如果细胞为贴壁细胞,而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡,请及时联系实验室技术人员会跟进解决;2)贴壁细胞生长缓慢;适当提高血清浓度(最高不能超过20%),或可根据该细胞生长密度,考虑胰酶消化后,转移到新的培养瓶继续培养;3)生长不均:贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
Mv 1 Lu (NBL-7)细胞系相关产品:BCaP 37细胞、H-1944细胞、NCI-UMC-11细胞
Porcine Kidney-15细胞系相关产品:PLA801C细胞、LS-1034细胞、8305C_1细胞
10RGB细胞系相关产品:OCM1A细胞、TKB-1细胞、CEM-T4细胞
K562/ADR细胞系相关产品:LCMS细胞、PG-4细胞、HSC-I细胞
A-549细胞系相关产品:MDAMB468细胞、HCC1937细胞、P30-OHK细胞
细胞生长特性:悬浮
P388D1 Cell:小鼠淋巴样瘤细胞系
贴壁消化难题:1,先用PBS 把细胞洗两遍,使瓶内没有血清了,减少对胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在细胞有些消化下来时,拿着瓶口,运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体,这样细胞很快就下来了,还不需要吹打,分散也均匀;2,成团、絮状:消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象,血清可以终止胰酶的作用,如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清终止,如果消化液中加入了edta的话,就要将消化液倒干净,如果细胞贴壁要求不是很严格的话,一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基,加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性最强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势),随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验,则不能弃去胰酶),加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代,否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片);消化过度:马上用培养基中和,用吸管吹打细胞,收集全部的细胞到以无菌的离心管中800RPM 3分钟。弃上清,用全培重悬,换新的培养瓶继续培养,状态不好的细胞在培养的过程中会死亡脱落,在换液的时候可以清除掉!
细胞形态特性:详见细胞说明书
H345细胞系相关产品:NPC-TW039细胞、UMR106细胞、P3-X63-Ag8细胞
MCF.7细胞系相关产品:SKNEP1细胞、HCEC细胞、AGS细胞
Fetal Bovine Heart Endothelial细胞系相关产品:HT22细胞、U 266细胞、PLCPRF5细胞
SUM-149PT细胞系相关产品:AU 565细胞、LIM 1215细胞、HEYA8细胞
Hi5细胞系相关产品:JC细胞、SKCO1细胞、CEMx721.174.T2细胞
Plaepi 34细胞系相关产品:MDA PCa 2b细胞、NBL_S细胞、CA922细胞
b.End3细胞系相关产品:Calu 6细胞、C1498细胞、8305-C细胞
P388D1 Cell:小鼠淋巴样瘤细胞系
HIT T15细胞系相关产品:SuDHL 8细胞、DH82细胞、TCMK-1细胞
hEM15A细胞系相关产品:NCI-H2591细胞、U-251_MG细胞、M-14细胞
KGN细胞系相关产品:SO-RB50细胞、HS688AT细胞、SKCO1细胞
THC-8307细胞系相关产品:LS 123细胞、SW-403细胞、Medical Research Council cell strain-9细胞
COLO-16细胞系相关产品:OUMS27细胞、P3-X63-Ag8.653细胞、SW900细胞
NCI-H1568细胞系相关产品:MC26细胞、H2030细胞、D-283 Med细胞
NCIH196细胞系相关产品:YES 2细胞、AZ521细胞、ZR75-1细胞
SK-Mel 2细胞系相关产品:GMK,BSC-1细胞、YAC细胞、Tb 1 Lu细胞
BAC1.2F5细胞系相关产品:LAD-2细胞、HBVP细胞、VB细胞
SK-Hep1细胞系相关产品:Hepatoma 22细胞、YH细胞、Mink Lung细胞
HEK-293F细胞系相关产品:Jurkat E6细胞、FTC-133细胞、COLO 320DM细胞
