"Melan-a Cell:小鼠黑色素细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：黑色素细胞；自发永生；C５７BL/６
PaTu8988s细胞系相关产品：Hs863T细胞、HCEC-B4G12细胞、HPBALL细胞
H1563细胞系相关产品：GM00346细胞、T98细胞、MT2细胞
H2052_MM细胞系相关产品：SNU-368细胞、GBCSD细胞、WM 451-Lu细胞
3 LL细胞系相关产品：UM-UC14细胞、NCI-H1954细胞、GM03671细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
Melan-a Cell:小鼠黑色素细胞系
细胞传代时消化的问题：可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好最至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。（以难消化细胞为例）；具体操作：１)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗１-２遍，（这是前奏，即为步，目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。２)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。）３)吸干净瓶内剩余液体，加入０.３ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净子弹头里备用，加入新培养基开始吹打，吹打２-３遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用２ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。（你也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比。）这是第三步。４)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，呵呵。继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况你自己把握）。这是第四步。其实还可以有第五步，对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话，你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态，更漂亮的样子，没办法，你必须分多批多次消化，这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到最低，保证细胞的状态能够。当然了，如果细胞是属于那种很容易消化的细胞，像RAW２６４.７，仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较，去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步，除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外，还有一个更重要的作用就是，可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态，不成片不连体。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，原因比较复杂，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳；血清使用错误或血清的品质不佳；解冻过程错误；冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心；悬浑细胞误认为死细胞；培养温度使用错误；细胞置于-８０℃太久等。建议严格参照ATCC的标准操作规程进行细胞复苏、冻存等工作。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００×g(约１OOOrpm),５-１０分钟，转速过高或离心时间过长都将造成细胞死亡。合适的离心转速是根据相对离心力决定。RCF=１.１１９×１０５×r×(rpm)２，其中r为离心机转轴中心与离心套管底部内壁的距离；rpm为离心机每分钟的转数；RCF(relative centrifugal force)为相对离心力，以重力加速度g(９８０.６６cm/s２)的倍数来表示单位。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
VP267细胞系相关产品：Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19细胞、COV-434细胞、H2029细胞
U-138MG细胞系相关产品：NS-20Y细胞、PC-9S1细胞、HFTF细胞
NCI-H1703细胞系相关产品：LC1sq细胞、NH-6细胞、OVCAR3细胞
TO 175.T细胞系相关产品：RAW264.7细胞、HCC70细胞、SCL2细胞
OLN 93细胞系相关产品：Co320细胞、NCI-H2452细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16细胞
细胞生长特性：贴壁
Melan-a Cell:小鼠黑色素细胞系
细胞株(系)的使用，为医学研究和测试工作带来了极大的方便。但细胞的传代是有限制的，长期连续传代的细胞，不仅消耗大量的人力和物力，而且细胞的生长与形态等会有一定退变或转化，因而细胞失去原有的遗传特性，有时还会由于细胞污染而造成传代中断，种子丢失。因此，在实际工作中常需冻存一定数量的细胞，以备替换使用。细胞冷冻与复苏是细胞培养 室的常规工作和通用技术。目前，细胞冻存最常用的技术是液氮冷冻保存法，主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。细胞在不加任何保护剂的情况下直接冷冻，细胞内外的水分会很快形成冰晶，从而引起一系列不良反应。如细胞脱水使局部电解质浓度增高，pH值改变，部分蛋白质由于上述原因而变性，引起细胞内部空间结构紊乱，溶酶体膜由此遭到损伤而释放出溶酶体酶，使细胞内结构成分造成破坏，线粒体肿胀，功能丢失，并造成能量代谢障碍。胞膜上的类脂蛋白复合体也易破坏引起细胞膜通透性的改变，使细胞内容物丢失。如果细胞内冰晶形成较多，随冷冻温度的降低，冰晶体积膨胀造成细胞核DNA空间构型发生不可逆的损伤，而致细胞死亡。因此，细胞冷冻技术的关键是尽可能地减少细胞内水分，减少细胞内冰晶的形成。采用甘油或二甲基亚砜作保护剂，这两种物质分子量小，溶解度大，易穿透细胞，可以使冰点下降，提高细胞膜对水的通透性，且对细胞无明显毒性。慢速冷冻方法又可使细胞内的水分渗出细胞外，减少胞内形成冰结晶的机会，从而减少冰晶对细胞的损伤。
细胞形态特性：详见细胞说明书
CNE-1细胞系相关产品：HPBALL细胞、SUSM1细胞、IA-LM细胞
