"6T-CEM Cell:人T细胞白血病细胞系
细胞形态:淋巴母细胞样
细胞生长:悬浮
细胞背景资料:详见相关文献介绍
RN-c细胞系相关产品:BSC-1细胞、X63细胞、NTERA-2细胞
RMS13细胞系相关产品:WM115-mel细胞、P3 NS1 Ag4细胞、SP2细胞
PLA-802细胞系相关产品:BC-025细胞、H1930细胞、SK-ChA1细胞
L5178Y TK+/-3.7.2c细胞系相关产品:293S细胞、A375mel细胞、H4IIEC3细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
6T-CEM Cell:人T细胞白血病细胞系
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系,大部分的细胞都是要成片生长的,尤其是对于贴壁细胞,单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话,传代后细胞是不能贴壁的,这样抱团的细胞就会死亡。所以,消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态,这个啊是非常考究你的功夫的!细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个,因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开,受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊,这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来,又不能太过,一吹就整片脱落,要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-2细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到70%左右的时候就要传代了,一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞,你在洗的时候如果是用无血清1640去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样,用1640培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话,可以用PBS来洗,洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的,对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清,防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先,是很关键的一点。先补充这么多,还会后续更新。再补充一点:传代时PBS洗是很重要的一步,最近发现,用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置10-15分钟,有些需要更长的时间,等到细胞一个个分离开来的时候,就可以直接吹打下来,但是和胰酶消化一样,要控制好时间,不能时间太过了,要不然损伤细胞,细胞不容易成活,状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候,或者临时没有胰酶了,可以选用此方法。不过一定要试试,看是否适合你的细胞。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2传代
培养细胞真的不难,最关键几点:1)所有的东西使用,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,最近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
A-20细胞系相关产品:EFM192A细胞、NPA 87细胞、SN4741细胞
Astrocyte type I clone细胞系相关产品:NCI-SNU-1细胞、H2.35细胞、SHI1细胞
DAKIKI Clone 1细胞系相关产品:A-431细胞、766T细胞、LLC-MK-2细胞
TSUpr1细胞系相关产品:SNU761细胞、UCLA NPA871细胞、KG1细胞
PC3M-1E8细胞系相关产品:CEMx721.174.T2细胞、MC3T3-E1 Subclone 4细胞、Hs839.T细胞
细胞生长特性:贴壁生长
6T-CEM Cell:人T细胞白血病细胞系
细胞复苏相关注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。4.离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞形态特性:详见细胞说明书
TE3细胞系相关产品:HT 1376细胞、NCI-H1650细胞、GL-261细胞
QGY-7701细胞系相关产品:CMT 93细胞、CAL 12T细胞、U20S细胞
UCLA-SO-M21细胞系相关产品:NK92MI细胞、STO细胞、MV-3细胞
Sp2/mIL-6细胞系相关产品:MDAPCa2b细胞、WM239A细胞、UCLA RO-81-A-1细胞
GA-10 (Clone 4)细胞系相关产品:JM细胞、CEM细胞、KMY1022细胞
CG-4细胞系相关产品:Panc 4.03细胞、K562/ADP细胞、H647ell细胞
451Lu细胞系相关产品:NS1-1 Ag4.1细胞、RPMI No. 1846细胞、HCa/16A3-F细胞
6T-CEM Cell:人T细胞白血病细胞系
