"BEP2D Cell:人永生化支气管上皮细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：支气管；上皮细胞；HPV１８转化
T98-G细胞系相关产品：H-28细胞、D341 Med细胞、OV1/P细胞
KYSE50细胞系相关产品：HMVEC细胞、OCI-Ly10细胞、EJ-1细胞
RL95细胞系相关产品：MMVECs细胞、P30/0HK细胞、OCI/AML-2细胞
EoL-1 cell细胞系相关产品：Hs746-T细胞、NGP细胞、143BTK-细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
BEP2D Cell:人永生化支气管上皮细胞系
细胞消化过程总结：其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足够消化细胞（绝大部分１min不到）。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备１００%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液（不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开）。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的（比如Calu-３细胞），吹打不超过２０次后（一般１０次即可），成小规模聚集（１０个细胞左右），是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打１h，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞（润洗方法５min还不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足够了，一般我加３００ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过５min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙状移动。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
培养细胞真的不难，最关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，最近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
OCI-Ly 3细胞系相关产品：32Dc3细胞、LA 4细胞、SR-786细胞
RBL2H3细胞系相关产品：b.End3细胞、NCTC 929细胞、NCI-SNU-449细胞
NCI-SNU-119细胞系相关产品：NRK clone 49F细胞、MDAMB134细胞、H-2172细胞
4T1.2细胞系相关产品：SHG-44细胞、143 B细胞、Colon26细胞
TOV112细胞系相关产品：SKHEP-1细胞、DU145细胞、Hs683细胞
细胞生长特性：贴壁
BEP2D Cell:人永生化支气管上皮细胞系
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞形态特性：详见细胞说明书
SKLMS-1细胞系相关产品：NTERA2D1细胞、ASPC1细胞、16-HBE14o细胞
HEK 293 c18细胞系相关产品：HBEpiC细胞、OVCAR 420细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2细胞
Z138细胞系相关产品：NCI-H520细胞、HeLa 229细胞、KATOIII细胞
NBL-3细胞系相关产品：RL952细胞、H-2085细胞、WSUDLCL2细胞
NCIH446细胞系相关产品：Medical University of Graz-Chordoma 1细胞、Ketr3细胞、HRA 19细胞
Chang liver细胞系相关产品：COS-7细胞、IB-RS2细胞、L-6TG细胞
HCC2185细胞系相关产品：BEL-7402细胞、CCD-33Co细胞、B16/F0细胞
BEP2D Cell:人永生化支气管上皮细胞系
TSU-Pr1细胞系相关产品：H1568细胞、COLO-829细胞、R.K.13细胞
HPMEC细胞系相关产品：Hela-mock细胞、GEO细胞、FAK+/+细胞
MCF7ADR细胞系相关产品：SNU-5细胞、A549ATCC细胞、BrCL12细胞
GM03671C细胞系相关产品：JTC-28细胞、MCF7ADR细胞、U-118 MG细胞
NCI-H1395细胞系相关产品：NCI-HUT-520细胞、MESSA细胞、H-748细胞
NCI660细胞系相关产品：87 MG细胞、NCI-H23细胞、MV 4;11细胞
TE-671细胞系相关产品：LM8细胞、P3/NS1/Ag4-1细胞、ROS 17/28细胞
PLA801-95C细胞系相关产品：NCI-HUT-292细胞、SK Mel 1细胞、H841细胞