NCM460细胞系相关产品：Metastatic Variant 522细胞、Panc-02细胞、NCI-H774细胞
P3 NS1 Ag4细胞系相关产品：Hs 706.T细胞、National Medical Center-Glioma 1细胞、RCC-10细胞
Psi-2 DAP细胞系相关产品：HFT 8810细胞、SJRH 30细胞、HCC1954 BL细胞
OV-2008细胞系相关产品：IPAM-WT细胞、MHCCLM3细胞、R1610细胞
Bac 1.2F5细胞系相关产品：130-T细胞、K422细胞、NTERA-2cl.D1细胞
EU-2细胞系相关产品：TE-11细胞、Roswell Park Memorial Institute 7951细胞、NCI-H1404细胞
Melan-a Cell:小鼠黑色素细胞系
RPMI6666细胞系相关产品：CCRF/CEM-C7细胞、MPP89细胞、DH 82细胞
SU-86-86细胞系相关产品：HCA 7细胞、NCIH820细胞、OVCA8细胞
OCI-LY-10细胞系相关产品：Tb1Lu细胞、OAW 42细胞、Tn-5细胞
TOG细胞系相关产品：Human Epidermoid carcinoma #2细胞、H441细胞、CCRF-SB细胞
HCT FET细胞系相关产品：NBLAN5T细胞、MDCK supertube细胞、HO1-N-1细胞
KM12SM细胞系相关产品：OV90细胞、16-HBEo细胞、SW 948细胞
H676B细胞系相关产品：CEM T4细胞、AN3细胞、ROS1728细胞
Hs832T细胞系相关产品：PA I细胞、SCL I细胞、mIMCD-3细胞
MDA 1386细胞系相关产品：LC2/Ad细胞、Huh-7.5.1细胞、HCC2185细胞
MDA 1386细胞系相关产品：LC2/Ad细胞、Huh-7.5.1细胞、HCC2185细胞
SKMEL3细胞系相关产品：H146细胞、NCI-ADR-RES细胞、COV434细胞
Tb 1 Lu细胞系相关产品：MCF.10A细胞、BEL 7402细胞、NHRF细胞
AMC-HN8细胞系相关产品：Hs746T细胞、LTEP-a-2细胞、PC3M细胞
CHO cell clone K1细胞系相关产品：HCC-95细胞、SKNSH细胞、HCC9724细胞
Hep 3B2_1-7细胞系相关产品：SMMC 7721细胞、QGP 1细胞、HEH2细胞
SKNAS细胞系相关产品：SNK-6细胞、Super Tube细胞、NIH:OVCAR4细胞
NCI-H1993细胞系相关产品：PTK 1细胞、HuH-6细胞、P3/NS1/Ag4-1细胞
CL1细胞系相关产品：BEL 7404细胞、HEL-92细胞、MiaPaCa-2细胞
P3/NS1/Ag4-1细胞系相关产品：2008细胞、AA-Mel细胞、SMMC-7721细胞
MM134细胞系相关产品：H526细胞、SKOV-433细胞、KFB细胞
Factor Dependent Continuous-Paterson 1细胞系相关产品：Capan-1细胞、HIT.T15细胞、MB 157细胞
Ishikawa细胞系相关产品：C166细胞、CCD19Lu细胞、SUM-102PT细胞
Meat Animal Research Center-145细胞系相关产品：Hu-P-T3细胞、CWR22R细胞、CCD-841-CoN细胞
Co 205细胞系相关产品：Hs1.Tes细胞、KNS81细胞、KYSE 270细胞
SN12C细胞系相关产品：H727细胞、D283-MED细胞、TJ905细胞
SUM159PT细胞系相关产品：DMS153细胞、KMH2细胞、BJA-B-1细胞
SW 527细胞系相关产品：UMUC-3细胞、H1435细胞、A375-S2细胞
NB19细胞系相关产品：IHC-ST1细胞、U-251 MG细胞、NCI-H1869细胞
MEC-1细胞系相关产品：HPAF-I细胞、HCC-2935细胞、NCI-H889细胞
Panc8.13细胞系相关产品：GM04680细胞、Nb2a细胞、NCIH660细胞
HRA-19细胞系相关产品：NCI-H441细胞、aTC1-6细胞、HL 60细胞
HNTEC细胞系相关产品：MES-SA细胞、NRK clone 52E细胞、MCM细胞
343MG细胞系相关产品：Fox/NY细胞、ECC-12细胞、BCP-1细胞
T47D:A细胞系相关产品：PL-45细胞、FLC7细胞、OACP4 C细胞
130-T细胞系相关产品：G361-mel细胞、Pt-K2细胞、SUM 159PT细胞
NTERA-2 clone D1细胞系相关产品：NCI-H226细胞、H-226细胞、C81-61细胞
PFSK1细胞系相关产品：DC 2.4细胞、Hs-274-T细胞、TK 10细胞
TSCCa细胞系相关产品：UWB1-289细胞、Hs 863.T细胞、OCI-LY-8细胞
H-1755细胞系相关产品：NCIH2342细胞、COLO-680N细胞、OCI-AML-3细胞
SNK-6细胞系相关产品：Turbot Embryonic Cell line细胞、HepaRG细胞、HL1细胞
SNK-6细胞系相关产品：Turbot Embryonic Cell line细胞、HepaRG细胞、HL1细胞
EoL-1细胞系相关产品：MEG-01细胞、U-138-MG细胞、C-Li-7细胞
PL-9细胞系相关产品：IOSE-29细胞、NCIH508细胞、NPC-039细胞
Melan-a Cell:小鼠黑色素细胞系
HIT-T15细胞系相关产品：SMA560细胞、H747细胞、SNU886细胞
Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative细胞系相关产品：U-87 MG细胞、LAN-1细胞、MeT 5A细胞
Institute for Medical Research-90细胞系相关产品：CACO2细胞、NCIH2009细胞、NCI-H322T细胞
OCI/AML5细胞系相关产品：ACC3细胞、Panc 8.13细胞、B16 F10细胞
H2196细胞系相关产品：LA-N-6(OAN)细胞、MC/CAR细胞、IGR-OV1细胞
MADISON LUNG TA-109细胞系相关产品：PK136细胞、MIA PaCa-2细胞、C666-1细胞
Kit225细胞系相关产品：SK-N-BE(2)-M17细胞、CAL-27细胞、NCIH2107细胞
MNNG细胞系相关产品：I90细胞、Clone 929细胞、SW 839细胞
HCC 94细胞系相关产品：624mel细胞、SK-MEL 28细胞、hTERT RPE-1细胞
Normal fibroblast-10细胞系相关产品：58F细胞、PNT1A细胞、JVM-2细胞
GP5d细胞系相关产品：SKES-1细胞、OCI-AML2细胞、Vero细胞
HeLa/DDP细胞系相关产品：COLO 320细胞、Human Hepatocyte Line 5细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6细胞
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