"FHC Cell:人正常结直肠粘膜细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:胎儿;结肠;自发永生;男性
Y3-Ag1.2.3细胞系相关产品:HuH1细胞、NBL-1细胞、ETCC007细胞
RPE1-hTERT细胞系相关产品:H1993细胞、FRTL 5细胞、A2780S细胞
SW948细胞系相关产品:CL1-5细胞、Ramos 2G6.4C10细胞、Hs895T细胞
DH82细胞系相关产品:IM-95细胞、J774 A1细胞、NCIH1793细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
FHC Cell:人正常结直肠粘膜细胞系
细胞培养过程中相关问题总结:悬浮性细胞应如何继代处理?一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,可将培养角瓶口端稍微抬高,直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶,加入新鲜培养基稀释至适当浓度,重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来,其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞,其离心速率一般为300xg(约1,000rpm),5-10分钟,过高之转速,将造成细胞死亡;细胞之接种密度为何?依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因;细胞冷冻培养基之成份为何?动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意:由于DMSO稀释时会放出大量热能,故不可将DMSO直接加入细胞液中,必须使用前先行配制完成;DMSO之等级和无菌过滤之方式为何?冷冻保存使用之DMSO等级,必须为Tissue culture grade之DMSO,其本身即为无菌状况,次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中,保存于4°C,避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质,并可减少污染之机会。若要过滤DMSO,则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜;冷冻保存细胞之方法?冷冻保存方法一:冷冻管置于4°C 30~60分钟→ (-20°C 30分钟)→-80°C 16~18小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase长期储存。-20°C不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;细胞欲冷冻保存时,细胞冷冻管内应有多少细胞浓度?冷冻管内细胞数目一般为1x10(6)cells/ml vial,融合瘤细胞则以5x10(6)cells/ml vial为宜;应如何避免细胞污染?细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法;如果细胞发生微生物污染时,应如何处理?直接灭菌后丢弃之。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞冻存的步骤:1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为5×106~1×107/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具体要看培养的细胞类型来选择;3)将分装上述细胞悬液于2ml冻存管中,每管0.25ml。冻存管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数);4)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中,-80℃冰箱过夜。;如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后转到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,取出一只冻存管细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
D-324MED细胞系相关产品:SF 539细胞、A-875细胞、OE-33细胞
NCIH548细胞系相关产品:COLO 679细胞、HGC27细胞、NCI-H838细胞
NCTC clone 929细胞系相关产品:MDAMB157细胞、SU-DHL-1细胞、CCD19Lu细胞
LUDLU-1细胞系相关产品:HOP62细胞、SY5Y细胞、NCIH1734细胞
MAC1细胞系相关产品:MuM-2B细胞、HCC-1428细胞、SACC-LM细胞
细胞生长特性:贴壁
FHC Cell:人正常结直肠粘膜细胞系
细胞传代培养实验:体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代,以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞,并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后,由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭,将培养的细胞分散,从容器中取出,以1:2或1:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养,即为传代培养;细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间,与细胞世代或倍增不同。在一代中,细胞培增3~6次。细胞传代后,一般经过三个阶段:游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度,即细胞群的分裂相数/100个细胞。一般细胞分裂指数介于0.2%~0.5%,肿瘤细胞可达3~5%;细胞接种2~3天分裂增殖旺盛,是活力时期,称指数增生期(对数生长期),适宜进行各种试验。实验步骤:1.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出,在超净工作台中倒掉瓶内的培养液,加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜),静置5~10分钟。2.在倒置镜下观察被消化的细胞,如果细胞变圆,相互之间不再连接成片,这时应立即在超净台中将消化液倒掉,加入3~5ml新鲜培养液,吹打,制成细胞悬液。3.将细胞悬液吸出2ml左右,加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加3ml左右培养液,盖好瓶塞,送回二氧化碳培养箱中,继续进行培养。一般情况,传代后的细胞在2小时左右就能附着在培养瓶壁上,2~4天就可在瓶内形成单层,需要再次进行传代。
