"J774 Cell:小鼠巨噬细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:巨噬细胞;BALB/c
ETCC-007细胞系相关产品:HEL-92-1-7细胞、UT-7细胞、HCC1187细胞
OCI/AML4细胞系相关产品:SK-N-BE-2c细胞、MPC11细胞、OCI/AML4细胞
SR786细胞系相关产品:NOR-10细胞、NCIH1944细胞、639-V细胞
SV40-MES13细胞系相关产品:KRC Y细胞、G519细胞、149 PT细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
J774 Cell:小鼠巨噬细胞系
细胞培养过程中相关问题总结:悬浮性细胞应如何继代处理?一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,可将培养角瓶口端稍微抬高,直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶,加入新鲜培养基稀释至适当浓度,重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来,其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞,其离心速率一般为300xg(约1,000rpm),5-10分钟,过高之转速,将造成细胞死亡;细胞之接种密度为何?依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因;细胞冷冻培养基之成份为何?动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意:由于DMSO稀释时会放出大量热能,故不可将DMSO直接加入细胞液中,必须使用前先行配制完成;DMSO之等级和无菌过滤之方式为何?冷冻保存使用之DMSO等级,必须为Tissue culture grade之DMSO,其本身即为无菌状况,次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中,保存于4°C,避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质,并可减少污染之机会。若要过滤DMSO,则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜;冷冻保存细胞之方法?冷冻保存方法一:冷冻管置于4°C 30~60分钟→ (-20°C 30分钟)→-80°C 16~18小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase长期储存。-20°C不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;细胞欲冷冻保存时,细胞冷冻管内应有多少细胞浓度?冷冻管内细胞数目一般为1x10(6)cells/ml vial,融合瘤细胞则以5x10(6)cells/ml vial为宜;应如何避免细胞污染?细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法;如果细胞发生微生物污染时,应如何处理?直接灭菌后丢弃之。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
造成实验室细胞污染常见情况总结:细胞培养中最常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染,大多数较难处理。那么,哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢?我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】1)为节省时间,有人已经用超净台四个多小时,不开紫外灭菌30min,酒精擦拭后直接开始试验;2)器材或者溶液很久没用,未检测是否污染而直接使用;离心管多次使用,枪头为了方便交叉使用;3)超净台不点酒精灯;点了酒精灯放在右上角,而你在左下角做试验;4)不带手套,徒手操作;5)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋,未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具,如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需121°C高压灭菌20分钟后37%烤干备用)。超净台和桌面,东西太多太乱:超净台不是储物箱,什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台!这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面,切忌东西堆积如山,不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞!一不小心“飘”进你的细胞培养板里,细胞就会养的不好,啥时候死了都不知道!【培养箱太久没清洁】细胞污染了,并非直接扔了培养皿就不管了,首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染,如果有而且好几个板子都有类似的污染块,那很可能是培养箱中的水或者空气污染了,得给培养箱做个大扫除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水没了要记得加,还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂,难管理】在传代细胞这种卫生要求高,人多了,不确定因素多了,难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室,实验服当风衣穿,不扣纽扣,不戴,就容易造成细胞污染;超净台做实验时,喜欢说话聊着做试验,要是还不带口罩,里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢!
