"EAC-E2G8 Cell:小鼠腹水瘤细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:腹水瘤
PT67细胞系相关产品:CWR22Rv1细胞、OCILY3细胞、CCD841CoN细胞
C32 [Human melanoma]细胞系相关产品:T/GHA-VSMC细胞、WC00097细胞、SCC-15细胞
H1385细胞系相关产品:MM.1S细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞、HeLa229细胞
Tb 1 Lu (NBL-12)细胞系相关产品:VMM-5A细胞、SU-DHL-2细胞、RASMCs细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
EAC-E2G8 Cell:小鼠腹水瘤细胞系
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系,大部分的细胞都是要成片生长的,尤其是对于贴壁细胞,单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话,传代后细胞是不能贴壁的,这样抱团的细胞就会死亡。所以,消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态,这个啊是非常考究你的功夫的!细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个,因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开,受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊,这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来,又不能太过,一吹就整片脱落,要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-2细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到70%左右的时候就要传代了,一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞,你在洗的时候如果是用无血清1640去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样,用1640培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话,可以用PBS来洗,洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的,对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清,防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先,是很关键的一点。先补充这么多,还会后续更新。再补充一点:传代时PBS洗是很重要的一步,最近发现,用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置10-15分钟,有些需要更长的时间,等到细胞一个个分离开来的时候,就可以直接吹打下来,但是和胰酶消化一样,要控制好时间,不能时间太过了,要不然损伤细胞,细胞不容易成活,状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候,或者临时没有胰酶了,可以选用此方法。不过一定要试试,看是否适合你的细胞。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
造成实验室细胞污染常见情况总结:细胞培养中最常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染,大多数较难处理。那么,哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢?我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】1)为节省时间,有人已经用超净台四个多小时,不开紫外灭菌30min,酒精擦拭后直接开始试验;2)器材或者溶液很久没用,未检测是否污染而直接使用;离心管多次使用,枪头为了方便交叉使用;3)超净台不点酒精灯;点了酒精灯放在右上角,而你在左下角做试验;4)不带手套,徒手操作;5)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋,未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具,如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需121°C高压灭菌20分钟后37%烤干备用)。超净台和桌面,东西太多太乱:超净台不是储物箱,什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台!这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面,切忌东西堆积如山,不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞!一不小心“飘”进你的细胞培养板里,细胞就会养的不好,啥时候死了都不知道!【培养箱太久没清洁】细胞污染了,并非直接扔了培养皿就不管了,首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染,如果有而且好几个板子都有类似的污染块,那很可能是培养箱中的水或者空气污染了,得给培养箱做个大扫除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水没了要记得加,还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂,难管理】在传代细胞这种卫生要求高,人多了,不确定因素多了,难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室,实验服当风衣穿,不扣纽扣,不戴,就容易造成细胞污染;超净台做实验时,喜欢说话聊着做试验,要是还不带口罩,里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢!