FRhK-4细胞系相关产品：IEC-18细胞、EA hy 926细胞、WEHI-164细胞
FRhK-4细胞系相关产品：IEC-18细胞、EA hy 926细胞、WEHI-164细胞
NGP细胞系相关产品：CEM-C1细胞、K299细胞、MRC-9细胞
HeLa细胞系相关产品：Panc2_03细胞、SK-N-SH细胞、PC-9S1细胞
3AO细胞系相关产品：TH1细胞、H711细胞、RN细胞
CAMA1细胞系相关产品：HL-7702细胞、MX-1细胞、2V6.11细胞
MILE SVEN 1细胞系相关产品：AN3 CA细胞、Ha Fe细胞、GM04154细胞
CD-18细胞系相关产品：B16 melanoma F10细胞、NCIH1573细胞、RAEC细胞
NBLS细胞系相关产品：CEF细胞、RT-BM 1细胞、RK 13细胞
NCI-H358细胞系相关产品：OCI Ly3细胞、3T3F442A细胞、WPMY1细胞
SCH细胞系相关产品：SUP T1细胞、Metastatic Variant 522细胞、DoHH-2细胞
CMT 93细胞系相关产品：FaDu细胞、Hs445细胞、P3/NS-1细胞
H1666细胞系相关产品：Hs 888.Lu细胞、H-2122细胞、LA795细胞
CV-1.K细胞系相关产品：OVMANA细胞、Ku812F细胞、RH8994细胞
Panc-8_13细胞系相关产品：HUV-EC-C细胞、KMST6细胞、NCIH838细胞
AMO1细胞系相关产品：RKO-AS-45-1细胞、MHCC 97-L细胞、OPM2细胞
BPH1细胞系相关产品：U118MG细胞、MDA-MB-435-S细胞、Lewis lung carcinoma line 1细胞
Huh7.5.1细胞系相关产品：H716细胞、MM96L细胞、LoMeT-ccRcc细胞
Rh30细胞系相关产品：HT 115细胞、Ramos.G6.C10细胞、JM-Jurkat细胞
H2172细胞系相关产品：alphaTC clone 6细胞、Med 341细胞、MKN74细胞
WSU-DLCL2细胞系相关产品：RL-95-2细胞、MIO-M1细胞、CEM/C1细胞
Oka-C1细胞系相关产品：H-719细胞、NCI-H322细胞、HHFK细胞
3-LL细胞系相关产品：CCD 966 SK细胞、SRS-82细胞、SW-954细胞
HEL-299细胞系相关产品：EoL-1细胞、TE3A细胞、NCIH810细胞
SBC3细胞系相关产品：L-M[TK-]细胞、RPE1细胞、WERI Rb-1细胞
KM933细胞系相关产品：Psi-2 DAP细胞、SK-Mel1细胞、BT549细胞
L-Wnt-3A细胞系相关产品：MC3T3-E细胞、A-172细胞、RPMI-1788细胞
SO-RB50细胞系相关产品：U118-MG细胞、NP69SV40T细胞、H-660细胞
SUIT2细胞系相关产品：rRMECs细胞、PG-4(S+L-)细胞、CHO Lec1细胞
WILL-2细胞系相关产品：Baby Hamster Kidney from litter No. 21细胞、BMF细胞、NCIH2172细胞
NFS 60细胞系相关产品：CHO细胞、NCI-SNU-761细胞、Malme3M细胞
BC-028细胞系相关产品：FHC细胞、H446细胞、IAR20细胞
ROS17/2.8细胞系相关产品：WERI细胞、HOS TE 85细胞、SKNAS细胞
CX-1细胞系相关产品：MIA-Pa-Ca-2细胞、BV-2细胞、GM03320细胞
A 72细胞系相关产品：AC29细胞、SW-579细胞、UPCISCC154细胞
BEP2D Cell:人永生化支气管上皮细胞系
Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS细胞系相关产品：OCLY8细胞、HCC-15细胞、HPAF细胞
MLE12细胞系相关产品：KATO 3细胞、Hs 606.T细胞、SK-ES1细胞
AG06814-M细胞系相关产品：J774 A.1细胞、SNU-761细胞、Walker/LLC-WRC256细胞
RAG细胞系相关产品：HFTF细胞、OSRC2细胞、CD18细胞
Hs940-T细胞系相关产品：NCI-H2228细胞、SNU-886细胞、DMS 79细胞
JB6 Cl 30-7b细胞系相关产品：T-ALL-1细胞、Jurkat-77细胞、NCI-H2030细胞
SCCVII/St细胞系相关产品：Panc-327细胞、LNCaP-ATCC细胞、LS 180细胞
SK_N_BE2C细胞系相关产品：MSTO-211 H细胞、NCI-H865细胞、NCIH2126细胞
Mv 1 Lu细胞系相关产品：Sf-21细胞、C4-1细胞、RL-65细胞
COLO 684细胞系相关产品：NCI-SNU-620细胞、AtT-20细胞、SKMEL2细胞
RGC-6细胞系相关产品：RPMI7666细胞、RKO-AS45-1细胞、RCC10 RGB细胞
MDAPC2B细胞系相关产品：M07e细胞、R1800[RA]细胞、SuDHL 5细胞
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