"M20 [Human melanoma] Cell:人胚胎皮肤细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：黑色素瘤
LN-229细胞系相关产品：RGCs细胞、786-0细胞、hSCC-25细胞
VM-CUB-I细胞系相关产品：SHIN-3细胞、HFL 1细胞、HOS(TE85)细胞
M-1 myeloid leukemia细胞系相关产品：NCI H69细胞、H69/P细胞、RAT2细胞
PC-3细胞系相关产品：Lec1细胞、C57 Mouse Tumor 93细胞、H2141细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
M20 [Human melanoma] Cell:人胚胎皮肤细胞系
细胞培养过程中相关问题总结：悬浮性细胞应如何继代处理？一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，可将培养角瓶口端稍微抬高，直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶，加入新鲜培养基稀释至适当浓度，重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００xg(约１,０００rpm)，５-１０分钟，过高之转速，将造成细胞死亡；细胞之接种密度为何？依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因；细胞冷冻培养基之成份为何？动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意：由于DMSO稀释时会放出大量热能，故不可将DMSO直接加入细胞液中，必须使用前先行配制完成；DMSO之等级和无菌过滤之方式为何？冷冻保存使用之DMSO等级，必须为Tissue culture grade之DMSO，其本身即为无菌状况，次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于４°C，避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质，并可减少污染之机会。若要过滤DMSO，则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜；冷冻保存细胞之方法？冷冻保存方法一：冷冻管置于４°C ３０~６０分钟→ (-２０°C ３０分钟)→-８０°C １６~１８小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase长期储存。-２０°C不可超过１小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度？冷冻管内细胞数目一般为１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤细胞则以５x１０(６)cells/ml vial为宜；应如何避免细胞污染？细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法；如果细胞发生微生物污染时，应如何处理？直接灭菌后丢弃之。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
为什么培养的细胞要及时传代？体外培养的细胞大多具有生长接触抑制的特性，也就是说当一个细胞被其他细胞包围的时候，它就会停止生长，及时传代后，细胞的生长得以继续。培养细胞生长减慢的原因在哪些?其解决办法有哪些？可能的原因有：更换了不同的培养液或血清；培养液中一些细胞生长必需成分如谷眈肢或生长因子等耗尽或缺乏或己被破坏；培养物中有少量细菌或真菌污染；试剂保存不当；比较新培养液与原培养液成分，比较新血清与旧血清等，找出其它可能的原因。解决办法：增加起始培养细胞浓度；让细胞逐渐适应新培养液；换入新鲜配制培养液；补加谷酷肢或生长因子等；用无抗生素培养液培养，如发现污染，去弃培养物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培养液需在２-８℃避光保存;含血清完全培养液在２-８℃保存，并在２周内用完;分离培养物，检测支原体。冷冻管应如何解冻？取出冷冻管后，须立即放入３７℃水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在１-２分钟内大部分融化，特别注意，需残留一小块冰块，就可拿到超净工作台操作细胞，用７５%酒精消毒冻存管，用新鲜培养基将细胞转移至培养瓶。另外冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管爆裂。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
