"DrG Cell:大鼠背根神经细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:背根神经细胞
NCI-H1341细胞系相关产品:SNU-407细胞、Case 3细胞、Dysplastic Oral Keratinocyte细胞
NCIH196细胞系相关产品:YES 2细胞、AZ521细胞、ZR75-1细胞
RBE细胞系相关产品:IGROV-1细胞、HEK 293 c18细胞、NS1-Ag4/1细胞
SK-N-BE细胞系相关产品:ROS 17/2.8细胞、CCD841CoN细胞、KYSE-410细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
DrG Cell:大鼠背根神经细胞系
如何把细胞养的形态更好更漂亮。1.不同的细胞,喜欢的环境是不一样的。这个不仅仅是说培养基的不同,还有就是细胞生长的空间密度问题。有一些细胞是数量多一点比较好生长,生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好,譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞,生长速度非常得快,贴壁速度很快,所以传代时就应该留很少量的细胞,这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长,而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候,细胞形态基本上就会差了,老化的会比较多,对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。2.对于有些人总是会遇到养的细胞形态怎么都不好的问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞,如果细胞形态不好,(或者细胞形态不清晰,表面似有异物等)可以在传代的时候进行如下操作:首先,倒掉旧的培养基,加入3ml新的培养基(有无血清的都可)洗涤一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培养基,进行预吹打,控制吹打力度,轻轻地大概沿着瓶底过一遍,然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。(巨噬细胞我们只吹打,不消化的);其次,把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内,培养瓶事先加入培养基,放入培养箱内培养,按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次,20分钟,30分钟观察一次。选择一个时间点,已经有部分细胞贴壁的情况下,重新置于洁净台,底面朝上迅速倒出其中的培养基,加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。我称之为“二传”。呵呵。如果一次效果还不理想,可重复多次。直到找到细胞完美形态。其中要注意,结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。3.关于培养瓶内加入培养基的量的问题。这个是要靠自己去摸索你所养的细胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些细胞反而是培养基少一点相反细胞形态会长得比较好。(可能也是竞争很大,有优胜劣汰吧。呵呵。)对于生长速度快的细胞,易生长的细胞加少一点培养基细胞形态会更好。但是要注意换液掌握。4.关于选择培养瓶的问题。个人发现生长速度快的细胞在玻璃瓶内生长的状态会比一次性相对好一些。而对于同一种细胞,在其生长旺盛快速的时期在玻璃瓶内的生长状态也比内好。这可能是因为比玻璃瓶更容易贴壁。生长速度快的细胞在这种相对“更安逸”的环境里反而长得状态不如玻璃瓶好。所以对于生长速度慢的细胞如果想要更漂亮的细胞状态,比玻璃瓶会好,对于生长速度慢的细胞,玻璃瓶则会更好。同样,对于同一种细胞,在其生长速度慢的时候,会好一点,比如刚刚复苏的时候,或者原代培养的时候。而在其生长旺盛的时候,玻璃瓶则相对会好一点。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
为什么培养的细胞要及时传代?体外培养的细胞大多具有生长接触抑制的特性,也就是说当一个细胞被其他细胞包围的时候,它就会停止生长,及时传代后,细胞的生长得以继续。培养细胞生长减慢的原因在哪些?其解决办法有哪些?可能的原因有:更换了不同的培养液或血清;培养液中一些细胞生长必需成分如谷眈肢或生长因子等耗尽或缺乏或己被破坏;培养物中有少量细菌或真菌污染;试剂保存不当;比较新培养液与原培养液成分,比较新血清与旧血清等,找出其它可能的原因。解决办法:增加起始培养细胞浓度;让细胞逐渐适应新培养液;换入新鲜配制培养液;补加谷酷肢或生长因子等;用无抗生素培养液培养,如发现污染,去弃培养物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培养液需在2-8℃避光保存;含血清完全培养液在2-8℃保存,并在2周内用完;分离培养物,检测支原体。冷冻管应如何解冻?取出冷冻管后,须立即放入37℃水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在1-2分钟内大部分融化,特别注意,需残留一小块冰块,就可拿到超净工作台操作细胞,用75%酒精消毒冻存管,用新鲜培养基将细胞转移至培养瓶。另外冷冻管由液氮桶中取出解冻时,必须注意安全,预防冷冻管爆裂。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HL 60细胞系相关产品:SW 948细胞、B-104细胞、RERFLCMS细胞
