"HCC2185 Cell:人乳腺转移性小叶癌细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:转移性小叶乳腺癌;胸腔积液转移;女性
HuH-6细胞系相关产品:CEM-C7细胞、4-1st细胞、M-1 myeloid leukemia细胞
H2286细胞系相关产品:KU-812F细胞、MUVEC细胞、SuDHL 8细胞
P3-X63-Ag 8.653细胞系相关产品:NCIH1618细胞、NBLS细胞、TGW细胞
NCIH1618细胞系相关产品:CFSC-2G细胞、LAN1细胞、KP-N-YN细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
HCC2185 Cell:人乳腺转移性小叶癌细胞系
细胞培养过程中相关问题总结:悬浮性细胞应如何继代处理?一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,可将培养角瓶口端稍微抬高,直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶,加入新鲜培养基稀释至适当浓度,重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来,其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞,其离心速率一般为300xg(约1,000rpm),5-10分钟,过高之转速,将造成细胞死亡;细胞之接种密度为何?依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因;细胞冷冻培养基之成份为何?动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意:由于DMSO稀释时会放出大量热能,故不可将DMSO直接加入细胞液中,必须使用前先行配制完成;DMSO之等级和无菌过滤之方式为何?冷冻保存使用之DMSO等级,必须为Tissue culture grade之DMSO,其本身即为无菌状况,次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中,保存于4°C,避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质,并可减少污染之机会。若要过滤DMSO,则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜;冷冻保存细胞之方法?冷冻保存方法一:冷冻管置于4°C 30~60分钟→ (-20°C 30分钟)→-80°C 16~18小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase长期储存。-20°C不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;细胞欲冷冻保存时,细胞冷冻管内应有多少细胞浓度?冷冻管内细胞数目一般为1x10(6)cells/ml vial,融合瘤细胞则以5x10(6)cells/ml vial为宜;应如何避免细胞污染?细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法;如果细胞发生微生物污染时,应如何处理?直接灭菌后丢弃之。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
培养细胞真的不难,最关键几点:1)所有的东西使用,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,最近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HA细胞系相关产品:HOS/MNNG细胞、UCW 100细胞、SCC VII细胞
Ramos细胞系相关产品:CAL51细胞、PC-9细胞、C32 mel细胞
HOC1细胞系相关产品:LIXC-002细胞、H1092细胞、OVCA420细胞
L-6 myoblast细胞系相关产品:P30-OHKUBO细胞、SKCO-1细胞、TALL-104细胞
MUGCHOR1细胞系相关产品:no.11细胞、HCCC-9810细胞、WIL2S细胞
细胞生长特性:贴壁
HCC2185 Cell:人乳腺转移性小叶癌细胞系
细胞复苏相关注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。4.离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞形态特性:详见细胞说明书
H-1623细胞系相关产品:HOP-92细胞、Caki-2细胞、MFM-223细胞
CTLA4 Ig-24细胞系相关产品:LC-1-sq细胞、LC-2/ad细胞、253JB-V细胞
THP-1细胞系相关产品:OVCAR420细胞、P388-D1细胞、High Five细胞
751-NA细胞系相关产品:EFO27细胞、HeLa.S3细胞、138MG细胞
Psi-2 DAP细胞系相关产品:HFT 8810细胞、SJRH 30细胞、HCC1954 BL细胞
451-LU细胞系相关产品:U-138 MG细胞、LY-R细胞、HOP92细胞
MV4;11细胞系相关产品:Transformed Human Liver Epithelial-2细胞、LICR-HN6细胞、PA1细胞
HCC2185 Cell:人乳腺转移性小叶癌细胞系
HS578T细胞系相关产品:MDA-468细胞、EAhy 926细胞、LA-N-6(OAN)细胞
HO-8910细胞系相关产品:H2081细胞、LA-795细胞、SUM159PT细胞
NALM6细胞系相关产品:Ramos (RA)细胞、IPEC-J2细胞、CTV1细胞