RCM1细胞系相关产品：J-82细胞、RMS 1598细胞、Laboratory of Allergic Diseases 2细胞
D-341Med细胞系相关产品：MT2细胞、hTERT-HPNE细胞、RPMI #8226细胞
EoL-1细胞系相关产品：MEG-01细胞、U-138-MG细胞、C-Li-7细胞
H-1581细胞系相关产品：NCI-H841细胞、HLE细胞、YH细胞
OE-21细胞系相关产品：Colon26细胞、Jurkat E6.1细胞、H250细胞
细胞生长特性：贴壁
M20 [Human melanoma] Cell:人胚胎皮肤细胞系
细胞冻存复苏材料与方法步骤：常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器，规格有３５L和５０L两种。使用时要注意以下几点：(１)一般两周需充液氮一次，至少一个月充氮一次。液氮温度达-１９６℃，使用时注意勿让液氮溅到皮肤上，以免引起冻伤。(２)液氮容器为双层结构，中间为真空层，瓶口有双层焊接处，应防止焊接部裂开。(３)在装入液氮时，要注意缓慢小心，并用厚纸卷筒或特制漏斗作引导，使液氮直达瓶底，如有专用液氮灌注装置则更好。若为初次使用，加液氮时更要缓慢，以免温度骤降而使容器损坏。细胞冻存时常备的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培养液，DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油(１２１°C蒸气高压消毒)，２mL安瓿(或专用细胞冻存管)、吸管、离心管、喷灯、纱布袋(或冻存管架)等。主要操作步骤为：(１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为３×１０６～１×１０７/mL之间。(３)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装１～１.５mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(４)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入４℃冰箱中２～３小时，再移至冰箱冷冻室内３～４小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放２小时，最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
细胞形态特性：详见细胞说明书
MKN 45细胞系相关产品：hRPTC细胞、SK-MEL-2-LUC细胞、T2细胞
Madin Darby Bovine Kidney细胞系相关产品：LU65细胞、JB6 [Mouse]细胞、H1623细胞
GFP-Olig2细胞系相关产品：hTERT-RPE细胞、AML 12细胞、NCIH1618细胞
NF639细胞系相关产品：MKN74细胞、MDAPCa-2b细胞、SJRH 30细胞
H196细胞系相关产品：WM-2664细胞、HcaF细胞、GM01232细胞
Huh-7.5.1细胞系相关产品：L-cells细胞、NPA87细胞、SMA-560细胞
KMS26细胞系相关产品：Kuramochi细胞、NCI-441细胞、3T3 Swiss Albino细胞
M20 [Human melanoma] Cell:人胚胎皮肤细胞系
SCC 4细胞系相关产品：JTC-39细胞、RSC96细胞、Z-138细胞
CEF细胞系相关产品：Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A细胞、343 MG细胞、MALME 3M细胞
MT2细胞系相关产品：HS-294-T细胞、BIU87细胞、DMS273细胞
NCIH2023细胞系相关产品：CHP 100细胞、COLO 206细胞、Glioma-261细胞
HeLa229细胞系相关产品：RT-BM-1细胞、CA-46细胞、OCI-Ly 7细胞
Nb2细胞系相关产品：C-4I细胞、C32-mel细胞、U-251MG细胞
COR L279细胞系相关产品：LAN-1细胞、BLO 11细胞、MDA-157细胞
NR8383.1细胞系相关产品：NCIH520细胞、COC1/CDDP细胞、A2058细胞
Ra No. 1细胞系相关产品：Hs 852.T细胞、Li-7细胞、TCC-SUP细胞
Ra No. 1细胞系相关产品：Hs 852.T细胞、Li-7细胞、TCC-SUP细胞
NT2D1细胞系相关产品：GAK细胞、NL20SV细胞、D10细胞
