"hTERT-HPNE Cell:人胰腺导管上皮细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：胰腺导管；HGNC-TERT转化；男性
HEK-293A细胞系相关产品：ECV-304细胞、U-373 MG细胞、KPL-4细胞
1.1B4细胞系相关产品：LN-18细胞、GM637A细胞、Human Kidney-2细胞
H19-7细胞系相关产品：GM07404细胞、OCI AML2细胞、SCL-II细胞
RGC-5细胞系相关产品：B16F0细胞、Human Epidermoid carcinoma #2细胞、A 72细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
hTERT-HPNE Cell:人胰腺导管上皮细胞系
细胞消化过程总结：其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足够消化细胞（绝大部分１min不到）。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备１００%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液（不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开）。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的（比如Calu-３细胞），吹打不超过２０次后（一般１０次即可），成小规模聚集（１０个细胞左右），是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打１h，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞（润洗方法５min还不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足够了，一般我加３００ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过５min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙状移动。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞冻存的步骤：１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为５×１０６～１×１０７/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具体要看培养的细胞类型来选择；３)将分装上述细胞悬液于２ml冻存管中，每管０.２５ml。冻存管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)；４)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中，-８０℃冰箱过夜。；如果有程序降温器(放在-８０℃冰箱过夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后转到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只冻存管细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
CL 1-5细胞系相关产品：PANC-1细胞、H-1563细胞、IBMF-7细胞
IPLB-Sf21细胞系相关产品：OV-2008细胞、HNTEC细胞、KYSE-510细胞
MCFs细胞系相关产品：HEK (AD293)细胞、PG-4 S+L-细胞、Ramos.G6.C10细胞
T84细胞系相关产品：A-2780细胞、KU 812细胞、GTL16细胞
P36细胞系相关产品：MGSMC细胞、NCIH2227细胞、NHDF细胞
细胞生长特性：贴壁
hTERT-HPNE Cell:人胰腺导管上皮细胞系
细胞传代培养实验：体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后，由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭，将培养的细胞分散，从容器中取出，以１:２或１:３以上的比率转移到另外的容器中进行培养，即为传代培养；细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间，与细胞世代或倍增不同。在一代中，细胞培增３～６次。细胞传代后，一般经过三个阶段：游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度，即细胞群的分裂相数/１００个细胞。一般细胞分裂指数介于０.２％～０.５％，肿瘤细胞可达３～５％；细胞接种２～３天分裂增殖旺盛，是活力时期，称指数增生期(对数生长期)，适宜进行各种试验。实验步骤：１.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出，在超净工作台中倒掉瓶内的培养液，加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜)，静置５～１０分钟。２.在倒置镜下观察被消化的细胞，如果细胞变圆，相互之间不再连接成片，这时应立即在超净台中将消化液倒掉，加入３～５ml新鲜培养液，吹打，制成细胞悬液。３.将细胞悬液吸出２ml左右，加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加３ml左右培养液，盖好瓶塞，送回二氧化碳培养箱中，继续进行培养。一般情况，传代后的细胞在２小时左右就能附着在培养瓶壁上，２～４天就可在瓶内形成单层，需要再次进行传代。
细胞形态特性：详见细胞说明书
NCI-H-82细胞系相关产品：BMDC细胞、HOS-TE85细胞、M619细胞
OCI-AML5细胞系相关产品：JURKAT E-6.1细胞、HCe-8693细胞、GM07404A细胞
U-2-OS细胞系相关产品：AM-38细胞、NCI-H2087细胞、SUM149-PT细胞
MNNG-HOS细胞系相关产品：OCI-LY-3细胞、GB1细胞、TMD-8细胞
Swiss 3T3细胞系相关产品：JROECL 19细胞、624细胞、HNE2细胞