UCLA-RO 81细胞系相关产品:M-14细胞、HTori:3细胞、MDA.MB.231细胞
SK-NEP-1细胞系相关产品:SCL II细胞、Dunn LM8细胞、COLO-829细胞
293-H细胞系相关产品:NCI/ADRRES细胞、SKNAS细胞、Vero E-6细胞
PL-5细胞系相关产品:CCRF-CEM细胞、UACC-893细胞、NTera2 cl.D1细胞
HFT-8810细胞系相关产品:NCI-H1155细胞、TJ905细胞、Capan2细胞
H-378细胞系相关产品:SW839细胞、NCI-H87细胞、Alpha Mouse Liver 12细胞
H-378细胞系相关产品:SW839细胞、NCI-H87细胞、Alpha Mouse Liver 12细胞
CZ-1细胞系相关产品:ST细胞、EFO-27细胞、HMC细胞
Colon26细胞系相关产品:ABE8.1/2细胞、TE 85.T细胞、BCECs细胞
CCD 841 CoN细胞系相关产品:SUD4细胞、DF-1细胞、GM05887A细胞
APRE-19细胞系相关产品:HuTu-80细胞、RAW2647细胞、OCI-LY-1细胞
AGS细胞系相关产品:Glioma 261细胞、B 95.8细胞、H-596细胞
Kit-225细胞系相关产品:PLC8024细胞、ST486细胞、NCIH209细胞
JROECL21细胞系相关产品:OsA-CL细胞、HCMEC(BL12-H)细胞、EBC-1/original细胞
NCIH716细胞系相关产品:GM03573A细胞、3D4/21细胞、AMJ2C8细胞
Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS细胞系相关产品:OCLY8细胞、HCC-15细胞、HPAF细胞
VMM5A细胞系相关产品:CX-1细胞、Fox/NY细胞、7860细胞
H3396细胞系相关产品:NCI-H1693细胞、KYSE 410细胞、WSU-DLCL(2)细胞
Ramos 2G6.4C10细胞系相关产品:NSI/1-Ag4-1细胞、Hx147细胞、no.11细胞
OEC33细胞系相关产品:ZR-75-1细胞、HPF细胞、Wien133细胞
MDA415细胞系相关产品:H2135细胞、A 375细胞、HPDLF细胞
DF1细胞系相关产品:MD Anderson-Metastatic Breast-468细胞、H838细胞、MC3T3-E1 Subclone 14细胞
NCC-IT细胞系相关产品:NCI-H2198细胞、MGHU1细胞、SUP-T1细胞
MDAMB415细胞系相关产品:293F细胞、SCL-I细胞、MDA436细胞
LL/2(LLc1)细胞系相关产品:CHL/IU细胞、MDA-MB-361细胞、SW 1463细胞
HEK-293H细胞系相关产品:SGC7901/DDP细胞、H1650_CO细胞、10T1/2细胞
MUGCHOR1细胞系相关产品:no.11细胞、HCCC-9810细胞、WIL2S细胞
PCI-04B细胞系相关产品:CAL 39细胞、SUM 190PT细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4细胞
AZ 521细胞系相关产品:A72细胞、H1651细胞、U-343-MG细胞
BEL/FU细胞系相关产品:KOSC-2 cl3-43细胞、HBL1细胞、RT-BM细胞
MDA-MB-134-VI细胞系相关产品:MDA-MB436细胞、TGW-nu细胞、RAOEC细胞
Human Epidermoid carcinoma #2细胞系相关产品:HCC1569细胞、NBL-4细胞、NS20Y细胞
HLEB3细胞系相关产品:McA-RH 7777细胞、2780CP细胞、NRK-52E细胞
HBE细胞系相关产品:NCI-446细胞、RL细胞、mIMCD3细胞
NCIH820细胞系相关产品:HBE细胞、SNU-668细胞、SKBr3细胞
HeLa S 3细胞系相关产品:YD-38细胞、C2BBe 1细胞、L-363细胞
N-87细胞系相关产品:108CC15细胞、Hs 895 T细胞、KYSE 520细胞
HCC 70细胞系相关产品:Nthy-ori 3-1细胞、SK-MEL28细胞、AC16 [Human hybrid]细胞
H-520细胞系相关产品:QGP-1细胞、UPCI-SCC090细胞、CPAE细胞
THC-8307细胞系相关产品:LS 123细胞、SW-403细胞、Medical Research Council cell strain-9细胞
HCC2185 Cell:人乳腺转移性小叶癌细胞系
Ca759细胞系相关产品:130T细胞、C3H10T1/2CL8细胞、OAC-P4C细胞
RPMI8226细胞系相关产品:TERT-RPE1细胞、PLA801-95C细胞、LIPF178C细胞
SW-756细胞系相关产品:CD-18细胞、H250细胞、PTK2细胞
U14细胞系相关产品:IFRS1细胞、DR2R 1610细胞、H-1838细胞
COLO 206细胞系相关产品:H-1650细胞、MC-3T3-E1细胞、HEC-1-A细胞
Hepa 1-6细胞系相关产品:H-2122细胞、UCH-1细胞、OCM1细胞
SK MEL 5细胞系相关产品:OVCA 420细胞、AKR细胞、Case 3细胞
SN12PM6细胞系相关产品:COLO679细胞、HeLa细胞、KYSE180细胞
CORL51细胞系相关产品:H1299细胞、CF Pac1细胞、Hs746-T细胞
HFE-145细胞系相关产品:VSMC细胞、H1876细胞、T 84细胞
Detroit-562细胞系相关产品:T98细胞、H-35 Reuber细胞、QGP-1细胞
High5细胞系相关产品:C2BBe 1细胞、CEF细胞、RetroPack PT67细胞
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