"BSC40 Cell:非洲绿猴肾细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:肾;自发永生
HC11 Mammary Epithelium细胞系相关产品:F98细胞、H-1734细胞、4T1.2细胞
Line 870 Emory University-4细胞系相关产品:CCD841CoTr细胞、U343细胞、Wien-133细胞
CA 46细胞系相关产品:D283 Med细胞、WERI-Rb 1细胞、Colo741细胞
NCI-H838细胞系相关产品:hTERT-RPE-1细胞、R1610细胞、Okayama University Medical School-23细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
BSC40 Cell:非洲绿猴肾细胞系
细胞传代时消化的问题:可以这样说,对于需要消化传代的细胞,每一次的消化都是对这个细胞存活与否,状态好与不好最至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题,自己养的细胞开始的几代长的还挺好的,可是穿过几代之后就发现自己的细胞,状态越来越差劲了。对于这个问题,可以非常肯定地说,你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以,越长越差。在消化的过程中,你加入胰酶后,所有细胞都在被胰酶消化着,但是我们忽视了一个问题就是,细胞的生长状态是不一样的,每一个细胞的贴壁情况也是不一样的,有的贴壁牢固,有的贴壁没有那么牢固的,所以,让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的,他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。(以难消化细胞为例);具体操作:1)首先不加胰酶,倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍,(这是前奏,即为步,目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍,这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍,两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步(你可以将这些传入新瓶培养,以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。)3)吸干净瓶内剩余液体,加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍,吸掉弃之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察,待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净子弹头里备用,加入新培养基开始吹打,吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(你也可以传入新瓶培养,以与后面及前面的做对比。)这是第三步。4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶,如果你们那比较富裕的话,呵呵。继续镜下观察,待剩余细胞间隙明显,细胞独立开来的时候,吸掉胰酶,加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养(根据实际情况你自己把握)。这是第四步。其实还可以有第五步,对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话,你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态,更漂亮的样子,没办法,你必须分多批多次消化,这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到最低,保证细胞的状态能够。当然了,如果细胞是属于那种很容易消化的细胞,像RAW264.7,仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较,去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步,除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外,还有一个更重要的作用就是,可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态,不成片不连体。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
