"Evsa-T Cell:人乳腺癌细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：乳腺癌；腹水转移；女性
SNU-354细胞系相关产品：SK RC 20细胞、Ketr-3细胞、NCTC-1469细胞
U266 B1细胞系相关产品：NCIH727细胞、NHA细胞、H920细胞
P30-OHKUBO细胞系相关产品：BALB/3T3 (clone A31)细胞、SW13细胞、Renal Carcinoma细胞
Hs-578-T细胞系相关产品：H2196细胞、OKa-C-1细胞、H-2228细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
Evsa-T Cell:人乳腺癌细胞系
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系，大部分的细胞都是要成片生长的，尤其是对于贴壁细胞，单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话，传代后细胞是不能贴壁的，这样抱团的细胞就会死亡。所以，消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态，这个啊是非常考究你的功夫的！细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个，因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开，受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊，这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来，又不能太过，一吹就整片脱落，要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-２细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到７０%左右的时候就要传代了，一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞，你在洗的时候如果是用无血清１６４０去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样，用１６４０培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话，可以用PBS来洗，洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的，对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清，防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先，是很关键的一点。先补充这么多，还会后续更新。再补充一点：传代时PBS洗是很重要的一步，最近发现，用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置１０-１５分钟，有些需要更长的时间，等到细胞一个个分离开来的时候，就可以直接吹打下来，但是和胰酶消化一样，要控制好时间，不能时间太过了，要不然损伤细胞，细胞不容易成活，状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候，或者临时没有胰酶了，可以选用此方法。不过一定要试试，看是否适合你的细胞。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
常见细胞培养中一些问题总结：１)培养基中血清的比例多少合适？血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为５%-１５%，不要低于５%或高过２０%，因为含量过低会导致细胞营养不足，过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为１０%，可以适量加减；２)何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上的更换时间，按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换；３)购买的复苏细胞，为何会有脱落？因为运输的过程中不可避免的会有震荡，收到后可以离心收集；４)购买的细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；５)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–８０°C太久；６)收到的冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
Lewis-Lung细胞系相关产品：NCIH187细胞、CCRF细胞、HCC-1954细胞
MOPC细胞系相关产品：HS-294细胞、GM3570细胞、C57 Mouse Tumor 64细胞
SL1细胞系相关产品：Cates-1B细胞、NCI-H2347细胞、TFK1细胞
H-889细胞系相关产品：NCI-H1930细胞、NS-I/1细胞、SCL-1细胞
SNU-1040细胞系相关产品：SCL-2细胞、MSC细胞、SW-1353细胞
细胞生长特性：贴壁
Evsa-T Cell:人乳腺癌细胞系
正确的细胞复苏需知事项：细胞冻存好了，接下来要注意什么问题呢？没错，就是记得到时间了，拿出来复苏。那么，细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢？细胞活力和形态检查的作用何在？活力检查——千万不要使用不健康的细胞，可能有污染(真菌、支原体等)，如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞：补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至７０%单层时收获细胞，计数活细胞数，用冻存液调整细胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整)；冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞，有不同类型的冻存液，根据细胞类型选择最合适的冻存液(常用的冻存液成分有)：５-１０% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质；５-１５%甘油；如果细胞在无血清培养基内生长，应在５０%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长２４小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记好细胞类型，日期，冻存人等信息，并保证每冻存管不超过１.５ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以最快的速度转移冻存管知液氮罐内，因此，此步骤使用干冰，或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意，在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息，做好记录是非常非常重要的！还有一个最重要的，一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞，以免其中的一个液氮罐出现问题！细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要，熟记以下要点：当从液氮罐内取出细胞时，有可能会出现冻存管破裂的情况，使用保护面罩和防护服十分必要；其实，细胞复苏只是一个简单的实验，不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节，不然，也不一定会尽如人意。例如说，人身健康方面：一定要记得做好防冻工作，戴上护目镜；尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。
