"HFF-1 Cell:人包皮成纤维细胞系
细胞形态:成纤维细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:详见相关文献介绍
Merwin Plasma Cell tumor-11细胞系相关产品:PAI细胞、SUM 190细胞、MCF12A细胞
COLO-679细胞系相关产品:TE-6细胞、H283细胞、3T3-442A细胞
HT29细胞系相关产品:SW 962细胞、OVCA-432细胞、HCT_116细胞
Hx-147细胞系相关产品:PLB 985细胞、MES-23.5细胞、PG-4细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
HFF-1 Cell:人包皮成纤维细胞系
细胞传代时消化的问题:可以这样说,对于需要消化传代的细胞,每一次的消化都是对这个细胞存活与否,状态好与不好最至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题,自己养的细胞开始的几代长的还挺好的,可是穿过几代之后就发现自己的细胞,状态越来越差劲了。对于这个问题,可以非常肯定地说,你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以,越长越差。在消化的过程中,你加入胰酶后,所有细胞都在被胰酶消化着,但是我们忽视了一个问题就是,细胞的生长状态是不一样的,每一个细胞的贴壁情况也是不一样的,有的贴壁牢固,有的贴壁没有那么牢固的,所以,让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的,他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。(以难消化细胞为例);具体操作:1)首先不加胰酶,倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍,(这是前奏,即为步,目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍,这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍,两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步(你可以将这些传入新瓶培养,以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。)3)吸干净瓶内剩余液体,加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍,吸掉弃之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察,待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净子弹头里备用,加入新培养基开始吹打,吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(你也可以传入新瓶培养,以与后面及前面的做对比。)这是第三步。4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶,如果你们那比较富裕的话,呵呵。继续镜下观察,待剩余细胞间隙明显,细胞独立开来的时候,吸掉胰酶,加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养(根据实际情况你自己把握)。这是第四步。其实还可以有第五步,对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话,你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态,更漂亮的样子,没办法,你必须分多批多次消化,这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到最低,保证细胞的状态能够。当然了,如果细胞是属于那种很容易消化的细胞,像RAW264.7,仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较,去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步,除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外,还有一个更重要的作用就是,可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态,不成片不连体。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:5-1:7传代
购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,原因比较复杂,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳;血清使用错误或血清的品质不佳;解冻过程错误;冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心;悬浑细胞误认为死细胞;培养温度使用错误;细胞置于-80℃太久等。建议严格参照ATCC的标准操作规程进行细胞复苏、冻存等工作。欲将一般动物细胞离心下来,其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞,其离心速率一般为300×g(约1OOOrpm),5-10分钟,转速过高或离心时间过长都将造成细胞死亡。合适的离心转速是根据相对离心力决定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r为离心机转轴中心与离心套管底部内壁的距离;rpm为离心机每分钟的转数;RCF(relative centrifugal force)为相对离心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍数来表示单位。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
