"RIN-m5F Cell:大鼠胰岛β细胞瘤细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:胰岛β细胞瘤;雄性;NEDH
Anglne细胞系相关产品:COC1/CDDP细胞、HO-8910 PM细胞、GM03573细胞
Bac1 2F5细胞系相关产品:X63Ag8.653细胞、PanC1细胞、Hu-P-T4细胞
RGC6细胞系相关产品:SF-295细胞、MFE 296细胞、KYSE 180细胞
NCIH1770细胞系相关产品:J45.01细胞、293 F细胞、Kasumi 1细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
RIN-m5F Cell:大鼠胰岛β细胞瘤细胞系
细胞消化过程总结:其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足够了,一般我加300ul。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候,比如tsDC细胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙状移动。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞冻存的步骤:1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为5×106~1×107/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具体要看培养的细胞类型来选择;3)将分装上述细胞悬液于2ml冻存管中,每管0.25ml。冻存管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数);4)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中,-80℃冰箱过夜。;如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后转到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,取出一只冻存管细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
J-774A.1细胞系相关产品:CEM-CCRF细胞、OCI-Ly 19细胞、PC12(高分化)细胞
NCI-H1836细胞系相关产品:GRSL细胞、WM 266-4细胞、Jurkat 77细胞
V-79细胞系相关产品:NCI-SNU-5细胞、H9细胞、SKM1细胞
GM02219D细胞系相关产品:RMa-bm细胞、WSU-DLCL2细胞、HFT8810细胞
H22细胞系相关产品:KYSE 70细胞、Y3Ag1.2.3细胞、Glioma 261细胞
细胞生长特性:贴壁
RIN-m5F Cell:大鼠胰岛β细胞瘤细胞系
细胞传代培养实验:体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代,以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞,并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后,由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭,将培养的细胞分散,从容器中取出,以1:2或1:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养,即为传代培养;细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间,与细胞世代或倍增不同。在一代中,细胞培增3~6次。细胞传代后,一般经过三个阶段:游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度,即细胞群的分裂相数/100个细胞。一般细胞分裂指数介于0.2%~0.5%,肿瘤细胞可达3~5%;细胞接种2~3天分裂增殖旺盛,是活力时期,称指数增生期(对数生长期),适宜进行各种试验。实验步骤:1.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出,在超净工作台中倒掉瓶内的培养液,加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜),静置5~10分钟。2.在倒置镜下观察被消化的细胞,如果细胞变圆,相互之间不再连接成片,这时应立即在超净台中将消化液倒掉,加入3~5ml新鲜培养液,吹打,制成细胞悬液。3.将细胞悬液吸出2ml左右,加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加3ml左右培养液,盖好瓶塞,送回二氧化碳培养箱中,继续进行培养。一般情况,传代后的细胞在2小时左右就能附着在培养瓶壁上,2~4天就可在瓶内形成单层,需要再次进行传代。
细胞形态特性:详见细胞说明书
MSTO-211 H细胞系相关产品:H-1666细胞、L5178Y-R细胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2细胞
G402细胞系相关产品:MOLP2细胞、TE353.SK细胞、PANC403细胞
Natural Killer-92细胞系相关产品:BrCL15细胞、BEL7405细胞、H-865细胞
Walker-256细胞系相关产品:AR4-IP细胞、HCC0366细胞、HEL-92_1_7细胞
CEM clone 7细胞系相关产品:NKM-1细胞、BTI-TN5B1-4细胞、SW-620细胞
KM.12细胞系相关产品:HFLS细胞、GM02131细胞、SK HEP 01细胞
ROS 17/28细胞系相关产品:A-427细胞、BpRcl细胞、Ly19细胞
RIN-m5F Cell:大鼠胰岛β细胞瘤细胞系