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
PL5细胞系相关产品:PSN-1细胞、JM-Jurkat细胞、SK-N-FI细胞
KYSE 180细胞系相关产品:H2108细胞、OVCAR-8细胞、SBC-3细胞
NCI-H1563细胞系相关产品:HO-8910PM细胞、U87MG细胞、FHCRC-11细胞
PC 61细胞系相关产品:CCF-STTG1细胞、Huh-7细胞、H-524细胞
Japanese Tissue Culture-28细胞系相关产品:HuH-28细胞、Pa18C细胞、Molm14细胞
细胞生长特性:贴壁
J774 Cell:小鼠巨噬细胞系
贴壁细胞的消化方法介绍:1、胰酶。这是用得最多的。一般浓度在0.25-0.5%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大,从几分钟到几十分钟不等。0.25%的胰酶作用于单层贴壁的细胞,在37度条件下,一般消化1-5分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含、镁的平衡液,否则影响活性。保存于-20度。2、胶原酶。这种方法比较少,一般是用原代培养时,从组织消化下细胞。这种方法作用温和,对细胞损伤较小,但是,价格也较贵。中止同样是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般浓度在0.02%左右。作用于细胞与间质,对细胞间也有一定作用。注意,它能显著影响pH值,而且在弱碱性条件下才易溶。因此,配制时应调节好酸碱度。它不能被终和。因此,消化下来的细胞要洗一遍。4、商品化的无酶消化液。个人的使用经常觉得对细胞的损伤比较大,但是分离成单细胞悬液的能力确实比较强。5、物理法。直接吹打或用细胞刮子将细胞刮下来。6、冷冻法。此方法仅能用于细胞传代时。无法使组织上的细胞脱落下来。本方法的原理,我想是因细胞冷冻后收缩,从而从培养瓶上脱落下来。优点是:对细胞损伤小,不需要中止或洗细胞,方便,不需要另外配制消化液。特别适用那些贴壁不是特别紧,又特别娇气的细胞。不足是细胞常成小片脱落。此种方法曾用于因用其它方法传代导致大量细胞死亡操作的间充质干细胞、DC细胞的培养,效果非常满意。具体过程是:1、用较多的4度的PBS 洗涤一遍细胞(以6孔板为例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,静置操作台上,很快细胞就小片脱落,3、轻轻吹打,细胞即完全脱落,4、按一定比例传代。
细胞形态特性:详见细胞说明书
BT细胞系相关产品:OCI-Ly 19细胞、SHP-77细胞、SCC25细胞
RMS13细胞系相关产品:WM115-mel细胞、P3 NS1 Ag4细胞、SP2细胞
CCC-HPF-1细胞系相关产品:rHSC-99细胞、COLO-205细胞、U138-MG细胞
TE5细胞系相关产品:MN-9D细胞、NCI-H2066细胞、TE-5细胞
NCIH1944细胞系相关产品:KMM1细胞、H295R-S1细胞、HCC9204细胞
SBC-3细胞系相关产品:HCC4006细胞、NCIH716细胞、RM-1细胞
Human Embryonic Kidney 293细胞系相关产品:My-La 2059细胞、NKL细胞、NKL细胞
J774 Cell:小鼠巨噬细胞系
Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2细胞系相关产品:NFHIOSE-29细胞、A 2058细胞、H-2347细胞
NCTC 1469细胞系相关产品:WiDrTC细胞、Rat Glomerular Endothelial细胞、HCC-1171细胞
Opossum Kidney细胞系相关产品:SK RC 52细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1细胞、NHA细胞
HOS-MNNG细胞系相关产品:GB1细胞、HUC细胞、H187细胞
Mv.1.Lu细胞系相关产品:YAC细胞、BC-027细胞、LICCF细胞
KOPN8细胞系相关产品:HCC 94细胞、OE-19细胞、BS-C-1细胞
NCI-H1793细胞系相关产品:Sol8细胞、Colo-678细胞、H-2135细胞
Vero 76细胞系相关产品:SK-N-BE(1)细胞、HM细胞、PG-4 S+L-细胞
VSC4.1细胞系相关产品:UCH-1细胞、KE-37细胞、118 MG细胞
VSC4.1细胞系相关产品:UCH-1细胞、KE-37细胞、118 MG细胞
BLO 11细胞系相关产品:COR-L105细胞、HEK-2细胞、MKN28细胞
