"SG231 Cell:人胆管上皮癌细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:肝内胆管癌;男性
PTK2细胞系相关产品:JIII细胞、OVCAR3细胞、MDA-MB-435 S细胞
NCI-H292细胞系相关产品:FC33细胞、GM04671细胞、Eca-109细胞
Hs940.T细胞系相关产品:293 HEK细胞、UMNSAH-DF 1细胞、IGROV细胞
HCC0078细胞系相关产品:HT144细胞、OVCAR-4细胞、HRCEC细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
SG231 Cell:人胆管上皮癌细胞系
细胞消化过程总结:其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足够了,一般我加300ul。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候,比如tsDC细胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙状移动。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
Hs 688(A).T细胞系相关产品:SCC25细胞、E.G7-OVA细胞、SK LU 1细胞
MILE SVEN 1细胞系相关产品:AN3 CA细胞、Ha Fe细胞、GM04154细胞
Hs 729T细胞系相关产品:MDA175细胞、3T3-F442A细胞、SW1463细胞
8305C细胞系相关产品:MKN28细胞、NCI-H719细胞、SK-MEL2细胞
Biologics Standards-Cercopithecus-1细胞系相关产品:H-810细胞、KAT-5细胞、MB39细胞
细胞生长特性:贴壁
SG231 Cell:人胆管上皮癌细胞系
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。
细胞形态特性:详见细胞说明书
OVCAR-8细胞系相关产品:578T细胞、Epstein-Barr-1细胞、BJA-B1细胞
CO115细胞系相关产品:SK.MEL.5细胞、PECAPJ34细胞、MADB-106细胞
MCF7/WT细胞系相关产品:MDAMB134VI细胞、MMAc-Serum Free细胞、C26细胞
OKT 3细胞系相关产品:SNU-638细胞、ROS17/2.8细胞、SK-N-BE(2)-M17细胞
Hep II细胞系相关产品:NCIH1581细胞、Anglne细胞、MHCCLM3细胞
HOMEC细胞系相关产品:SK-MES细胞、KYSE-510细胞、BEL 7404细胞
H9c2细胞系相关产品:DU_145细胞、HOS(TE85)细胞、FOX-NY细胞
SG231 Cell:人胆管上皮癌细胞系
SNU-719细胞系相关产品:HcerEpic细胞、P36细胞、Sp2/0-Ag14细胞
HTR8细胞系相关产品:JHH2细胞、Farage OL细胞、HDQP1细胞
DMS114细胞系相关产品:LL/2细胞、Nb 2细胞、HCC-9204细胞
TW01细胞系相关产品:WEHI3B细胞、CCD966SK细胞、SKRC-39细胞
NCIH1993细胞系相关产品:3AA细胞、KPL4细胞、HUV-EC-C细胞
Pro-5WgaRI3C细胞系相关产品:NCI-SNU-423细胞、NCIH69细胞、Hs 934.T细胞
58F细胞系相关产品:BNL CL2细胞、H1395细胞、NCI-H2135细胞
3T6细胞系相关产品:L cells细胞、alpha TC1-6细胞、OV 1063细胞
Colo-201细胞系相关产品:NK-92 MI细胞、BEL 7404细胞、Ha Fe细胞
Colo-201细胞系相关产品:NK-92 MI细胞、BEL 7404细胞、Ha Fe细胞
AA-Mel细胞系相关产品:SW1463细胞、L 929细胞、HT-1080细胞
NHRF细胞系相关产品:D-341 Med细胞、MB 157细胞、IOSE 29细胞
293A细胞系相关产品:WC00044细胞、A-2058细胞、4175细胞
SU8686细胞系相关产品:BRL3A细胞、PANC-28细胞、LuCL4细胞