J774A.1细胞系相关产品:32D:cl3细胞、UCLA-SO-14细胞、U-138-MG细胞
hA549细胞系相关产品:MOLT16细胞、OVCA420细胞、Hs863T细胞
A172细胞系相关产品:OCI-Ly 8细胞、SN12C-PM6细胞、RPMI-7951细胞
Human Fetal Thymocyte-8810细胞系相关产品:HCC-1569细胞、H-69细胞、KATO III细胞
NCI-H2405细胞系相关产品:MDA-MB-134VI细胞、OV3121细胞、MHHCALL2细胞
HOP 92细胞系相关产品:WiDr/S细胞、624mel细胞、DI-TNC1细胞
HELF细胞系相关产品:BAR-T细胞、MBT-2细胞、CAL-120细胞
HL7702细胞系相关产品:HPAFII细胞、MCAEC细胞、H-1373细胞
H-2052细胞系相关产品:SUM149-PT细胞、SCL II细胞、Hs 863.T细胞
H-2052细胞系相关产品:SUM149-PT细胞、SCL II细胞、Hs 863.T细胞
LIM1215细胞系相关产品:HCC44细胞、HL60细胞、MDAMB468细胞
HTori 3细胞系相关产品:P3.653细胞、MEC1细胞、PGLH7细胞
Ishikawa细胞系相关产品:C166细胞、CCD19Lu细胞、SUM-102PT细胞
hTERT-RPE细胞系相关产品:NPA'87细胞、MEG-01细胞、Adeno-293细胞
CCD19-Lu细胞系相关产品:UCD-MLA-144细胞、NG 108-15细胞、AAV-293细胞
RPMI-8402细胞系相关产品:SuperTube细胞、ABE8.1/2细胞、HDMEC细胞
Ramos 2G6.4C10细胞系相关产品:NSI/1-Ag4-1细胞、Hx147细胞、no.11细胞
HCC1438细胞系相关产品:SK-N-BE-2细胞、OVCA-433细胞、A-673细胞
MDAMB175细胞系相关产品:FCCH1018细胞、Reuber H-35细胞、H292细胞
TE-1细胞系相关产品:OC316细胞、Sf-21细胞、HCC-1395细胞
BJA-B细胞系相关产品:Y3Ag1.2.3细胞、NE-1细胞、BC-020细胞
U-251MG细胞系相关产品:SW1116细胞、EC-GI-10细胞、P 3 HR 1细胞
IOSE-80细胞系相关产品:mouse Inner Medullary Collecting Duct-3细胞、LO2细胞、H1781细胞
brain-derived Endothelial cells.3细胞系相关产品:NH-6细胞、RPMI 7951细胞、OCI-Ly 3细胞
J-774A.1细胞系相关产品:CEM-CCRF细胞、OCI-Ly 19细胞、PC12(高分化)细胞
WEHI3细胞系相关产品:Hs294T细胞、RPMI-7951细胞、SGC7901/DDP细胞
Z310细胞系相关产品:NCI660细胞、NCI-H2122细胞、TE354.T细胞
HuH-1细胞系相关产品:NIH:OVCAR-8细胞、DHL10细胞、NCI-H2291细胞
H-865细胞系相关产品:Huh-7.5细胞、A20细胞、SKES-1细胞
OCI-Ly1细胞系相关产品:THPI细胞、Mahlavu细胞、HCC1500细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1细胞系相关产品:A375SM细胞、RL-95-2细胞、IB-RS-2细胞
HLEpiC细胞系相关产品:Tca8113细胞、AAV293细胞、DHL5细胞
Epstein-Barr-1细胞系相关产品:HIT T-15细胞、HCC1359细胞、MDCC-MSB-1细胞
GOTO细胞系相关产品:MTC-TT细胞、OV 1063细胞、KRC-Y细胞
OVCAR432细胞系相关产品:LU-65M细胞、Malme-3M细胞、H-2030细胞
NK92-MI细胞系相关产品:MPP 89细胞、CHP 126细胞、BRL3A细胞
KCL22S细胞系相关产品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞、SHG-44细胞、SK UT 1细胞
NCIH250细胞系相关产品:NCIH322细胞、8305-C细胞、SNU-761细胞
Hs 729细胞系相关产品:SK Hep1细胞、YES-2细胞、JB-6 Cl 30细胞
D324 Med细胞系相关产品:HFL细胞、FHCRC-11细胞、PANC0504细胞
Tn5 B1-4细胞系相关产品:CORL51细胞、UCLA-RO 81细胞、B-3细胞
L-WRN细胞系相关产品:LC-1细胞、NCIH1836细胞、CW-2细胞
SW-1463细胞系相关产品:HO1-N-1细胞、MCF.7细胞、BEAS2B细胞
RIN-m5F Cell:大鼠胰岛β细胞瘤细胞系
AML 12细胞系相关产品:Kit225 K6细胞、NCI-H1882细胞、NCIN87细胞
293-EBNA细胞系相关产品:Calf Pulmonary Artery Endothelial细胞、NRK49F细胞、CBRH-7919细胞
CHOK1细胞系相关产品:SKRC20细胞、R 1610细胞、KHYG-1细胞
SK.MEL.28细胞系相关产品:H-1770细胞、U-251细胞、Z138细胞
J82细胞系相关产品:Y1细胞、SW-480细胞、CAKI 1细胞
2B4-L细胞系相关产品:SKNF1细胞、Hs 343.T细胞、GM04680细胞
NCIH196细胞系相关产品:YES 2细胞、AZ521细胞、ZR75-1细胞
HBdSMC细胞系相关产品:SUM 52细胞、IHH细胞、H526细胞
CALU 1细胞系相关产品:GM00637I细胞、NCI H226细胞、Hs 695.T细胞
EB2细胞系相关产品:CX1细胞、786O细胞、NCIH524细胞
H-23细胞系相关产品:L 363细胞、SK-N-BE(2C)细胞、NCI-H187细胞
U266-B1细胞系相关产品:PANC0403细胞、Clone 166细胞、BJAB细胞
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