Hs870T细胞系相关产品:JG细胞、NCI-H748细胞、SK-MEL-1细胞
UMNSAH-DF1细胞系相关产品:PC10细胞、BE(2)-M17细胞、CAL-12T细胞
MRC-V细胞系相关产品:Human Pancreatic Duct Epithelial细胞、HSC 3细胞、HO8910细胞
G402细胞系相关产品:MOLP2细胞、TE353.SK细胞、PANC403细胞
HEK293-A细胞系相关产品:UPCI:SCC154细胞、H-2170细胞、C-4-I细胞
HC11 Mammary Epithelium细胞系相关产品:F98细胞、H-1734细胞、4T1.2细胞
EOC-20细胞系相关产品:SU-DHL-10细胞、KYSE-30细胞、MTC-TT细胞
COLO320/DM细胞系相关产品:Pro-Lec1.3C细胞、Jurkat-FHCRC细胞、GOTO细胞
THP-1细胞系相关产品:OVCAR420细胞、P388-D1细胞、High Five细胞
QBC(939)细胞系相关产品:HSC(Human Schwann)细胞、ARPE-19细胞、MuM-2C细胞
PLC-PRF-5细胞系相关产品:NCIH345细胞、DU 4475细胞、207细胞
Hk-2细胞系相关产品:B5537SKIN细胞、BT20细胞、PC-10细胞
RC-K8细胞系相关产品:HEK293-FT细胞、Molm 14细胞、KLN205细胞
Wistar Institute-38细胞系相关产品:PK(15)细胞、WM115细胞、PC 61-5-3细胞
Henrietta Lacks cells细胞系相关产品:IM 9细胞、OVHM细胞、MOLT16细胞
NCIH1944细胞系相关产品:KMM1细胞、H295R-S1细胞、HCC9204细胞
HME-1细胞系相关产品:ACT-1细胞、GM02219C细胞、MIHA细胞
THP-1(ATCC)细胞系相关产品:J.E6-1细胞、BLO-11细胞、Vero 76细胞
Hs_578t细胞系相关产品:NOZC-1细胞、MILE SVEN 1细胞、NCIH1876细胞
BE2-M17细胞系相关产品:COLO680N细胞、CDC/EU.HMEC-1细胞、SW1222细胞
A1847细胞系相关产品:NCI-H345细胞、NCI-H647细胞、P-2003细胞
RS4-11细胞系相关产品:H1688细胞、H-292细胞、C-643细胞
U-2932细胞系相关产品:Hs 839.T细胞、P3HR1细胞、NRK52E细胞
1301细胞系相关产品:L cell line细胞、CoCL2细胞、PSN-1细胞
NCIH1755细胞系相关产品:FET细胞、RGM-1细胞、MILE SVEN1细胞
NCI-SNU-620细胞系相关产品:NCI-441细胞、MKN 28细胞、MHCC97-L细胞
HPAF/CD18细胞系相关产品:MUS-M1细胞、PANC 813细胞、BSC-40细胞
Dx5细胞系相关产品:NCI-UMC-11细胞、Saos2细胞、GT39细胞
C4-2 Bone metastatic细胞系相关产品:H-82细胞、SW-527细胞、NBL-7细胞
COR L279细胞系相关产品:LAN-1细胞、BLO 11细胞、MDA-157细胞
H9c2细胞系相关产品:DU_145细胞、HOS(TE85)细胞、FOX-NY细胞
RCC-4细胞系相关产品:A549细胞、KPL1细胞、COLO 320 HSR细胞
P388D1 Cell:小鼠淋巴样瘤细胞系
OP-9细胞系相关产品:MADB-106细胞、RERF-LCMS细胞、Y3-Ag1.2.3细胞
IHH-4细胞系相关产品:PE CA PJ34细胞、CEM-C1细胞、L 132细胞
DU 145细胞系相关产品:Fetal Human Lens-124细胞、McA-RH 8994细胞、U118-MG细胞
HCGC细胞系相关产品:BC3H-1细胞、PG-BE1细胞、OCUM-1细胞
CEMO-1细胞系相关产品:HCC-1395细胞、MADB 106细胞、NUGC-3细胞
HNE-3细胞系相关产品:SK ES 01细胞、SK 1细胞、HOS-MNNG细胞
D10细胞系相关产品:HDLM2细胞、ACC-2细胞、AAV293细胞
6-T CEM细胞系相关产品:1.1B4细胞、TR146细胞、Walker256细胞
LM-TK-细胞系相关产品:RPTC细胞、ID8细胞、GC-2spd(ts)细胞
NTera 2/cl.D1细胞系相关产品:H-1155细胞、OVCAR432细胞、ssMCF-7细胞
TC-1[JHU-1]细胞系相关产品:OCI/AML5细胞、BEL/FU细胞、MLA 144细胞
SCC 15细胞系相关产品:VeroC1008细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436细胞、LED-WiDr细胞
"