"NP69SV40T Cell:人鼻咽上皮细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：鼻咽；上皮细胞；SV４０转化
BEL-7402细胞系相关产品：5-8F细胞、P-36细胞、Epithelioma Papulosum Cyprini细胞
SL-29细胞系相关产品：MB39细胞、LED-WiDr细胞、E0771细胞
Beta-TC-6细胞系相关产品：HEK 293-F细胞、2T细胞、OCI-Ly10细胞
TI-73细胞系相关产品：Hep 3B2.1-7细胞、KS-SLK细胞、P3J.HR1K细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
NP69SV40T Cell:人鼻咽上皮细胞系
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系，大部分的细胞都是要成片生长的，尤其是对于贴壁细胞，单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话，传代后细胞是不能贴壁的，这样抱团的细胞就会死亡。所以，消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态，这个啊是非常考究你的功夫的！细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个，因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开，受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊，这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来，又不能太过，一吹就整片脱落，要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-２细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到７０%左右的时候就要传代了，一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞，你在洗的时候如果是用无血清１６４０去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样，用１６４０培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话，可以用PBS来洗，洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的，对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清，防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先，是很关键的一点。先补充这么多，还会后续更新。再补充一点：传代时PBS洗是很重要的一步，最近发现，用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置１０-１５分钟，有些需要更长的时间，等到细胞一个个分离开来的时候，就可以直接吹打下来，但是和胰酶消化一样，要控制好时间，不能时间太过了，要不然损伤细胞，细胞不容易成活，状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候，或者临时没有胰酶了，可以选用此方法。不过一定要试试，看是否适合你的细胞。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
培养细胞真的不难，最关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，最近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
DLD-1细胞系相关产品：HCC1419细胞、BGC-823细胞、LS1034细胞
SR细胞系相关产品：RPMI 1788细胞、CaEs17细胞、MALME.3M细胞
A375SM细胞系相关产品：PBMC细胞、MKN-7细胞、SLMT1细胞
CaES-17细胞系相关产品：MDA453细胞、MNNGHOS细胞、H211细胞
BL2141细胞系相关产品：CAL148细胞、MOVAS-1细胞、PL 45细胞
细胞生长特性：贴壁
NP69SV40T Cell:人鼻咽上皮细胞系
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞形态特性：详见细胞说明书
Panc02-H0细胞系相关产品：PANC-08-13细胞、Y-1细胞、VA-ES-BJ细胞
COLO 320 DM细胞系相关产品：HT 1197.T细胞、WPMY1细胞、SK-MEL-2-LUC细胞
NCI-H295细胞系相关产品：NCIH2141细胞、HUC-1细胞、Keio University-19-19细胞
Vero 76 clone E-6细胞系相关产品：SK HEP 01细胞、JEKO细胞、SKNSH细胞
CAOV3细胞系相关产品：CEL细胞、ACHN细胞、B16-F1细胞
SUM 190细胞系相关产品：SV-HUC-1细胞、SH-SY5Y Parental细胞、HPAF-II/CD18细胞
RPE1-hTERT细胞系相关产品：H1993细胞、FRTL 5细胞、A2780S细胞
NP69SV40T Cell:人鼻咽上皮细胞系
HCM细胞系相关产品：HEK-AD293细胞、AG 9细胞、WIL2-S细胞
Raji细胞系相关产品：VAESBJ细胞、Hs737T细胞、HGC-27细胞