细胞形态特性：详见细胞说明书
CA922细胞系相关产品：MOLT4细胞、Mv.1.Lu细胞、SK-N-SH细胞
H-929细胞系相关产品：C3H/10T1/2 CL8细胞、ZR751细胞、NCI-H661细胞
WEHI 231细胞系相关产品：Tn 5B1-4细胞、H1793细胞、H647细胞
D-324MED细胞系相关产品：SF 539细胞、A-875细胞、OE-33细胞
Tu212细胞系相关产品：FOX-NY细胞、RT4P细胞、H-1436细胞
H2591细胞系相关产品：Hep G2-Luc细胞、SKOV-3细胞、CEMC7细胞
SKGT4细胞系相关产品：BEND细胞、HCC15细胞、CCRF SB细胞
Evsa-T Cell:人乳腺癌细胞系
SNU739细胞系相关产品：CF-PAC1细胞、149 PT细胞、SNU-484细胞
BXPC3细胞系相关产品：ARPE-19细胞、Roswell Park Memorial Institute 6666细胞、H-7721细胞
HS-695T细胞系相关产品：HCV29细胞、SCC 25细胞、L M (TK-)细胞
NF639细胞系相关产品：MKN74细胞、MDAPCa-2b细胞、SJRH 30细胞
MM.1S细胞系相关产品：HCC-1419细胞、C-4I细胞、F36P细胞
HEK 293 c18细胞系相关产品：HBEpiC细胞、OVCAR 420细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2细胞
IPI-2I细胞系相关产品：KP-N-RT-BM-1细胞、Hs870T细胞、TE-14细胞
C-33A细胞系相关产品：NCIH740细胞、CEM-T4细胞、PC3M-IE8细胞
CAL 33细胞系相关产品：HO1-N1细胞、HOP 92细胞、KM932细胞
CAL 33细胞系相关产品：HO1-N1细胞、HOP 92细胞、KM932细胞
TOV21G细胞系相关产品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4细胞、PANC-1细胞、SNU398细胞
T2 (174 x CEM.T2)细胞系相关产品：Bowes melanoma cells细胞、NCIH2347细胞、GP2d细胞
RD-ES细胞系相关产品：BSC1细胞、H-810细胞、OCI-AML-4细胞
NTERA2-cloneD1细胞系相关产品：GL-261细胞、MB49细胞、SUNE 1细胞
NTERA-2cl.D1细胞系相关产品：DHBE细胞、MDA PCa 2b细胞、KCL22S细胞
HuPT4细胞系相关产品：MC-38细胞、Loucy细胞、SJSA1细胞
CAL-78细胞系相关产品：NCI-H1435细胞、COLO 680N细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5细胞
NPC-TW 01细胞系相关产品：SK-OV-3细胞、V79-4细胞、BLO11细胞
L132细胞系相关产品：SW 579细胞、UCLA SO M14细胞、SK-LMS-1细胞
RT-BM细胞系相关产品：DHL6细胞、H-740细胞、OKAC1细胞
LUDLU1细胞系相关产品：OCILY3细胞、CT-26 WT细胞、K562细胞
BALL1细胞系相关产品：Wien 133细胞、HEH2细胞、UCLA-SO-M21细胞
MUTZ-1细胞系相关产品：SKM1细胞、HEK293-EBNA细胞、HIT-T15细胞
HuNS1细胞系相关产品：HHFK细胞、MPASMC细胞、ACHN细胞
Menschliche Und Tierische Zellkulture-3细胞系相关产品：UACC 893细胞、JVM2细胞、LS-411N细胞
H1563细胞系相关产品：GM00346细胞、T98细胞、MT2细胞
MiaPaCa-2细胞系相关产品：TW-039细胞、FET细胞、Potorous tridactylus Kidney 1细胞
Karpas299细胞系相关产品：DAN-G细胞、PL-11细胞、MDAPCa2b细胞
Hep 3B细胞系相关产品：Factor Dependent Continuous-Paterson 1细胞、SNGM细胞、HEK 293 c18细胞
MS751细胞系相关产品：INS1细胞、EJ 138细胞、HEK-293 c18细胞
C-Lu-65细胞系相关产品：CMT-167细胞、AU565细胞、RH7777细胞
GA10细胞系相关产品：H-322细胞、HCT116/L细胞、TK+/- (clone 3.7.2C)细胞
HM06.A1细胞系相关产品：NCI-H847细胞、H2029细胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial细胞
P3/NS-1细胞系相关产品：3LL细胞、SUM-102PT细胞、IPLB-Sf21细胞
Hs695细胞系相关产品：NB4细胞、C-33-A细胞、M109细胞
KHYG-1细胞系相关产品：Y3细胞、GM00346细胞、BALB 3T3 clone A31细胞
SHI-1细胞系相关产品：T24(ECV304)细胞、C32r细胞、A 172细胞
SUDHL-6细胞系相关产品：MCF-10 Attached细胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2细胞、RGC-5细胞
SR786细胞系相关产品：NOR-10细胞、NCIH1944细胞、639-V细胞
LTPA细胞系相关产品：NCIH244细胞、HT-55细胞、NCIH1299细胞
LTPA细胞系相关产品：NCIH244细胞、HT-55细胞、NCIH1299细胞
HAC-84细胞系相关产品：Panc-3_27细胞、KNS62细胞、Hs-729-T细胞
Hce8693细胞系相关产品：UPCI-SCC-154细胞、ME-1 [Human leukemia]细胞、CMT-167细胞
Evsa-T Cell:人乳腺癌细胞系
Hepatoma 22细胞系相关产品：GM03190A细胞、NCI-H1563细胞、OCILY-19细胞
L1210细胞系相关产品：HCA-7细胞、SVG p12细胞、TE9细胞
FRH-0201细胞系相关产品：LNCaP-Clone-FGC细胞、H-125细胞、SCLC-21H细胞
SW 579细胞系相关产品：ATN-1细胞、WM 115细胞、EPC细胞
F81细胞系相关产品：UPCI-SCC-90细胞、Natural Killer-92细胞、BHK21细胞
Panc 05.04细胞系相关产品：KMST6细胞、CMEC/D3细胞、NUGC-4细胞
P30-OHK细胞系相关产品：MDA468细胞、KU812-F细胞、H441细胞
GM2131细胞系相关产品：RT-112细胞、P3-X63-Ag8-6-5-3细胞、PIEC细胞
H87细胞系相关产品：LNCaP-ATCC细胞、HEK293F细胞、RC-2细胞
NCI747细胞系相关产品：N87细胞、KYSE0520细胞、NCI-H735细胞
Sp2/mIL-6细胞系相关产品：MDAPCa2b细胞、WM239A细胞、UCLA RO-81-A-1细胞
AAV293细胞系相关产品：COS1细胞、JIMT-1细胞、PASMCS细胞
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