"alphaTC1 Clone 6 Cell:小鼠胰岛素瘤胰岛a细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:胰岛素瘤;a细胞;C57BL/6xDBA/2
SP2-0-Ag14细胞系相关产品:KNS-81细胞、Toledo细胞、MHH-CALL2细胞
mIMCD-3细胞系相关产品:NIH:OVCAR4细胞、BJA-B细胞、H1882细胞
GDM-1细胞系相关产品:MCF7-GFP细胞、B16 melanoma F10细胞、UWB1289细胞
RPMI7951细胞系相关产品:SK-N-BE(2)-C细胞、HT144细胞、TGW-nu细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
alphaTC1 Clone 6 Cell:小鼠胰岛素瘤胰岛a细胞系
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系,大部分的细胞都是要成片生长的,尤其是对于贴壁细胞,单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话,传代后细胞是不能贴壁的,这样抱团的细胞就会死亡。所以,消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态,这个啊是非常考究你的功夫的!细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个,因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开,受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊,这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来,又不能太过,一吹就整片脱落,要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-2细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到70%左右的时候就要传代了,一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞,你在洗的时候如果是用无血清1640去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样,用1640培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话,可以用PBS来洗,洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的,对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清,防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先,是很关键的一点。先补充这么多,还会后续更新。再补充一点:传代时PBS洗是很重要的一步,最近发现,用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置10-15分钟,有些需要更长的时间,等到细胞一个个分离开来的时候,就可以直接吹打下来,但是和胰酶消化一样,要控制好时间,不能时间太过了,要不然损伤细胞,细胞不容易成活,状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候,或者临时没有胰酶了,可以选用此方法。不过一定要试试,看是否适合你的细胞。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞冻存的步骤:1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为5×106~1×107/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具体要看培养的细胞类型来选择;3)将分装上述细胞悬液于2ml冻存管中,每管0.25ml。冻存管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数);4)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中,-80℃冰箱过夜。;如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后转到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,取出一只冻存管细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
SMA 560细胞系相关产品:HPAF-II细胞、H2444细胞、I90细胞
Fetal Human Lens-124细胞系相关产品:bEnd.3[BEND3]细胞、A375-S2细胞、A-431细胞
HSC6细胞系相关产品:HOP 92细胞、Dami细胞、SNU620细胞
Capan 1细胞系相关产品:CAOV3细胞、BHP 10-3细胞、NCI-SNU-5细胞
SF-767细胞系相关产品:SNU251细胞、IOSE-Mar细胞、CT 26细胞
细胞生长特性:贴壁
alphaTC1 Clone 6 Cell:小鼠胰岛素瘤胰岛a细胞系
细胞传代培养实验:体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代,以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞,并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后,由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭,将培养的细胞分散,从容器中取出,以1:2或1:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养,即为传代培养;细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间,与细胞世代或倍增不同。在一代中,细胞培增3~6次。细胞传代后,一般经过三个阶段:游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度,即细胞群的分裂相数/100个细胞。一般细胞分裂指数介于0.2%~0.5%,肿瘤细胞可达3~5%;细胞接种2~3天分裂增殖旺盛,是活力时期,称指数增生期(对数生长期),适宜进行各种试验。实验步骤:1.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出,在超净工作台中倒掉瓶内的培养液,加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜),静置5~10分钟。2.在倒置镜下观察被消化的细胞,如果细胞变圆,相互之间不再连接成片,这时应立即在超净台中将消化液倒掉,加入3~5ml新鲜培养液,吹打,制成细胞悬液。3.将细胞悬液吸出2ml左右,加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加3ml左右培养液,盖好瓶塞,送回二氧化碳培养箱中,继续进行培养。一般情况,传代后的细胞在2小时左右就能附着在培养瓶壁上,2~4天就可在瓶内形成单层,需要再次进行传代。
