"MLE-12 Cell:小鼠肺上皮细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：肺；上皮细胞；SV４０转化；FVB/N
HDLM-2细胞系相关产品：MHCC-97细胞、D407细胞、H2106细胞
THLE-2细胞系相关产品：TALL-1 [Human adult T-ALL]细胞、EBC-1细胞、NPC-TW039细胞
HEK-293细胞系相关产品：Ramos 2G6.4C10细胞、OCI-Ly19细胞、NPA'87细胞
MM1.S细胞系相关产品：TKB1细胞、LM8细胞、V-79细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
MLE-12 Cell:小鼠肺上皮细胞系
细胞的冻存：目前，细胞冻存最常用的技术是液氮冷冻保存法，主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。主要操作步骤为：(１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为３×１０(６)～１×１０(７)/mL之间。(３)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装１～１.５mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(４)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入４℃冰箱中２～３小时，再移至冰箱冷冻室内３～４小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放２小时，最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
培养细胞真的不难，最关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，最近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
C3H-10T1/2细胞系相关产品：MUTZ-3细胞、ATN1细胞、Hs 281.T细胞
NUGC-3细胞系相关产品：H-735细胞、MOLT 16细胞、HTR-8/SV neo细胞
UACC893细胞系相关产品：H-841细胞、HEK-293FT细胞、CCRF-CEM/S细胞
MOLT.4细胞系相关产品：H295细胞、A2780S细胞、DCS细胞
Human Fetal Thymocyte-8810细胞系相关产品：HCC-1569细胞、H-69细胞、KATO III细胞
细胞生长特性：贴壁
MLE-12 Cell:小鼠肺上皮细胞系
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞形态特性：详见细胞说明书
TOV-21G细胞系相关产品：H22-H8D8细胞、H865细胞、SNU-251细胞
OVCAR-432细胞系相关产品：SK-N-BE细胞、SKMEL24细胞、Human Embryonic Kidney 293细胞
HEL 299细胞系相关产品：H2085细胞、MM.1S细胞、L-5178-Y细胞
NCI-H1618细胞系相关产品：3396细胞、H-1417细胞、SNU-1细胞
HCC9204细胞系相关产品：BEL 7402细胞、RKO_AS45细胞、Roswell Park Memorial Institute 7666细胞
Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5细胞系相关产品：GM04671细胞、RKOE6细胞、CW2细胞
RPMI no 8226细胞系相关产品：NCIH82细胞、KYSE-450细胞、ARH77细胞
MLE-12 Cell:小鼠肺上皮细胞系
T-98细胞系相关产品：SKml2细胞、MKN-28细胞、MDCK Type II细胞
VMCUB1细胞系相关产品：H-508细胞、CEMC1细胞、PANC0403细胞
MEG-01细胞系相关产品：NCI-H165细胞、CAL 33细胞、LOU-NH91细胞
HEK (AD293)细胞系相关产品：WI 38细胞、HT 1197细胞、BAEC细胞
MDA-MB-231细胞系相关产品：KYSE70细胞、MLA-144细胞、CTX TNA2细胞
Ly10细胞系相关产品：SK-LU-1细胞、NRK 52E细胞、HT 144细胞
BMSC/hBMSCs细胞系相关产品：NCI-SNU-398细胞、H-820细胞、251MG细胞
SUM 52细胞系相关产品：MDA415细胞、SU86-86细胞、SKRC-20细胞
H3396细胞系相关产品：NCI-H1693细胞、KYSE 410细胞、WSU-DLCL(2)细胞
H3396细胞系相关产品：NCI-H1693细胞、KYSE 410细胞、WSU-DLCL(2)细胞
MPP89细胞系相关产品：HNEpC细胞、MBdSMC细胞、KS-SLK细胞
