"B35 Cell:大鼠神经母细胞瘤细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:神经母细胞瘤;BDIX
KBM7细胞系相关产品:C3A细胞、MDA-MB-231-luc细胞、HS-766-T细胞
Swiss/3T3细胞系相关产品:Human Fetal Thymocyte-8810细胞、LL/2 (LLC1)细胞、NCI-H2085细胞
RTE细胞系相关产品:ECC-1细胞、UACC 893细胞、H-250细胞
NTC-200细胞系相关产品:Panc-05.04细胞、MDAMB-231细胞、K7M2 wt细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
B35 Cell:大鼠神经母细胞瘤细胞系
细胞培养过程中相关问题总结:悬浮性细胞应如何继代处理?一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,可将培养角瓶口端稍微抬高,直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶,加入新鲜培养基稀释至适当浓度,重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来,其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞,其离心速率一般为300xg(约1,000rpm),5-10分钟,过高之转速,将造成细胞死亡;细胞之接种密度为何?依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因;细胞冷冻培养基之成份为何?动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意:由于DMSO稀释时会放出大量热能,故不可将DMSO直接加入细胞液中,必须使用前先行配制完成;DMSO之等级和无菌过滤之方式为何?冷冻保存使用之DMSO等级,必须为Tissue culture grade之DMSO,其本身即为无菌状况,次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中,保存于4°C,避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质,并可减少污染之机会。若要过滤DMSO,则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜;冷冻保存细胞之方法?冷冻保存方法一:冷冻管置于4°C 30~60分钟→ (-20°C 30分钟)→-80°C 16~18小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase长期储存。-20°C不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;细胞欲冷冻保存时,细胞冷冻管内应有多少细胞浓度?冷冻管内细胞数目一般为1x10(6)cells/ml vial,融合瘤细胞则以5x10(6)cells/ml vial为宜;应如何避免细胞污染?细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法;如果细胞发生微生物污染时,应如何处理?直接灭菌后丢弃之。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
GC-2spd(ts)细胞系相关产品:Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2细胞、TMD8细胞、SKNBE-1细胞
B95-8细胞系相关产品:TE 32.T细胞、CoC1细胞、118MG细胞
AML-12细胞系相关产品:HEL 299细胞、H1672细胞、CEF细胞
NCI-BL2141细胞系相关产品:UO31细胞、H3255_DA细胞、HO8910/PM细胞
Hs 766.T细胞系相关产品:NCIH838细胞、HPMC细胞、HT 1376.T细胞
细胞生长特性:贴壁
B35 Cell:大鼠神经母细胞瘤细胞系
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。
细胞形态特性:详见细胞说明书
HSC-T6细胞系相关产品:Hs742T细胞、MM6细胞、HOC-1细胞
U-251细胞系相关产品:Hs 606细胞、293E细胞、CT26-clone 25细胞
KE 37细胞系相关产品:SU-DHL-4细胞、NCI-H747细胞、KP-N-RT细胞
MAVER1细胞系相关产品:SNU-761细胞、HuNS1细胞、FF-WT-BJ细胞
MDA-MB231细胞系相关产品:SF-126细胞、NCI-H1184细胞、TW-039细胞
NFHIOSE-80细胞系相关产品:Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1细胞、RBL2H3细胞、COLO394细胞
CPA47细胞系相关产品:C3H10T1/2细胞、U251-MG细胞、AR4IP细胞
B35 Cell:大鼠神经母细胞瘤细胞系
EOC-20细胞系相关产品:SU-DHL-10细胞、KYSE-30细胞、MTC-TT细胞
10T1/2细胞系相关产品:BGC-823细胞、MT2细胞、NTERA2细胞
Ramos-2G6-4C10细胞系相关产品:BT 549细胞、PANC0327细胞、COS7细胞
NCI-SNU-761细胞系相关产品:293细胞、KM12细胞、SNU-182细胞