细胞形态特性:详见细胞说明书
CW-2细胞系相关产品:NCIH2066细胞、C-4 I细胞、Rat Chondrosarcoma Swarm细胞
AZ521细胞系相关产品:3T6 Swiss Albino细胞、X63Ag8-653细胞、Uhth-74细胞
Madin-Darby Bovine Kidney细胞系相关产品:C3H/10T1/2细胞、WM 239-A细胞、U-266 AR1细胞
751细胞系相关产品:SK-NEP-1细胞、H-1792细胞、RIN-14B细胞
U-2-OS细胞系相关产品:AM-38细胞、NCI-H2087细胞、SUM149-PT细胞
OVCA420细胞系相关产品:H 9细胞、MGH-U1细胞、CEM-CCRF细胞
SO-RB50细胞系相关产品:U118-MG细胞、NP69SV40T细胞、H-660细胞
alphaTC1 Clone 6 Cell:小鼠胰岛素瘤胰岛a细胞系
HPAF/CD18细胞系相关产品:MUS-M1细胞、PANC 813细胞、BSC-40细胞
UMNSAH/DF-1细胞系相关产品:NCM-460细胞、NCIH1666细胞、H-1993细胞
HCC1833细胞系相关产品:HBL-100细胞、NGEC细胞、HUT-125细胞
HPAF-II/CD18细胞系相关产品:MSC细胞、GM-346细胞、SUP-B15细胞
M07e细胞系相关产品:BS-C-1细胞、SW 1271细胞、LTEPsm细胞
SK-N-BE(2)-C细胞系相关产品:HOS (TE85)细胞、HCC 2185细胞、PL9细胞
H920细胞系相关产品:HG2855细胞、SPCA-1细胞、MA-c细胞
NCI-H2172细胞系相关产品:Pt K1细胞、NPC-TW 039细胞、Detroit 562细胞
SK-NMC细胞系相关产品:Swiss 3T6细胞、PAI细胞、MAEC细胞
B16-F1细胞系相关产品:Huh7.5.1细胞、PAN 02细胞、143B TK-细胞
HPAF2细胞系相关产品:EB-2细胞、NCI-H1373细胞、NCIH358细胞
HS 683T细胞系相关产品:NCI-H522细胞、U266细胞、3T3-Swiss细胞
CWR22R-V1细胞系相关产品:HLE-SRA-01/04细胞、NG-108-15细胞、CAL12T细胞
A-2780细胞系相关产品:H9c2细胞、SCL-2细胞、BALL1细胞
Scott and White No. 13细胞系相关产品:NCI-H735细胞、MCF-7ADR细胞、NCIH740细胞
MDA157细胞系相关产品:Mink Lung细胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞、UCLA NPA-87-1细胞
HTR8/SVneo细胞系相关产品:COS7细胞、P19细胞、Hela-Ap-1细胞
NCIH1155细胞系相关产品:LS 1034细胞、IEC18细胞、Opossum Kidney细胞
FRhK4细胞系相关产品:NCIH508细胞、CCLP-1细胞、Tn 5B1-4细胞
JIMT细胞系相关产品:HECV细胞、OCILY19细胞、SUPB15细胞
SN12-PM6细胞系相关产品:Panc08.13细胞、CNE-1细胞、108CC15细胞
GM04678细胞系相关产品:P388细胞、L cells (TK-)细胞、GCT细胞
NCIH2228细胞系相关产品:KCL-22细胞、FHL-124细胞、ZYM-SVEC01细胞
SK MES 1细胞系相关产品:OVCAR.3细胞、D-283MED细胞、LNCaP C4-2细胞
Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50细胞系相关产品:Hs822T细胞、SNU-449细胞、U266 B1细胞
KLN205细胞系相关产品:HeLa S 3细胞、ES-2细胞、H9c2 (2-1)细胞
MIMVEC细胞系相关产品:A2780细胞、CCLP1细胞、SW-780细胞
MOLM-16细胞系相关产品:McA-RH8994细胞、Hs 766T细胞、L-428细胞
KMM1细胞系相关产品:RMS1598细胞、SACCLM细胞、Hs-578T细胞
hRPTC细胞系相关产品:PANC0504细胞、Medical Research Council cell strain-9细胞、KCL-22细胞
hFOB细胞系相关产品:H.Ep. No. 2细胞、NCI-446细胞、COV 504细胞
LUDLU1细胞系相关产品:OCILY3细胞、CT-26 WT细胞、K562细胞
THLE-2细胞系相关产品:TALL-1 [Human adult T-ALL]细胞、EBC-1细胞、NPC-TW039细胞
SK-ChA1细胞系相关产品:Sc-1细胞、BetaTC6细胞、SCaBER细胞
NCIH1876细胞系相关产品:OP-9细胞、HO1-N1细胞、NCI H2106细胞
PK 15细胞系相关产品:MDCC-MSB1细胞、HCC95细胞、Panc 3.27细胞
OVCAR5细胞系相关产品:SK-NSH细胞、C3H10T1/2 clone8细胞、H524细胞
CHP100细胞系相关产品:NIH:OVCAR-5细胞、NCI-1155细胞、PLB985细胞
GM637细胞系相关产品:OCI-Ly19细胞、DMS273细胞、H865细胞
SN4741细胞系相关产品:Tb1.Lu细胞、Tn-5细胞、Fetal Human Lens-124细胞
Hs888 Lu细胞系相关产品:NE-4C细胞、NTERA-2 cl.D1细胞、Ca9-22细胞
SF17细胞系相关产品:HCC2157细胞、OCI-Ly3细胞、SK-N-BE-2细胞
H-250细胞系相关产品:H520细胞、Functional Liver Cell-7细胞、OUMS-27细胞
alphaTC1 Clone 6 Cell:小鼠胰岛素瘤胰岛a细胞系
IOSE-29细胞系相关产品:LTEP-a-2细胞、SNU-C2B细胞、MAntle cell VERona-1细胞
RPMI2650细胞系相关产品:H747细胞、HEC-1-A细胞、HS688AT细胞
Hs-600-T细胞系相关产品:H-1781细胞、TMK1细胞、FM88细胞
DMS-79细胞系相关产品:U031细胞、AM38细胞、UMUC1细胞
MC 116细胞系相关产品:GM06141细胞、KFB细胞、MH-S细胞
P3JHR1细胞系相关产品:CEMC7细胞、ECC-10细胞、JB6Cl30细胞
Hs683T细胞系相关产品:H1836细胞、PBL细胞、HTori3细胞
S16细胞系相关产品:MS751细胞、Hep 3B2细胞、BEL-7404细胞
KOSC-2细胞系相关产品:OAW42细胞、Mel-MeWo细胞、T-ALL-1细胞
REC1细胞系相关产品:MKN-7细胞、HEMCSS细胞、CEM clone 7细胞
RCSMC细胞系相关产品:OVCAR.8细胞、H-2073细胞、LAN-5细胞
High Five细胞系相关产品:KLN-205细胞、Molm 14细胞、HS-294T细胞
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