TM-3细胞系相关产品:LS174细胞、3T3-A31细胞、746T细胞
PCI-4M细胞系相关产品:hTERT RPE1细胞、52PE细胞、WM451Lu细胞
MCMEC细胞系相关产品:IB-RS2细胞、HUT28细胞、PC-3/M细胞
PC9细胞系相关产品:CNE1细胞、HME-1细胞、SU-DHL-6细胞
细胞生长特性:贴壁
DrG Cell:大鼠背根神经细胞系
细胞冻存复苏材料与方法步骤:常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器,规格有35L和50L两种。使用时要注意以下几点:(1)一般两周需充液氮一次,至少一个月充氮一次。液氮温度达-196℃,使用时注意勿让液氮溅到皮肤上,以免引起冻伤。(2)液氮容器为双层结构,中间为真空层,瓶口有双层焊接处,应防止焊接部裂开。(3)在装入液氮时,要注意缓慢小心,并用厚纸卷筒或特制漏斗作引导,使液氮直达瓶底,如有专用液氮灌注装置则更好。若为初次使用,加液氮时更要缓慢,以免温度骤降而使容器损坏。细胞冻存时常备的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培养液,DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油(121°C蒸气高压消毒),2mL安瓿(或专用细胞冻存管)、吸管、离心管、喷灯、纱布袋(或冻存管架)等。主要操作步骤为:(1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为3×106~1×107/mL之间。(3)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中,安瓿装1~1.5mL在火焰喷灯上封口,封口处要完全封闭,圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(4)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜,次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤:先将安瓿置入4℃冰箱中2~3小时,再移至冰箱冷冻室内3~4小时,再吊入液氮容器颈气态部分存放2小时,最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,取出一只安瓿细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。
细胞形态特性:详见细胞说明书
RCC_7860细胞系相关产品:U-2 OS细胞、IOSE80UBC细胞、OLN93细胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5细胞系相关产品:H-676B细胞、Centre Antoine Lacassagne-148细胞、RIN-m 14B细胞
NCI-H102细胞系相关产品:KHYG1细胞、B/C3T3细胞、WIL2 S细胞
RCC-10RGB细胞系相关产品:Caco-2细胞、HCC0038细胞、NHLF细胞
VE细胞系相关产品:GC-2spd(ts)细胞、LM3细胞、EA.Hy926细胞
KE 37细胞系相关产品:SU-DHL-4细胞、NCI-H747细胞、KP-N-RT细胞
PTK1细胞系相关产品:UPCISCC154细胞、CHP 100细胞、GLRK 13细胞
DrG Cell:大鼠背根神经细胞系
NCI H69细胞系相关产品:SU.86.86细胞、CAL51细胞、SNU-387细胞
H1299细胞系相关产品:C-4-I细胞、Jurkat细胞、T8细胞
NCI-H676B细胞系相关产品:J82细胞、CPAE细胞、A-427细胞
HuH6细胞系相关产品:Mel526细胞、LC1细胞、Wistar Institute, Susan Hayflick细胞
HSC-6细胞系相关产品:PC3M-2B4细胞、OVCAR.8细胞、Ca Ski细胞
CCRF-CEM C7细胞系相关产品:1301细胞、Colon 26细胞、Alexander细胞
WEHI231细胞系相关产品:LICR-HN6细胞、McA-RH 7777细胞、VMRC-RCZ细胞
H22细胞系相关产品:KYSE 70细胞、Y3Ag1.2.3细胞、Glioma 261细胞
MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞系相关产品:SHP-77细胞、JF305细胞、SKMEL28细胞
MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞系相关产品:SHP-77细胞、JF305细胞、SKMEL28细胞