H3255细胞系相关产品：RCC-4细胞、KP4细胞、KU-812F细胞
RM-1细胞系相关产品：ChaGo K-1细胞、HOP-92细胞、159PT细胞
PANC 327细胞系相关产品：HepG2/C3A细胞、PC-3M IE8细胞、2E8细胞
Colon 38细胞系相关产品：SKMEL-31细胞、Ls-174-T细胞、SkMel31细胞
HCFB（HCF）细胞系相关产品：WEHI-231细胞、MG63细胞、OVCAR 420细胞
MCF-7细胞系相关产品：MONO-MAC 6细胞、NCIH1436细胞、LS 513细胞
NCI-SNU-423细胞系相关产品：CNE2细胞、JKT-1细胞、PMVEC细胞
H-676B细胞系相关产品：MHCCLM3细胞、MN-9D细胞、NT2-D1细胞
beta TC6细胞系相关产品：RPMI1788细胞、HUVEC-C[HUVEC]细胞、STTG1细胞
Bac 1.2F5细胞系相关产品：130-T细胞、K422细胞、NTERA-2cl.D1细胞
COLO 829细胞系相关产品：F81细胞、Swiss3T3细胞、SK-UT-1细胞
FM88细胞系相关产品：BaF3细胞、NCTC-1469细胞、SKO007细胞
SF 539细胞系相关产品：SNU739细胞、HTR-8/SV-neo细胞、NH6细胞
COS-7细胞系相关产品：U-87MG细胞、HS-695T细胞、TE-9细胞
Farage Original Line细胞系相关产品：IOSE-Van细胞、HO1N1细胞、HEL 299细胞
H378细胞系相关产品：McA-RH 8994细胞、H-929细胞、293H细胞
He-La细胞系相关产品：NCI-H1703细胞、J 82细胞、THP1细胞
Panc203细胞系相关产品：SCH细胞、HCASMC细胞、Human podocyte细胞
SF763细胞系相关产品：H510A细胞、MONO-MAC 6细胞、PBMC细胞
CA 46细胞系相关产品：D283 Med细胞、WERI-Rb 1细胞、Colo741细胞
C8D1A细胞系相关产品：NCIH1930细胞、HELA-GFP细胞、Dunn LM8细胞
EBC-1细胞系相关产品：HCMEC细胞、Institute for Medical Research-32细胞、NCI-H650细胞
VMCUB-1细胞系相关产品：Huh 7.5.1细胞、NB1RGB细胞、NOR10细胞
SN12C-PM6细胞系相关产品：NBL-5细胞、SK-N-FI细胞、Strain KB细胞
CAL 12细胞系相关产品：PTK2细胞、HO8910/PM细胞、IPLB-SF 21细胞
293-F细胞系相关产品：PC3M-IE8细胞、JIII细胞、C8161细胞
TE671细胞系相关产品：AU-Mel细胞、SK.MEL.28细胞、Y3.AG.1.2.3细胞
L 428细胞系相关产品：SNU475细胞、HCC-1833细胞、QGP1细胞
RFL6细胞系相关产品：HT-1197细胞、CAKI.1细胞、COLO 738细胞
HM细胞系相关产品：HCC1143细胞、P388D1细胞、SK-Mel 1细胞
WERIRb1细胞系相关产品：Clone 15 HL-60细胞、HCC0070细胞、Ly18细胞
P3/X63/Ag8.653细胞系相关产品：TE-5细胞、CTLL2细胞、CD18/HPAF细胞
M20 [Human melanoma] Cell:人胚胎皮肤细胞系
HT-1197细胞系相关产品：766T细胞、GA-10 (Clone 4)细胞、HCT-8/V细胞
VB细胞系相关产品：NCI-H526细胞、H-2452细胞、CCC-HEH-2细胞
Kato-III细胞系相关产品：Ramos 1细胞、Mel-RM细胞、ME180细胞
MC3T3E1细胞系相关产品：Panc10.05细胞、RH7777细胞、UT7细胞
ARO-81细胞系相关产品：CT-26细胞、RCC4细胞、SK-N-BE(1)细胞
NCI-BL2141细胞系相关产品：UO31细胞、H3255_DA细胞、HO8910/PM细胞
Hs 675.T细胞系相关产品：PanC1细胞、KYSE-270细胞、NHEK细胞
P30/OHK细胞系相关产品：WSU-HN13细胞、LCD细胞、PAEC细胞
HRPEpiC细胞系相关产品：HDQ-P1细胞、RSC-364细胞、QBI-HEK 293A细胞
Potorous tridactylus Kidney 2细胞系相关产品：KYSE30细胞、RCC 7860细胞、Farage细胞
SKMel-5细胞系相关产品：WC00097细胞、Hepatoma-22细胞、HL-1细胞
WRL 68细胞系相关产品：RAT2细胞、A9细胞、NCI-H378细胞
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