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
MESSA-DX5细胞系相关产品:GLC-15细胞、PLA801D细胞、OCI-AML2细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞系相关产品:RINm-5F细胞、3T3-Swiss albino细胞、EBC1细胞
MRMT-1细胞系相关产品:HOEC细胞、SNU-638细胞、CORL88细胞
ARPE19细胞系相关产品:Balb/3T3-4-Cl31细胞、U 937细胞、IM 9细胞
PTK-1细胞系相关产品:H2052细胞、CFPAC细胞、MuM-2B细胞
细胞生长特性:半贴壁
EAC-E2G8 Cell:小鼠腹水瘤细胞系
贴壁细胞的消化方法介绍:1、胰酶。这是用得最多的。一般浓度在0.25-0.5%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大,从几分钟到几十分钟不等。0.25%的胰酶作用于单层贴壁的细胞,在37度条件下,一般消化1-5分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含、镁的平衡液,否则影响活性。保存于-20度。2、胶原酶。这种方法比较少,一般是用原代培养时,从组织消化下细胞。这种方法作用温和,对细胞损伤较小,但是,价格也较贵。中止同样是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般浓度在0.02%左右。作用于细胞与间质,对细胞间也有一定作用。注意,它能显著影响pH值,而且在弱碱性条件下才易溶。因此,配制时应调节好酸碱度。它不能被终和。因此,消化下来的细胞要洗一遍。4、商品化的无酶消化液。个人的使用经常觉得对细胞的损伤比较大,但是分离成单细胞悬液的能力确实比较强。5、物理法。直接吹打或用细胞刮子将细胞刮下来。6、冷冻法。此方法仅能用于细胞传代时。无法使组织上的细胞脱落下来。本方法的原理,我想是因细胞冷冻后收缩,从而从培养瓶上脱落下来。优点是:对细胞损伤小,不需要中止或洗细胞,方便,不需要另外配制消化液。特别适用那些贴壁不是特别紧,又特别娇气的细胞。不足是细胞常成小片脱落。此种方法曾用于因用其它方法传代导致大量细胞死亡操作的间充质干细胞、DC细胞的培养,效果非常满意。具体过程是:1、用较多的4度的PBS 洗涤一遍细胞(以6孔板为例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,静置操作台上,很快细胞就小片脱落,3、轻轻吹打,细胞即完全脱落,4、按一定比例传代。
细胞形态特性:详见细胞说明书
Gejiu Lung Carcinoma-82细胞系相关产品:NCI-H1395细胞、87 MG细胞、OCILY-3细胞
MCF-12F细胞系相关产品:COLO-741细胞、FHL 124细胞、GRSL细胞
SUP-T1细胞系相关产品:N-2a细胞、A-431细胞、SN12C细胞
HTori3细胞系相关产品:GM637A细胞、MDA330细胞、P30/Ohkubo细胞
NK92-MI细胞系相关产品:MPP 89细胞、CHP 126细胞、BRL3A细胞
MNNG-HOS (Cl#5)细胞系相关产品:P31-FUJ细胞、HCGC细胞、Hi-5细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞系相关产品:RINm-5F细胞、3T3-Swiss albino细胞、EBC1细胞
EAC-E2G8 Cell:小鼠腹水瘤细胞系
RM1细胞系相关产品:NCIH208细胞、RAMSCs细胞、CFPAC-1细胞
GM17219细胞系相关产品:SUM159细胞、BT483细胞、Hs-852-T细胞
rHSC-99细胞系相关产品:624细胞、Onda 11细胞、Panc327细胞
CG-4细胞系相关产品:Panc 4.03细胞、K562/ADP细胞、H647ell细胞
P3.653细胞系相关产品:Ect1/E6E7细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2细胞、H446细胞
B95-8细胞系相关产品:TE 32.T细胞、CoC1细胞、118MG细胞
Sp 2/0-Ag 14细胞系相关产品:SHP77细胞、MC3T3E1细胞、MX1细胞
BSC40细胞系相关产品:J 82细胞、HCC-1599细胞、751-NA细胞
HUT 28细胞系相关产品:NCIH1666细胞、SNU-475细胞、MEG-01细胞
HUT 28细胞系相关产品:NCIH1666细胞、SNU-475细胞、MEG-01细胞
SNU1细胞系相关产品:K-1735细胞、SNU449细胞、MM-1S细胞