SU-DH-L5细胞系相关产品:PC 61细胞、RetroPack PT67细胞、EBTr细胞
HCC1500细胞系相关产品:OEC33细胞、HTR-8/SV neo细胞、H1417细胞
JHH2细胞系相关产品:DMS 153细胞、KCL22细胞、675T细胞
HFT 8810细胞系相关产品:CAL-85-1细胞、MPC 11细胞、HEC-151细胞
NR8383细胞系相关产品:HAPI细胞、WM 451-Lu细胞、HEK293细胞
HEK 293-EBNA细胞系相关产品:HIT clone T15细胞、NCIH211细胞、SUM-52-PE细胞
OK-WT细胞系相关产品:BBE细胞、AML-193细胞、PLA-801C细胞
B16-F10-BL6细胞系相关产品:OVCAR.4细胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative细胞、NP69细胞
SPDC-CCL141细胞系相关产品:CCC-HEH-2细胞、CHP-126细胞、LTEP a2细胞
L 1210细胞系相关产品:BHP10-3细胞、NCI-SNU-5细胞、NCI-H2073细胞
PLCPRF5细胞系相关产品:SCL-II细胞、QBC939细胞、L929(NCTC)细胞
GM00637H细胞系相关产品:A101D细胞、SUDHL16细胞、IM-95细胞
H-1693细胞系相关产品:3 LL细胞、Hs 274细胞、IHH4细胞
MGH-U3 (RN)细胞系相关产品:P3X63Ag8细胞、MCF-10 Attached细胞、BV-173细胞
DHL8细胞系相关产品:Rat Chondrosarcoma Swarm细胞、Hu-P-T4细胞、SBC5细胞
H-209细胞系相关产品:253J-BV细胞、UCLA RO-81A-1细胞、KS-1 [Human glioblastoma]细胞
SupB15WT细胞系相关产品:H-1944细胞、IGROV 1细胞、ME 180细胞
HTR-8/SVneo细胞系相关产品:DV-90细胞、hCMEC/D3细胞、PC-12细胞
DMS 79细胞系相关产品:SH-SY5Y Parental细胞、Cates-1B细胞、HN6细胞
T-ALL 1细胞系相关产品:ZR75-30细胞、NUGC-3细胞、OCI-Ly 19细胞
Vero-E6细胞系相关产品:LS-513细胞、KMH-2细胞、PSN1细胞
SNU-398细胞系相关产品:NOZ细胞、LICR-HN-6细胞、NF639细胞
TGW-I-nu细胞系相关产品:NOK细胞、N1E-115细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157细胞
CHO-K1细胞系相关产品:V 79细胞、MCF 7细胞、NCI-HUT-69细胞
MDAMB435S细胞系相关产品:Caco-2/BBe 1细胞、TOV21细胞、NCI-SNU-520细胞
ACT-1细胞系相关产品:LC-2-Ad细胞、SW1990细胞、H1688细胞
H-446细胞系相关产品:U251-MG细胞、Hs 888.T细胞、A9(Hamprecht)细胞
HPAFII细胞系相关产品:UM-UC-1细胞、SKG-3a细胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1细胞
CCD-1095Sk细胞系相关产品:SCC 9细胞、hFOB 1.19细胞、HCO细胞
MOLP-8细胞系相关产品:Hs 742.T细胞、HSC-4细胞、SNU475细胞
L-1210细胞系相关产品:Cattle chondrocytes细胞、3T3J2细胞、MJ细胞
HLEB-3细胞系相关产品:MM1细胞、Ramos-2G6-4C10细胞、U266B1细胞
CII细胞系相关产品:MLFC细胞、bEnd3细胞、HEL92.1.7细胞
DrG Cell:大鼠背根神经细胞系
NCI-H1404细胞系相关产品:THP-1细胞、159PT细胞、XWLC-05细胞
M20 [Human melanoma]细胞系相关产品:WM115细胞、MeT5A细胞、SUM 159细胞
HCT/Taxo1细胞系相关产品:NTERA2-D1细胞、RKN细胞、NW-MEL-38细胞
IPEC-1细胞系相关产品:P3 (Jiyoye)细胞、CCRF/CEM/0细胞、SKNO1细胞
COLO 205细胞系相关产品:H4-II-E细胞、SUM 102PT细胞、COLO_320DM细胞
SLMT1细胞系相关产品:L 428细胞、SK-N-F1细胞、HEC-1-B细胞
THP 1细胞系相关产品:HUT-226细胞、C2C12细胞、KMS-26细胞
RT-4细胞系相关产品:CCRFCEM细胞、HPDE6c7细胞、ASH-3细胞
Cates 1B细胞系相关产品:KP2细胞、67NR细胞、A549细胞
HCE-2 [50.B1]细胞系相关产品:G-401细胞、HRA-19细胞、NCIH378细胞
KCL22细胞系相关产品:GC9811-P细胞、EC-GI细胞、Hs27F细胞
LI7细胞系相关产品:BxPC-3细胞、HCA7细胞、HCT116/L细胞
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