LA-N-1细胞系相关产品：HOP-62细胞、B16F10细胞、CHG-5细胞
SKLU-1细胞系相关产品：SK-Mel1细胞、WEHI 3细胞、D283-MED细胞
Super Tube细胞系相关产品：SCCVII/St细胞、COR-L23/P细胞、TE5细胞
AML193细胞系相关产品：NCIH146细胞、MOLP2细胞、GM01232E细胞
NEC8细胞系相关产品：EB3 [Human Burkitt lymphoma]细胞、Rca-B细胞、KYSE410细胞
WEHI-231细胞系相关产品：NCI-H2170细胞、CCC-HPF-1细胞、SW-900细胞
P388.D1细胞系相关产品：SKHEP1细胞、BT 549细胞、U-87MG ATCC细胞
C6661细胞系相关产品：MOLP-8细胞、THLE-3细胞、NS1细胞
SKBR-3细胞系相关产品：RPMI 1846细胞、NCIH2085细胞、RT-BM-1细胞
UMR-106细胞系相关产品：NK 10a细胞、T8细胞、HOS-TE85细胞
LS411细胞系相关产品：H-2195细胞、NCI-H1668细胞、HCC1954细胞
IHH4细胞系相关产品：NCTC929细胞、NCI-H1836细胞、VP267细胞
H719细胞系相关产品：CAL-78细胞、MV411细胞、HuT 78细胞
UMRC-2细胞系相关产品：RBL细胞、NCI-H740细胞、CMT-93细胞
DMS153细胞系相关产品：PL-9细胞、NCI-H1819细胞、SK-Mel1细胞
Panc_04_03细胞系相关产品：YD38细胞、J 111细胞、SNU-739细胞
HFB细胞系相关产品：SNU484细胞、SUSM-1细胞、BA/F3细胞
hRPTC细胞系相关产品：PANC0504细胞、Medical Research Council cell strain-9细胞、KCL-22细胞
H-2171细胞系相关产品：H-2030细胞、MO59J细胞、HIT T-15细胞
Factor Dependent Continuous-Paterson 1细胞系相关产品：Capan-1细胞、HIT.T15细胞、MB 157细胞
NCI-H1155细胞系相关产品：H-146细胞、MDCK-II细胞、RSMC细胞
MDA-MB435细胞系相关产品：BHK-21细胞、Me-Wo细胞、NCI-H1238细胞
E6-1细胞系相关产品：FRhK-4细胞、293 c18细胞、143 B细胞
Human Liver-7702细胞系相关产品：JiyoyeP-2003细胞、ATDC5细胞、LICR-HN-6细胞
PC-9S1细胞系相关产品：TK 10细胞、MDA-MB436细胞、RMG-I细胞
H-1563细胞系相关产品：NCI-H2023细胞、MIN6细胞、NCIH1568细胞
GM03571细胞系相关产品：Fetal Rhesus Kidney-4细胞、HCC-1395细胞、SU86.86细胞
WM-266-mel细胞系相关产品：H2066细胞、SK-RC-39细胞、SPC-A1细胞
Suzhou Human Glioma-44细胞系相关产品：52PE细胞、H-157细胞、B16 melanoma F10细胞
Suzhou Human Glioma-44细胞系相关产品：52PE细胞、H-157细胞、B16 melanoma F10细胞
22Rv-1细胞系相关产品：SGC7901细胞、HCC-70细胞、Monomac-1细胞
EoL-1 cell细胞系相关产品：Hs746-T细胞、NGP细胞、143BTK-细胞
MLE-12 Cell:小鼠肺上皮细胞系
OV-90细胞系相关产品：P3JHR-1细胞、RK-13细胞、OK-WT细胞
OVCA433_Bast细胞系相关产品：AE 1201细胞、Bat lung细胞、T1-73细胞
NCI-SNU-387细胞系相关产品：Scott and White No. 13细胞、SK-BR-3细胞、Y1细胞
BEAS2B细胞系相关产品：JOSK-M细胞、MCA 38细胞、WM-239-A细胞
PANC.1细胞系相关产品：HEK293T/17细胞、Kupffer细胞、SCC 9细胞
HPB-ALL细胞系相关产品：Eca 109细胞、H3396细胞、PCI-4.2细胞
NCI-H460细胞系相关产品：SK Mel28细胞、NCI-H1793细胞、SW 480细胞
CCD-1112sk细胞系相关产品：Renal Carcinoma细胞、Vertebral Cancer of the Prostate细胞、H727细胞
HCEC细胞系相关产品：HARAB细胞、VSC4.1细胞、B104 [Rat neuroblastoma]细胞
PG-LH7细胞系相关产品：RSMC细胞、T/GHA-VSMC细胞、CAL 78细胞
ACC-2细胞系相关产品：NCIH226细胞、U373 MG细胞、Pt K1 (NBL-3)细胞
LNCaP C4-2B细胞系相关产品：EB1细胞、H-847细胞、MRC-5细胞
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