H1650细胞系相关产品:H2171细胞、PLB-985细胞、HCCLM6细胞
B16细胞系相关产品:Panc-08.13细胞、CCD33Co细胞、Panc-8_13细胞
LC1-Sq细胞系相关产品:SCI1细胞、NBL-2细胞、Pa17C细胞
HNE-2细胞系相关产品:KOPN-8细胞、CL1.0细胞、Hepa 1-6细胞
HEL-299细胞系相关产品:EoL-1细胞、TE3A细胞、NCIH810细胞
EFM-192A细胞系相关产品:H524细胞、Anip 973细胞、Mv1Lu细胞
DoTc2 4510细胞系相关产品:COLO201细胞、SACC-83细胞、T-47-D细胞
GTL16细胞系相关产品:NCI-H1184细胞、H-1341细胞、MBVP细胞
UCLA-SO-M14细胞系相关产品:C22细胞、NCIH1563细胞、MLE 12细胞
SUM 190PT细胞系相关产品:LS174T细胞、HeLaS3细胞、NE-1细胞
SCL-1细胞系相关产品:MDA-MB-175-VII细胞、SO-RB50细胞、NCI-H1581细胞
NCIH2405细胞系相关产品:H-865细胞、SHG 44细胞、143TK-细胞
H292细胞系相关产品:SNU620细胞、BALB/3T3 clone A31细胞、NCI-H157细胞
NCI-H1435细胞系相关产品:Rat-1细胞、MHCC97L细胞、NCI-H1668细胞
JEKO细胞系相关产品:H-520细胞、NCIH1975细胞、33604细胞
OS-RC-2细胞系相关产品:NUGC2细胞、SF-767细胞、3T6细胞
mRTEC细胞系相关产品:MOLM-14细胞、MES13细胞、LL2细胞
HO1N1细胞系相关产品:Case 3细胞、Clone M-3细胞、VMM5A细胞
T-T细胞系相关产品:CWR22-Rv1细胞、32D clone3细胞、SBC-5细胞
D341MD细胞系相关产品:SHI-1细胞、Verda reno细胞、COLO-320-HSR细胞
BT474细胞系相关产品:H-727细胞、McA-RH8994细胞、MS-751细胞
EFM-192A细胞系相关产品:H524细胞、Anip 973细胞、Mv1Lu细胞
OCI-LY-1细胞系相关产品:Hs 445细胞、L6细胞、SMMC7721细胞
CHO-K1细胞系相关产品:V 79细胞、MCF 7细胞、NCI-HUT-69细胞
Ly8细胞系相关产品:Vx-2细胞、LU451细胞、CWR22-Rv1细胞
H460细胞系相关产品:Karpas 299细胞、87MG细胞、MA 104细胞
HPAF-2细胞系相关产品:L Wnt-3A细胞、NCI-H2107细胞、HMC3细胞
KPL1细胞系相关产品:HS-940-T细胞、C2BBe1细胞、MV 3细胞
GC-2spd(ts)细胞系相关产品:Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2细胞、TMD8细胞、SKNBE-1细胞
WERI-Rb1细胞系相关产品:GCT细胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6细胞、CAOV3细胞
P3/X63-Ag8细胞系相关产品:MHCC 97细胞、MOVAS细胞、HCC-366细胞
BEL-7405细胞系相关产品:H-1793细胞、OSKM-1细胞、Kit225/K6细胞
J774 Cell:小鼠巨噬细胞系
C8166细胞系相关产品:T 84细胞、Pa17C细胞、L-929细胞
NE-4C细胞系相关产品:PK-136细胞、rRMECs细胞、NuTu-19细胞
H-441细胞系相关产品:769-P细胞、OVCAR 5细胞、SUM-190PT细胞
BEND细胞系相关产品:SJ-Rh 30细胞、HBMEC细胞、MOLP-2细胞
SC细胞系相关产品:DU145细胞、HT 115细胞、H87细胞
P30 OHK细胞系相关产品:Ly1细胞、M-1细胞、SK-MEL-31细胞
C33A细胞系相关产品:NCIH1770细胞、HCC2157细胞、Chinese Hamster Ovary细胞
NCI-H1048细胞系相关产品:TE 85.T细胞、CMT 167细胞、RAG细胞
RA-FLSs细胞系相关产品:HCC0044细胞、ZR75-30细胞、L6细胞
293T/17细胞系相关产品:SU-DHL-16细胞、IPEC1细胞、H1693细胞
Colo205细胞系相关产品:KBM-7细胞、RAG细胞、MHCC 97细胞
PIEC细胞系相关产品:SK-SH-SY5Y细胞、EFM-192B细胞、NCI-H2108细胞
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