VM-CUB-1细胞系相关产品:BT-483细胞、SF-126细胞、AU565细胞
SNU398细胞系相关产品:G 401细胞、SKUT-1细胞、SK-N-BE(2)-C细胞
NCIH211细胞系相关产品:NIH:OVCAR-10细胞、MDA-361细胞、NCI-H740细胞
SCLC-21H细胞系相关产品:SPCA-1细胞、NCIH2107细胞、231-luc细胞
SK-N-FI细胞系相关产品:Tb 1 Lu细胞、P3/X63/Ag8细胞、MCF 10A细胞
SK-N-FI细胞系相关产品:Tb 1 Lu细胞、P3/X63/Ag8细胞、MCF 10A细胞
Hs839.T细胞系相关产品:SCC154细胞、VMM39细胞、Becker细胞
BRL-3A细胞系相关产品:Calu-6细胞、Hi5细胞、KM.12细胞
SC细胞系相关产品:DU145细胞、HT 115细胞、H87细胞
A-172细胞系相关产品:SK Mel 2细胞、HPAF-2细胞、KALS-1细胞
GTL-16细胞系相关产品:H35 Reuber细胞、SNG-M细胞、Colo205细胞
Evsa-T细胞系相关产品:PC-9S1细胞、C42细胞、NCI-H1703细胞
Tu-212细胞系相关产品:SNU-475细胞、NCI-H526细胞、V79-4细胞
3T3 clone A31细胞系相关产品:EC-109细胞、NB-4细胞、BDCM细胞
NCIH1915细胞系相关产品:SW260细胞、293细胞、MDA 435细胞
B16/F10细胞系相关产品:Panc_05_04细胞、CAL 39细胞、HCC366细胞
H2286细胞系相关产品:KU-812F细胞、MUVEC细胞、SuDHL 8细胞
MKN74细胞系相关产品:AtT20细胞、NCI-H838细胞、VeroC1008细胞
NPA细胞系相关产品:Rabbit Kidney 13细胞、JB-6细胞、GM16136细胞
CCD-112 CoN细胞系相关产品:266 Bl细胞、H211细胞、Panc-02细胞
B-cell with DC Morphology细胞系相关产品:SCL2细胞、Caco-2/ATCC细胞、CA46细胞
SCC4细胞系相关产品:COLO 201细胞、SMA 560细胞、Pt K2细胞
CAL-78细胞系相关产品:NCI-H1435细胞、COLO 680N细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5细胞
HS578细胞系相关产品:CAMA-1细胞、SCCVII/St细胞、MT-3 [Human leukocytes]细胞
Fetal Human Colon细胞系相关产品:GM04154细胞、PBMC细胞、SR786细胞
HS-695T细胞系相关产品:HCV29细胞、SCC 25细胞、L M (TK-)细胞
Z138细胞系相关产品:NCI-H520细胞、HeLa 229细胞、KATOIII细胞
Rat Basophilic Leukemia-1细胞系相关产品:Sp2/O-Ag14细胞、PG-LH7细胞、CAL-27细胞
SN12CPM6细胞系相关产品:SV40-HCEC细胞、COLO 320HSR细胞、Hs-274-T细胞
HEK-293F细胞系相关产品:Jurkat E6细胞、FTC-133细胞、COLO 320DM细胞
H-1395细胞系相关产品:A549-Taxol细胞、NCI-322细胞、UO-31细胞
Hs 274细胞系相关产品:CFPAC-1细胞、TK-10细胞、AML 12细胞
PC-9/S1细胞系相关产品:SU86-86细胞、H-498细胞、D407细胞
BT细胞系相关产品:OCI-Ly 19细胞、SHP-77细胞、SCC25细胞
NCI-H838细胞系相关产品:hTERT-RPE-1细胞、R1610细胞、Okayama University Medical School-23细胞
NCIH378细胞系相关产品:COLO320-DM细胞、COS-7细胞、EC9706细胞
GM01232细胞系相关产品:Tu212细胞、32D.3细胞、J82 COT细胞
CHP-100细胞系相关产品:PC9细胞、CAL-33细胞、HPDE6c7细胞
HCT/Taxo1细胞系相关产品:NTERA2-D1细胞、RKN细胞、NW-MEL-38细胞
B35 Cell:大鼠神经母细胞瘤细胞系
Colo205细胞系相关产品:KBM-7细胞、RAG细胞、MHCC 97细胞
NCI-H358细胞系相关产品:OCI Ly3细胞、3T3F442A细胞、WPMY1细胞
HCCC9810细胞系相关产品:Hs 840.T细胞、MEL细胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a细胞
TE-15细胞系相关产品:MV4:11细胞、CHOS细胞、NCI-H820细胞
OVMANA细胞系相关产品:SK-MEL-5细胞、LIXC-002细胞、PA317细胞
HCC0095细胞系相关产品:Ha Fe细胞、L-1210细胞、VMRCLCD细胞
BT549细胞系相关产品:HEC1-A细胞、U343MG细胞、DMS79细胞
QBI-293A细胞系相关产品:G401细胞、C33-A细胞、Hs729细胞
SKO3细胞系相关产品:143 B细胞、NCIH460细胞、CV-1 in Origin Simian-7细胞
MDA-468细胞系相关产品:HOC-1细胞、SO-Rb 50细胞、TCCPAN2细胞
BEP2D细胞系相关产品:HuT102细胞、HFL-I细胞、LS-1034细胞
MH-22a细胞系相关产品:High-5细胞、Mono-Mac-6细胞、WERI-Rb 1细胞
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