AHH-1细胞系相关产品:Be Wo细胞、3T6-Swiss albino细胞、WEHI231细胞
MCF10-A细胞系相关产品:ME-1 [Human leukemia]细胞、SNU387细胞、SNU251细胞
PANC0327细胞系相关产品:3T3 L1细胞、EU-2细胞、Granta-519细胞
3T3-A31细胞系相关产品:RBE细胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50细胞、SupB15WT细胞
H-520细胞系相关产品:QGP-1细胞、UPCI-SCC090细胞、CPAE细胞
HAPI细胞系相关产品:ARO细胞、H1944细胞、NCIH2227细胞
NCI-H650细胞系相关产品:SK 1细胞、COLO394细胞、Hs 600.T细胞
MonoMac1细胞系相关产品:HSC-3细胞、95C细胞、C38细胞
SUM52PE细胞系相关产品:AtT-20细胞、451Lu细胞、JM1细胞
SUM52PE细胞系相关产品:AtT-20细胞、451Lu细胞、JM1细胞
RIN-m 14B细胞系相关产品:SW-1783细胞、SHG44细胞、SupB15W细胞
JM1细胞系相关产品:MG-HU-3细胞、MOLT 4细胞、S3-HeLa细胞
L615细胞系相关产品:GM02132C细胞、KOSC-2细胞、Earles's cells细胞
Mc Coy细胞系相关产品:FHs74 Int细胞、526细胞、KASUMI1细胞
A549 ATCC细胞系相关产品:ECC1细胞、NCI-H2023细胞、NCIH2122细胞
A704细胞系相关产品:VP229细胞、HFLS细胞、Hs606细胞
CZ-1细胞系相关产品:ST细胞、EFO-27细胞、HMC细胞
NCIH69细胞系相关产品:RD 2细胞、H-1963细胞、ASPC1细胞
NCI-H1299细胞系相关产品:COR-L23细胞、Madison 109细胞、C643细胞
H1672细胞系相关产品:MIHA细胞、H-1437细胞、HS-695T细胞
Sp2/mIL-6细胞系相关产品:MDAPCa2b细胞、WM239A细胞、UCLA RO-81-A-1细胞
SU-DHL-6细胞系相关产品:SL-1细胞、H2227细胞、B-CPAP细胞
SU86.86细胞系相关产品:NT2D1细胞、BIC细胞、H-1435细胞
HRCEC细胞系相关产品:Calu3细胞、McArdle RH-7777细胞、OCI-Ly 10细胞
H-446细胞系相关产品:U251-MG细胞、Hs 888.T细胞、A9(Hamprecht)细胞
RCC-10RGB细胞系相关产品:Caco-2细胞、HCC0038细胞、NHLF细胞
PL5细胞系相关产品:PSN-1细胞、JM-Jurkat细胞、SK-N-FI细胞
H2227细胞系相关产品:ARPE19细胞、TW01细胞、COLO 741细胞
ES2细胞系相关产品:OCI AML5细胞、ChaGo-K1细胞、32D/cl3细胞
HSC-6细胞系相关产品:PC3M-2B4细胞、OVCAR.8细胞、Ca Ski细胞
SHG-44细胞系相关产品:H4细胞、A253细胞、SF295细胞
GM04154细胞系相关产品:NE-1细胞、PC9细胞、CEL细胞
JM1细胞系相关产品:MG-HU-3细胞、MOLT 4细胞、S3-HeLa细胞
HCC-70细胞系相关产品:Swiss/3T3细胞、HBL100细胞、C8D1A细胞
BJAB细胞系相关产品:COLO 320 DM细胞、SK-N-BE(2)-M17细胞、tdott细胞
COLO201细胞系相关产品:Duke University 4475细胞、BC-PAP细胞、Karpas422细胞
MM1S细胞系相关产品:L-1210细胞、FAT细胞、B5537SKIN细胞
B16/F1细胞系相关产品:H345细胞、HEK293E细胞、NCIH1648细胞
WPE-int细胞系相关产品:HCC-2108细胞、DMS-53细胞、BIC细胞
MDAPC2B细胞系相关产品:M07e细胞、H2106细胞、SF539细胞
HEC251细胞系相关产品:CL1-0细胞、IHH4细胞、MDA453细胞
U373 MG细胞系相关产品:D-341细胞、NUGC-4细胞、H-1395细胞
OCI-AML-4细胞系相关产品:SK-N-DZ细胞、MC9细胞、SW 837细胞
6T-CEM Cell:人T细胞白血病细胞系
AG06814-J细胞系相关产品:BAC1.2F5细胞、Pt K2细胞、LWnt-3A细胞
SK-MEL-MeWo细胞系相关产品:SP2-0-Ag14细胞、Ly8细胞、NEC细胞
Raji细胞系相关产品:VAESBJ细胞、Hs737T细胞、HGC-27细胞
PC-3M-2B4细胞系相关产品:GBC-SD细胞、HUT125细胞、Jurkat77细胞
U-hth74细胞系相关产品:MEL-526细胞、HuT-78细胞、P3HR1细胞
SKMEL24细胞系相关产品:32D clone 3细胞、UMNSAH/DF-1细胞、RGC6细胞
RBSMC细胞系相关产品:LNCaP-C4-2细胞、MDA MB231细胞、HFT 8810细胞
BIC-1细胞系相关产品:BALB/c 3T3 clone A31细胞、SW-756细胞、ONS76细胞
QGY-7701细胞系相关产品:CMT 93细胞、CAL 12T细胞、U20S细胞
GBC-SD细胞系相关产品:Alexander细胞、Hx-147细胞、PL5细胞
NS1/1-Ag4.1细胞系相关产品:JEG-3细胞、SW 839细胞、MCF-7ADR细胞
OCI-AML-3细胞系相关产品:HS-294T细胞、VM Cub 1细胞、SVGp12细胞
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