为什么培养的细胞要及时传代?体外培养的细胞大多具有生长接触抑制的特性,也就是说当一个细胞被其他细胞包围的时候,它就会停止生长,及时传代后,细胞的生长得以继续。培养细胞生长减慢的原因在哪些?其解决办法有哪些?可能的原因有:更换了不同的培养液或血清;培养液中一些细胞生长必需成分如谷眈肢或生长因子等耗尽或缺乏或己被破坏;培养物中有少量细菌或真菌污染;试剂保存不当;比较新培养液与原培养液成分,比较新血清与旧血清等,找出其它可能的原因。解决办法:增加起始培养细胞浓度;让细胞逐渐适应新培养液;换入新鲜配制培养液;补加谷酷肢或生长因子等;用无抗生素培养液培养,如发现污染,去弃培养物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培养液需在2-8℃避光保存;含血清完全培养液在2-8℃保存,并在2周内用完;分离培养物,检测支原体。冷冻管应如何解冻?取出冷冻管后,须立即放入37℃水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在1-2分钟内大部分融化,特别注意,需残留一小块冰块,就可拿到超净工作台操作细胞,用75%酒精消毒冻存管,用新鲜培养基将细胞转移至培养瓶。另外冷冻管由液氮桶中取出解冻时,必须注意安全,预防冷冻管爆裂。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
Co-115细胞系相关产品:RIN Cl-5F细胞、HCT-FET细胞、MDAMB415细胞
NCI-BL6细胞系相关产品:HEC251细胞、TE15细胞、BJ1细胞
MyLa2059细胞系相关产品:SKMEL-24细胞、PC 61 5.3细胞、NCI-H1781细胞
CAL-120细胞系相关产品:Ishikawa细胞、RAT2细胞、MBT-2细胞
AAV293细胞系相关产品:COS1细胞、MLE12细胞、NCIH2171细胞
细胞生长特性:贴壁
BSC40 Cell:非洲绿猴肾细胞系
细胞冻存复苏材料与方法步骤:常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器,规格有35L和50L两种。使用时要注意以下几点:(1)一般两周需充液氮一次,至少一个月充氮一次。液氮温度达-196℃,使用时注意勿让液氮溅到皮肤上,以免引起冻伤。(2)液氮容器为双层结构,中间为真空层,瓶口有双层焊接处,应防止焊接部裂开。(3)在装入液氮时,要注意缓慢小心,并用厚纸卷筒或特制漏斗作引导,使液氮直达瓶底,如有专用液氮灌注装置则更好。若为初次使用,加液氮时更要缓慢,以免温度骤降而使容器损坏。细胞冻存时常备的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培养液,DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油(121°C蒸气高压消毒),2mL安瓿(或专用细胞冻存管)、吸管、离心管、喷灯、纱布袋(或冻存管架)等。主要操作步骤为:(1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为3×106~1×107/mL之间。(3)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中,安瓿装1~1.5mL在火焰喷灯上封口,封口处要完全封闭,圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(4)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜,次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤:先将安瓿置入4℃冰箱中2~3小时,再移至冰箱冷冻室内3~4小时,再吊入液氮容器颈气态部分存放2小时,最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,取出一只安瓿细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。
细胞形态特性:详见细胞说明书
H2110细胞系相关产品:COV504细胞、HEK-AD 293细胞、CCD18Co细胞
WI 38细胞系相关产品:GM-346细胞、MOLT-4细胞、Okayama University Medical School-27细胞
HCFB(HCF)细胞系相关产品:WEHI-231细胞、MG63细胞、OVCAR 420细胞
SU-86-86细胞系相关产品:HCA 7细胞、NCIH820细胞、OVCA8细胞
OE-19细胞系相关产品:Nthy-ori 3.1细胞、CTLA4Ig-24细胞、JM-1细胞
PK15细胞系相关产品:WM 2664细胞、HEC151细胞、Mel RM细胞
H1954细胞系相关产品:Eca109细胞、HEK-293-FT细胞、EAC细胞
BSC40 Cell:非洲绿猴肾细胞系
B-3细胞系相关产品:COLO-738细胞、Hs578Bst细胞、H-2452细胞
GM02219C细胞系相关产品:MCF 10A细胞、Lec1细胞、RD 2细胞
G402细胞系相关产品:MOLP2细胞、TE353.SK细胞、PANC403细胞
HTSMC细胞系相关产品:LIM-1215细胞、Ej138细胞、HTori-3细胞
HL-60 Clone 15细胞系相关产品:HHUA细胞、Roswell Park Memorial Institute 7666细胞、TE-6细胞
KMST6细胞系相关产品:MH7A细胞、SUM102PT细胞、NB19-RIKEN细胞