LLC-MK-2细胞系相关产品:A-9细胞、SN12CPM6细胞、NCI-H1734细胞
OCI/AML3细胞系相关产品:hRMECs细胞、Fetal Bovine Heart Endothelial细胞、PC.3细胞
CCD841CoTr细胞系相关产品:A-72细胞、MFM223细胞、U-343细胞
3T6-Swiss albino细胞系相关产品:PC-9/S1细胞、STC-1细胞、G361细胞
RPTEC TERT1细胞系相关产品:786O细胞、H2591细胞、CF PAC-1细胞
PCI:SG231细胞系相关产品:NCTC-1469细胞、NCI747细胞、A10细胞
Chinese Hamster Lung细胞系相关产品:H-1568细胞、PNT1-a细胞、COLO-320-DM细胞
SK-N-BE-2c细胞系相关产品:H-1915细胞、Human Foreskin Fibroblast细胞、ABC-1细胞
HEK-293-F细胞系相关产品:201T细胞、NCI-H1048细胞、STO细胞
T8细胞系相关产品:Lu-65细胞、SK-SH-SY5Y细胞、RCC23细胞
LLC1细胞系相关产品:JHH-7细胞、MDA-MB435细胞、JROECL33细胞
HEK AD293细胞系相关产品:P3-X63.Ag8.653细胞、C918细胞、SF-767细胞
S180细胞系相关产品:SK-N-BE(2)细胞、HT clone H9细胞、NCI-H1975细胞
H-1975细胞系相关产品:SK-MEL-28细胞、U-343-MG细胞、PT67细胞
RH-30细胞系相关产品:IAR-20细胞、SK-N-BE2C细胞、CMT 93细胞
MCF-12A细胞系相关产品:LSC-1细胞、SKHEP-1细胞、EB-2细胞
H-1876细胞系相关产品:DHL-6细胞、SNU-182细胞、AML-193细胞
MC-4细胞系相关产品:SUIT2细胞、PTK-2细胞、CAL-85-1细胞
YD-38细胞系相关产品:H64细胞、293-FT细胞、MS 751细胞
MBT2细胞系相关产品:PC-9/GR细胞、M-14细胞、MHCC97H细胞
Walker256-TC细胞系相关产品:WM239细胞、SW-954细胞、HN4细胞
SJRH-30细胞系相关产品:MC3T3-E1 Subclone 14细胞、746T细胞、SuDHL 4细胞
Spodoptera frugiperda clone 9细胞系相关产品:IPLB-Sf21细胞、VP 267细胞、KBM5细胞
SKML-28细胞系相关产品:CT26.CL25细胞、TE32细胞、PG13细胞
L(TK-)细胞系相关产品:MC57G细胞、SUNE-1细胞、RKO-AS-45-1细胞
SuDHL 10细胞系相关产品:Madin-Darby Canine Kidney细胞、CATHa细胞、SK-MEL 28细胞
GM02219细胞系相关产品:KMY1022细胞、KP-2细胞、MDA 231-LM2-4175细胞
WM266-4细胞系相关产品:MeT 5A细胞、OUMS23细胞、SGC7901细胞
TE15细胞系相关产品:N-Tera-2细胞、PAEC细胞、4T1-LUC细胞
P3X63细胞系相关产品:GM3570细胞、L6565细胞、TE 354.T细胞
HCA7细胞系相关产品:CAKI1细胞、H128细胞、Hs-606-T细胞
MDA-134细胞系相关产品:CV1细胞、OACP4C细胞、LLC细胞
EAC-E2G8 Cell:小鼠腹水瘤细胞系
WEHI3B细胞系相关产品:OS-732细胞、HepG2/C3A细胞、Madison细胞
NCIH209细胞系相关产品:LA-N-5细胞、Capan 1细胞、VE细胞
H-1755细胞系相关产品:NCIH2342细胞、COLO-680N细胞、OCI-AML-3细胞
Hs840T细胞系相关产品:BTI-Tn5B14细胞、NCI H548细胞、HT-55细胞
alpha-TC1-6细胞系相关产品:SW-527细胞、CTV-1细胞、SLK细胞
THP1细胞系相关产品:HBVP细胞、WM115-mel细胞、MUTZ3细胞
NCIH1437细胞系相关产品:H1385细胞、Madison lung细胞、PL11细胞
COLO 678细胞系相关产品:OVCA-432细胞、NCIH295R细胞、Panc-1-P细胞
BrCL18细胞系相关产品:MUTZ3细胞、SKMEL-2细胞、VK-2/E6E7细胞
CF Pac1细胞系相关产品:bEND.3细胞、32D-Cl3细胞、HCC-1588细胞
EOC 20细胞系相关产品:SK-N-BE(1)n细胞、HRMC细胞、CORL23细胞
mIMCD-3细胞系相关产品:NIH:OVCAR4细胞、APRE-19细胞、Hs819.T细胞
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