MCF-7B细胞系相关产品：Jurkat E6.1细胞、TFK-1细胞、NCIH1703细胞
HC11细胞系相关产品：MM6细胞、HEC-251细胞、NUGC4细胞
OACP4 C细胞系相关产品：H1581细胞、LLCPK1细胞、MOLT4细胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2细胞系相关产品：HFB细胞、PL-5细胞、MCF 7B细胞
HEK-293F细胞系相关产品：Jurkat E6细胞、FTC-133细胞、COLO 320DM细胞
VMM39细胞系相关产品：A498细胞、SK-ML2细胞、KCL22细胞
HMSC细胞系相关产品：A2780CP细胞、SNU-387细胞、KU.812细胞
HMSC细胞系相关产品：A2780CP细胞、SNU-387细胞、KU.812细胞
MHCC 97-H细胞系相关产品：NIT-1细胞、SW-626细胞、16HBEo-细胞
RPMI 8226/S细胞系相关产品：AC16 [Human hybrid]细胞、NCIH1650细胞、PANC-1细胞
NCI N87细胞系相关产品：MGC-803细胞、MV4-11细胞、NCIH208细胞
Jeko1细胞系相关产品：Mel-RM细胞、MMVECs细胞、ChaGo-K1细胞
H-660细胞系相关产品：P3X63细胞、WM266mel细胞、Y3-Ag123细胞
NALM 6细胞系相关产品：MDA-1386细胞、BT-549细胞、EC-109细胞
H211细胞系相关产品：UCLA-SO-M21细胞、HCa/16A3-F细胞、HGE细胞
NCIH1184细胞系相关产品：AU-565细胞、H498细胞、H-847细胞
HEK 293FT细胞系相关产品：CBRH7919细胞、HBE细胞、IAR 20细胞
Hs695细胞系相关产品：NB4细胞、C-33-A细胞、M109细胞
RCC10细胞系相关产品：LAPC4细胞、H2108细胞、P116细胞
RCC10细胞系相关产品：LAPC4细胞、H2108细胞、P116细胞
CEK细胞系相关产品：BEAS 2B细胞、HS 445T细胞、Calu-1细胞
L78细胞系相关产品：L929(NCTC)细胞、HEC-151细胞、MCF-12F细胞
HL7702细胞系相关产品：HPAFII细胞、MCAEC细胞、H-1373细胞
H-889细胞系相关产品：NCI-H1930细胞、NS-I/1细胞、SCL-1细胞
M-1 myeloid leukemia细胞系相关产品：NCI H69细胞、H69/P细胞、RAT2细胞
RBL-I细胞系相关产品：PFSK1细胞、B16细胞、Institute for Medical Research-32细胞
RPMI.8226细胞系相关产品：NCIH250细胞、KYSE 50细胞、KMB 17细胞
Nthy ori 3.1细胞系相关产品：SKOV-3细胞、CAMA1细胞、RDES细胞
HMC细胞系相关产品：CEM-CCRF (CAMR)细胞、624 MEL细胞、GM2132细胞
HCC2218细胞系相关产品：Hs 819.T细胞、rHSC-99细胞、HCC-78细胞
Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1细胞系相关产品：PC 12细胞、NCI-H810细胞、Hs 578.T细胞
H2405细胞系相关产品：BALL-1细胞、C3H/10T1/2 CL8细胞、P3 NS1 Ag4细胞
P31-FUJ细胞系相关产品：801-D细胞、HCT 15细胞、SL-29细胞
BHK-21细胞系相关产品：QGP 1细胞、U266-B1细胞、SUM-190细胞
CCD19Lu细胞系相关产品：Kasumi-1细胞、McA-RH7777细胞、Kit-225细胞
OC 316细胞系相关产品：SF-539 BT细胞、Nittby-Salford 1细胞、MNNG-HOS (Cl#5)细胞
NCIH820细胞系相关产品：HBE细胞、SNU-668细胞、SKBr3细胞
ML-2细胞系相关产品：CAMA细胞、H2452细胞、NCIH508细胞
Baby Hamster Kidney-21细胞系相关产品：UMC-11细胞、SW527细胞、HCC4006细胞
C4 I细胞系相关产品：Alexander cells细胞、CWR-22rv1细胞、CC-LP-I细胞
GES-1细胞系相关产品：HCET细胞、PC-14细胞、GI-1细胞
NP69SV40T Cell:人鼻咽上皮细胞系
TPC-1细胞系相关产品：OUMS23细胞、D407 RPE细胞、RTE细胞
U-343-MG细胞系相关产品：OUMS-27细胞、CMT 93细胞、H1568细胞
HLEB-3细胞系相关产品：MM1细胞、Ramos-2G6-4C10细胞、U266B1细胞
HT-55细胞系相关产品：BT-474细胞、NS1/1-Ag4.1细胞、HLEB-3细胞
WM 115细胞系相关产品：FU-OV-1细胞、N-2a细胞、BT325细胞
Eph4 1424细胞系相关产品：HDMEC细胞、RBMVEC细胞、LC-2-Ad细胞
HEK-293-H细胞系相关产品：LK-2细胞、Reh细胞、SHG 44细胞
MCF-7/AdrR细胞系相关产品：RPMI no 8226细胞、NCIH28细胞、HBE135-E6E7细胞
H196细胞系相关产品：WM-2664细胞、HcaF细胞、GM01232细胞
251MG细胞系相关产品：Hs-578T细胞、IMCD-3细胞、HN 4细胞
NCIH1437细胞系相关产品：H1385细胞、Madison lung细胞、PL11细胞
AN3-CA细胞系相关产品：UCLA-SO-M20细胞、DH 82细胞、HMC细胞
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