C-33 A细胞系相关产品:ST2细胞、KRC-Y细胞、VP 229细胞
SVEC 4-10细胞系相关产品:H-711细胞、RMG-1细胞、GLC-82细胞
Ca759细胞系相关产品:130T细胞、C3H10T1/2CL8细胞、OAC-P4C细胞
NMCG-1细胞系相关产品:GM00215细胞、TE-32细胞、CAL 62细胞
SKNMC细胞系相关产品:KU812-F细胞、BC-028细胞、CAL 39细胞
ST-2细胞系相关产品:SW 756细胞、HEK-293-H细胞、JOSK-M细胞
T47D:A细胞系相关产品:PL-45细胞、FLC7细胞、OACP4 C细胞
A704细胞系相关产品:VP229细胞、HFLS细胞、Hs606细胞
OS-RC-2细胞系相关产品:NUGC2细胞、SF-767细胞、3T6细胞
NCTC 3960细胞系相关产品:MD Anderson-Metastatic Breast-157细胞、HOS/MNNG细胞、JAR细胞
MRC-5细胞系相关产品:Huh7.5细胞、SW 780细胞、ST2细胞
LAN1细胞系相关产品:HCE细胞、SKG-IIIa细胞、Mac-1细胞
KYSE270细胞系相关产品:2780CP细胞、P3JHR1细胞、BALB/3T3细胞
ECV细胞系相关产品:S91细胞、NCIH522细胞、H1954细胞
EAhy926细胞系相关产品:Hs.27细胞、C-33 A细胞、NCI-322细胞
SCL-I细胞系相关产品:WM-266-4细胞、UCLA-SO-M20细胞、NCI-H647细胞
SRA01/04细胞系相关产品:SUM-149PT细胞、MAEC细胞、Colo-201细胞
NCIH847细胞系相关产品:SUPM2细胞、Pa16C细胞、H23细胞
HOS-TE85细胞系相关产品:SkMel31细胞、MS1细胞、OCI/AML-4细胞
WM35细胞系相关产品:A-172细胞、293F细胞、H-2286细胞
Kupffer细胞系相关产品:Hs-729-T细胞、HN 4细胞、SUM 190PT细胞
A549/ATCC细胞系相关产品:DU-4475细胞、ReNcell CX细胞、CCD-841CoTr细胞
KYSE-70细胞系相关产品:HEK/293细胞、NCI-H82细胞、Nthy-ori 3.1细胞
MPP-89细胞系相关产品:Adeno-293细胞、COLO 738细胞、IBRS2细胞
CCC-HPF-1细胞系相关产品:rHSC-99细胞、COLO-205细胞、U138-MG细胞
MCAEC细胞系相关产品:GM15452细胞、293T细胞、McA-RH 7777细胞
87MG细胞系相关产品:BJA-B-1细胞、SK-RC 42细胞、GA10细胞
RPMI1846细胞系相关产品:KYSE50细胞、RSC-96细胞、HASMC细胞
NCI-H1105细胞系相关产品:NCI-H1694细胞、RKO-E6细胞、Sup T-1细胞
SG231 Cell:人胆管上皮癌细胞系
BT.549细胞系相关产品:H1755细胞、KU19-19细胞、DV90细胞
COLO 320 DM细胞系相关产品:HT 1197.T细胞、WPMY1细胞、SK-MEL-2-LUC细胞
Earle's L cells细胞系相关产品:MGECs细胞、NCI-SNU-620细胞、JHH7细胞
C1498细胞系相关产品:EB-3细胞、BJA-B1细胞、Mono Mac 1细胞
OsACL细胞系相关产品:Instituto Biologico-Rim Suino-2细胞、LU65细胞、SUM-159-PT细胞
T98 G细胞系相关产品:Colon38细胞、MMQ细胞、32D.cl3细胞
NCI H929细胞系相关产品:SUM 159细胞、J82COT细胞、CCRF-CEM细胞
V79-1细胞系相关产品:MM96L细胞、Capan1细胞、HEY-A8细胞
UACC 812细胞系相关产品:RL-952细胞、VMM5细胞、Tu212细胞
LY细胞系相关产品:H7721细胞、H35 Reuber细胞、Karpas-422细胞
H23细胞系相关产品:EC-GI细胞、HUSMC细胞、2T细胞
H-460细胞系相关产品:GLC-82细胞、RMG-1细胞、MH-S细胞
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