细胞形态特性:详见细胞说明书
P 815细胞系相关产品:SPCA1细胞、SNU354细胞、EU-3细胞
CL MC/9细胞系相关产品:HFL 1细胞、Walker256-TC细胞、NOR-10细胞
Metastatic Variant-522细胞系相关产品:NCI-H2291细胞、GH 3细胞、Granta 519细胞
CCD966SK细胞系相关产品:KYSE-150细胞、Hs821T细胞、YD38细胞
L-6 myoblast细胞系相关产品:P30-OHKUBO细胞、SKCO-1细胞、TALL-104细胞
HeLa 229细胞系相关产品:NTERA-2cl.D1细胞、LS 180细胞、FRTL5细胞
M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b细胞系相关产品:1E8-H细胞、H548细胞、Panc-03.27细胞
FHC Cell:人正常结直肠粘膜细胞系
3T3 L1细胞系相关产品:NL20SV细胞、IEC6细胞、NALM 6细胞
SW837细胞系相关产品:MRC 5细胞、293AD细胞、EBC-1细胞
MT4细胞系相关产品:B6Tert-1细胞、XWLC-05细胞、MRC-5细胞
alpha TC1.6细胞系相关产品:HO1N1细胞、MIN-6细胞、BC-024细胞
MHHCALL2细胞系相关产品:SK-MEL-24细胞、Mouse Forestomach Carcinoma细胞、WM35细胞
SNU449细胞系相关产品:BNL 1MEA.7R.1细胞、NCI-H1975细胞、HUC-1细胞
CD18/HPAF细胞系相关产品:NB-9细胞、RL95-2细胞、Chinese Hamster Lung细胞
V-79-4细胞系相关产品:HBZY 1细胞、C3H/10T1/2 clone 8细胞、A204细胞
Ramos (RA 1)细胞系相关产品:hESC细胞、K7M2 wt细胞、SW-1990细胞
RPTEC/TERT 1细胞系相关产品:RFL6细胞、NCIH1568细胞、Psi2 DAP细胞
NCI-HUT-460细胞系相关产品:TR-146细胞、ECV 304细胞、H-1869细胞
NCI-H2066细胞系相关产品:Panc_08_13细胞、Hs606T细胞、3T3细胞
H-2198细胞系相关产品:KMS-11细胞、NCCIT细胞、JJN-3细胞
MEG01细胞系相关产品:OVCAR4细胞、Hs706T细胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4细胞
A-549细胞系相关产品:MDAMB468细胞、HCC1937细胞、P30-OHK细胞
NCIH820细胞系相关产品:HBE细胞、SNU-668细胞、SKBr3细胞
HLEC-SRA 01/04细胞系相关产品:Hs675细胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8细胞、Hs940.T细胞
C-33 A细胞系相关产品:ST2细胞、KRC-Y细胞、VP 229细胞
MDA-MB 453细胞系相关产品:LoVo细胞、NCI-H727细胞、2780CP细胞
WC00059细胞系相关产品:GM01232细胞、LTEPa2细胞、NCI H157细胞
PANC 813细胞系相关产品:HCT GEO细胞、MESSADX5细胞、PM6细胞
IEC 6细胞系相关产品:NCI-H865细胞、H4细胞、Hs 606.T细胞
GM12878细胞系相关产品:KM-12细胞、COR-L26细胞、HDLM2细胞
HEK/293细胞系相关产品:VMM5A细胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed细胞、L-M[TK-]细胞
UCLA SO M14细胞系相关产品:H-220细胞、CEF细胞、C2BBe 1细胞
MPP 89细胞系相关产品:KY180细胞、Sp 2/0-Ag 14细胞、INS1细胞
Y3-Ag1.2.3细胞系相关产品:HuH1细胞、NBL-1细胞、ETCC007细胞
H1793细胞系相关产品:TGW-nu-1细胞、SVEC 4-10细胞、SK Mel 1细胞
JURKAT E-61细胞系相关产品:MT-4细胞、WM-2664细胞、HNEpC细胞
H1819细胞系相关产品:HEL细胞、NCI-H446细胞、NCI-H1395细胞
SK-MEL-31细胞系相关产品:CHO cell clone K1细胞、Centre Antoine Lacassagne-39细胞、PC 61.5.3细胞
LWnt3A细胞系相关产品:NCI-H2195细胞、NCI-H2330细胞、SGC-7901细胞
MOLT4细胞系相关产品:HME-1细胞、VeroE6细胞、Medical University of Graz-Chordoma 1细胞
38C13细胞系相关产品:YH细胞、P31-FUJ细胞、Tn5 B1-4细胞
AMO1细胞系相关产品:RKO-AS-45-1细胞、MHCC 97-L细胞、OPM2细胞
NCI-H1975细胞系相关产品:LS-174细胞、H-889细胞、Jurkat-E6细胞
HPAF-2细胞系相关产品:L Wnt-3A细胞、NCI-H2107细胞、HMC3细胞
HEL 92.1.7细胞系相关产品:MA104细胞、MSTO-211 H细胞、T-24细胞
G402细胞系相关产品:MOLP2细胞、TE353.SK细胞、PANC403细胞
SK-Col-1细胞系相关产品:H-1838细胞、NIE-115细胞、TYK-nu细胞
OC-3-VGH细胞系相关产品:SUDHL-6细胞、PJ34细胞、SUD-4细胞
T98G细胞系相关产品:RS4:11细胞、130T细胞、NSI/1-Ag4-1细胞
H-1792细胞系相关产品:Detroit 562细胞、NTERA-2 clone D1细胞、HuPT3细胞
FHC Cell:人正常结直肠粘膜细胞系
NCI-SNU-C2B细胞系相关产品:X63-Ag8细胞、SUM 52细胞、GL261细胞
HCC-1428细胞系相关产品:BNL-CL.2细胞、HFL1细胞、130-T细胞
NCI-H2030细胞系相关产品:TK+/- (clone 3.7.2C)细胞、H-2591细胞、BIU-87/Adr细胞
H1975细胞系相关产品:GM0637细胞、Spodoptera frugiperda clone 9细胞、Human Epidermoid carcinoma #2细胞
HuT 78细胞系相关产品:LS 174T细胞、SKMEL3细胞、ST细胞
RFL 6细胞系相关产品:BT 325细胞、HEC1-A细胞、SUM52细胞
NOR-10细胞系相关产品:ROS-17/2.8细胞、H146细胞、SKNFI细胞
Hs 606.T细胞系相关产品:NCI-SNU-16细胞、TM3细胞、HDSMC细胞
TGBC11TKB细胞系相关产品:NCIH2085细胞、NCTC-3960细胞、OVCAR-433细胞
HCC-1395细胞系相关产品:SCaBER细胞、MOLP8细胞、HO1-N1细胞
Sf21细胞系相关产品:U-251_MG细胞、NHRF细胞、HT-3细胞
HANK细胞系相关产品:BJAB-1细胞、MH-S细胞、Colon-26细胞
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