CHL-11细胞系相关产品:U373 MG细胞、Chang Cells细胞、HC11 Mammary Epithelium细胞
Murine Thymic Epithelial Cell line 1细胞系相关产品:T-84细胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1细胞、PA I细胞
2780CP细胞系相关产品:KOPN8细胞、TFH细胞、CHP-100细胞
2780CP细胞系相关产品:KOPN8细胞、TFH细胞、CHP-100细胞
COR-L23细胞系相关产品:CF Pac1细胞、J774A1细胞、NFS 60细胞
A-253细胞系相关产品:RPMI2650细胞、GA-10-Clone-4细胞、SW756细胞
MCF-7/ADR细胞系相关产品:CAL 62细胞、CRFK细胞、SCC9细胞
COLO-357细胞系相关产品:SNU449细胞、S91细胞、MM1.S细胞
NS-I/1细胞系相关产品:3T3J2细胞、WRL-68细胞、SNUC2B细胞
NCI-H1105细胞系相关产品:NCI-H1694细胞、RKO-E6细胞、Sup T-1细胞
H-1563细胞系相关产品:NCI-H2023细胞、MIN6细胞、NCIH1568细胞
28SC细胞系相关产品:CCC-ESF-1细胞、HEC1A细胞、COLO201细胞
SF 767细胞系相关产品:TSUpr1细胞、ESC细胞、PE/CA-PJ-34细胞
COLO 16细胞系相关产品:EFM192C细胞、MSTO-211H细胞、MES23.5细胞
SNU-869细胞系相关产品:P 3 HR 1细胞、Uhth-74细胞、T-98细胞
NL20SV细胞系相关产品:MA-c细胞、NCI-SNU-398细胞、Jiyoye细胞
L cells细胞系相关产品:HMC3细胞、M619细胞、MKN 28细胞
MOVAS-1细胞系相关产品:Human Liver-7702细胞、NCI-H460细胞、WM266细胞
Hs 766T细胞系相关产品:HRVEC细胞、MDA MB 436细胞、WM-266-4细胞
DU4475细胞系相关产品:LNCaP细胞、MT-4细胞、KTC1细胞
C57 Mouse Tumor 64细胞系相关产品:BALB/3T3细胞、MDAPCa2b细胞、RT-4细胞
PaTu 8988s细胞系相关产品:22Rv1细胞、HK2细胞、NCTC 929细胞
Institute for Medical Research-32细胞系相关产品:MDA-415细胞、HCC1187细胞、COLO357细胞
SJSA1细胞系相关产品:L2细胞、CL34细胞、SHG44细胞
SNU-878细胞系相关产品:HR8348细胞、OCI-Ly 1细胞、NCI-SNU-878细胞
293细胞系相关产品:NPA87细胞、HT-144细胞、A875细胞
H2405细胞系相关产品:BALL-1细胞、C3H/10T1/2 CL8细胞、P3 NS1 Ag4细胞
MAEC细胞系相关产品:NCIH820细胞、TF1细胞、RBL细胞
Toledo细胞系相关产品:G-361细胞、H-295细胞、KP4细胞
AMO1细胞系相关产品:RKO-AS-45-1细胞、MHCC 97-L细胞、OPM2细胞
GM17346细胞系相关产品:A-375.S2细胞、Line 697细胞、NCIH2342细胞
HT-55细胞系相关产品:BT-474细胞、NS1/1-Ag4.1细胞、HLEB-3细胞
SK N SH细胞系相关产品:MDCC MSB1细胞、Hopkins-92细胞、H-1341细胞
SW 780细胞系相关产品:Hs-695-T细胞、H82sclc细胞、H-1734细胞
Earle's L cells细胞系相关产品:MGECs细胞、NCI-SNU-620细胞、JHH7细胞
TGW-I-nu细胞系相关产品:NOK细胞、N1E-115细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157细胞
PL-45细胞系相关产品:KPNRTBM1细胞、SAOS 2细胞、DHL-4细胞
BSC40 Cell:非洲绿猴肾细胞系
P31-FUJ细胞系相关产品:801-D细胞、HCT 15细胞、SL-29细胞
ZR75_1细胞系相关产品:AML193细胞、CCC-ESF-1细胞、RPMI 2650细胞
LNCaP-ATCC细胞系相关产品:MLA 144细胞、Japanese Tissue Culture-28细胞、P3HRI细胞
EFM-192B细胞系相关产品:NCIH548细胞、CEK细胞、Hs 578T细胞
UMUC3细胞系相关产品:JJN3细胞、hTERT-RPE1细胞、Rat Lung-65细胞
HCCLM6细胞系相关产品:LM3细胞、639 V细胞、Capan 2细胞
HCEC-B4G12细胞系相关产品:AX-Mel细胞、MNNG细胞、H-1975细胞
Melan-a细胞系相关产品:HCC15细胞、HNE1细胞、HPAF-2细胞
OVCAR-3细胞系相关产品:TE10细胞、SW1417细胞、LN-382细胞
Rat 1细胞系相关产品:HMrSV5细胞、NCI-H1792细胞、ACT-1细胞
BL-6细胞系相关产品:CAL62细胞、Hs729细胞、HemECs细胞
L78细胞系相关产品:L929(NCTC)细胞、HOMEC细胞、LX-2细胞
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