MB 157细胞系相关产品：UPCI:SCC090细胞、Z-138细胞、Hepatoma 22细胞
OCI-Ly8细胞系相关产品：FRTL5细胞、LCMS细胞、NCI-H69细胞
hTERT-HPNE Cell:人胰腺导管上皮细胞系
LIXC002细胞系相关产品：OCI/AML4细胞、Becker细胞、PC2细胞
FRhK-4细胞系相关产品：IEC-18细胞、EA hy 926细胞、WEHI-164细胞
TE-15细胞系相关产品：MV4:11细胞、CHOS细胞、NCI-H820细胞
SNU1细胞系相关产品：K-1735细胞、SNU449细胞、MM-1S细胞
NCI-Hut 125细胞系相关产品：R1800[RA]细胞、NMCG-1细胞、Strain V细胞
HCC38细胞系相关产品：NCI-H2171细胞、Hs 766.T细胞、MGC803细胞
SKMEL-2细胞系相关产品：M-20细胞、GC-2spd(ts)细胞、BAC1.2F5细胞
M-1细胞系相关产品：HEEpiC细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415细胞、RPMI7951细胞
PC-10细胞系相关产品：NCI-HUT-69细胞、NCIH2591细胞、P3X63NS1细胞
PC-10细胞系相关产品：NCI-HUT-69细胞、NCIH2591细胞、P3X63NS1细胞
FHC细胞系相关产品：HELA-GFP细胞、T-24细胞、S91细胞
CA922细胞系相关产品：MOLT4细胞、Mv.1.Lu细胞、SK-N-SH细胞
H-1693细胞系相关产品：3 LL细胞、Hs 274细胞、IHH4细胞
NCI-H1355细胞系相关产品：NCI-H1618细胞、COLO-1细胞、T 24细胞
3T3J2细胞系相关产品：UMRC2细胞、CAL-39细胞、HEK-293-FT细胞
EC-9706细胞系相关产品：LTEP-s细胞、BaF3细胞、G292细胞
Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1细胞系相关产品：LIM 1215细胞、HMC-1细胞、HuH28细胞
Z-138细胞系相关产品：H838细胞、LNCaP-FGC细胞、D283 Med细胞
CL11细胞系相关产品：HuH6细胞、P3-X63.Ag8.653细胞、HL7702细胞
Karpas-422细胞系相关产品：Colon 38细胞、T.T细胞、Caco-2/ATCC细胞
Hs 729.T细胞系相关产品：H-820细胞、KYSE-50细胞、WM115mel细胞
UCLA RO-81-A-1细胞系相关产品：293 EBNA细胞、Molm 13细胞、SUDHL8细胞
SUM149-PT细胞系相关产品：MHCC-LM3细胞、Vero E-6细胞、NOMO-1细胞
Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS细胞系相关产品：OCLY8细胞、HCC-15细胞、HPAF细胞
HCC-1500细胞系相关产品：SKMES1细胞、Nb-2细胞、SW-1783细胞
VeroE6细胞系相关产品：HANK细胞、SF 767细胞、A-20细胞
HDF-a细胞系相关产品：MDA-330细胞、HCC-38细胞、MILE SVEN 1细胞
P3/NS-1细胞系相关产品：3LL细胞、SUM-102PT细胞、IPLB-Sf21细胞
RCM1细胞系相关产品：J-82细胞、RMS 1598细胞、Laboratory of Allergic Diseases 2细胞
Roswell Park Memorial Institute 8226细胞系相关产品：Clone Y1细胞、H-2087细胞、SRA 01/04细胞
TFH细胞系相关产品：RAW 264.7细胞、NU-GC-2细胞、OCILY-10细胞
NCIH23细胞系相关产品：mIMCD-3细胞、SUPM2细胞、U-118-MG细胞
CCC-HSF-1细胞系相关产品：McArdle RH-7777细胞、UMNSAH-DF-1细胞、2780细胞
WSU-DLCL(2)细胞系相关产品：MDCK细胞、V 79-4细胞、HCV 29细胞
HMC细胞系相关产品：CEM-CCRF (CAMR)细胞、624 MEL细胞、GM2132细胞
NPA 87细胞系相关产品：L-6TG细胞、32Dcl3细胞、Swiss 3T3细胞
ACC-3细胞系相关产品：4T1-LUC细胞、HRA 19细胞、SUM-149细胞
HUV-EC-C细胞系相关产品：B16/F0细胞、H1184细胞、H2444细胞
BetaTC6细胞系相关产品：NIH-OVCAR-3细胞、Hs895.T细胞、A-172细胞
GM03569B细胞系相关产品：NCI-H1819细胞、HCC1588细胞、MOLT 3细胞
CAL-12T细胞系相关产品：BEL-7404细胞、RF/6A细胞、NCI-HUT-292细胞
HAPI细胞系相关产品：ARO细胞、H1944细胞、NCIH2227细胞
COLO679细胞系相关产品：EPC细胞、Hs-940细胞、SCH细胞
hTERT-HPNE Cell:人胰腺导管上皮细胞系
Tj-905细胞系相关产品：GH 3细胞、COLO678细胞、mousepodocyte细胞
H-1436细胞系相关产品：PNT1/A细胞、SUM-52-PE细胞、Hca-F细胞
NCI N87细胞系相关产品：MGC-803细胞、MV4-11细胞、NCIH208细胞
JCA1细胞系相关产品：NCI-Hut 125细胞、Sp2/O细胞、H-64细胞
End1/E6E7细胞系相关产品：Vero E6细胞、HECCL-1细胞、H1869细胞
LU-65M细胞系相关产品：OE19细胞、LL/2细胞、NCIH1436细胞
HEC251细胞系相关产品：CL1-0细胞、IHH4细胞、MDA453细胞
MDA-435细胞系相关产品：GA-10 (Clone 4)细胞、SK-RC-20细胞、F-36P细胞
SKNEP1细胞系相关产品：PG-LH7细胞、BV173细胞、HT3细胞
NW-MEL-38细胞系相关产品：LL/2(LLc1)细胞、D324 Med细胞、NCIH1944细胞
ECC1细胞系相关产品：MC3T3-E1 Subclone 24细胞、GM-3573细胞、DKMG细胞
HCE-2 [50.B1]细胞系相关产品：G-401细胞、RPMI 8402细胞、H1703细胞
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