A375.S2细胞系相关产品:DMS-153细胞、NH6细胞、NOZAWA细胞
P3HR1-BL细胞系相关产品:Pan02细胞、MCA-205细胞、SK-ES-1细胞
ATC241细胞系相关产品:HT 1080.T细胞、CA922细胞、MDBK细胞
HCC1171细胞系相关产品:Wistar Institute-38细胞、MiaPaCa-2细胞、DSL-6A/C1细胞
LLC细胞系相关产品:SK-RC 52细胞、Eca 109细胞、OCI-AML-2细胞
细胞生长特性:贴壁生长
HFF-1 Cell:人包皮成纤维细胞系
细胞株(系)的使用,为医学研究和测试工作带来了极大的方便。但细胞的传代是有限制的,长期连续传代的细胞,不仅消耗大量的人力和物力,而且细胞的生长与形态等会有一定退变或转化,因而细胞失去原有的遗传特性,有时还会由于细胞污染而造成传代中断,种子丢失。因此,在实际工作中常需冻存一定数量的细胞,以备替换使用。细胞冷冻与复苏是细胞培养 室的常规工作和通用技术。目前,细胞冻存最常用的技术是液氮冷冻保存法,主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。细胞在不加任何保护剂的情况下直接冷冻,细胞内外的水分会很快形成冰晶,从而引起一系列不良反应。如细胞脱水使局部电解质浓度增高,pH值改变,部分蛋白质由于上述原因而变性,引起细胞内部空间结构紊乱,溶酶体膜由此遭到损伤而释放出溶酶体酶,使细胞内结构成分造成破坏,线粒体肿胀,功能丢失,并造成能量代谢障碍。胞膜上的类脂蛋白复合体也易破坏引起细胞膜通透性的改变,使细胞内容物丢失。如果细胞内冰晶形成较多,随冷冻温度的降低,冰晶体积膨胀造成细胞核DNA空间构型发生不可逆的损伤,而致细胞死亡。因此,细胞冷冻技术的关键是尽可能地减少细胞内水分,减少细胞内冰晶的形成。采用甘油或二甲基亚砜作保护剂,这两种物质分子量小,溶解度大,易穿透细胞,可以使冰点下降,提高细胞膜对水的通透性,且对细胞无明显毒性。慢速冷冻方法又可使细胞内的水分渗出细胞外,减少胞内形成冰结晶的机会,从而减少冰晶对细胞的损伤。
细胞形态特性:成纤维细胞
MDCKII细胞系相关产品:NCI-H774细胞、EoL-1-cell细胞、HCE细胞
JB-6细胞系相关产品:H322细胞、NCIH740细胞、COLO 824细胞
IAR20细胞系相关产品:SW 1222细胞、WIL2-S细胞、NCIH1573细胞
C4-2细胞系相关产品:BC-024细胞、NCI-H1693细胞、MDAMB453细胞
ROS1728细胞系相关产品:T_T_细胞、SW962细胞、SW 954细胞
343MG细胞系相关产品:Fox/NY细胞、ECC-12细胞、BCP-1细胞
SW527细胞系相关产品:R3/1细胞、P3/NS-1细胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]细胞
HFF-1 Cell:人包皮成纤维细胞系
T/G HA VSMC细胞系相关产品:10T1/2细胞、AsPC-1细胞、HARAB细胞
RPMI7951细胞系相关产品:SK-N-BE(2)-C细胞、HT144细胞、TGW-nu细胞
NCIH1836细胞系相关产品:WM-451Lu细胞、HUT-125细胞、OVCAR 433细胞
NIH-3T3细胞系相关产品:TM-4细胞、CAL-85-1细胞、HA1800细胞
C3H 10T1/2细胞系相关产品:CA 46细胞、H2126细胞、HCC44细胞
686LN-M4e细胞系相关产品:HSC-2细胞、Dx5细胞、786-O RCC细胞
C3H10T1/2 clone8细胞系相关产品:COS-1细胞、MCF10A细胞、NCIH322细胞
HEC-1A细胞系相关产品:Oka-C1细胞、SK Col 1细胞、OEC33细胞
PFSK细胞系相关产品:NCI H548细胞、RAW264细胞、SUSM-1细胞
PFSK细胞系相关产品:NCI H548细胞、RAW264细胞、SUSM-1细胞
Human Corneal Epithelial cells-Transformed细胞系相关产品:NCIH1755细胞、NCI H69细胞、WEHI-3B细胞
SK-MEL-24细胞系相关产品:HL 60细胞、EM-3细胞、NuTu 19细胞
U-118-MG细胞系相关产品:KP4细胞、Hs611T细胞、NB-9细胞
D10细胞系相关产品:HDLM2细胞、ACC-2细胞、AAV293细胞
HUC细胞系相关产品:FK81细胞、HuT78细胞、OSK-1细胞
Jurkat-E6细胞系相关产品:Baby Hamster Kidney-21细胞、WM-451Lu细胞、NIH 3T6细胞
NCI-SNU-C2A细胞系相关产品:SU 86.86细胞、TE4细胞、TE4细胞
A549/ATCC细胞系相关产品:DU-4475细胞、ReNcell CX细胞、CCD-841CoTr细胞
HEK293A细胞系相关产品:NK62a细胞、Panc 4.03细胞、L-540细胞
NCIH522细胞系相关产品:Pa16C细胞、CAL 120细胞、OVCAR433细胞
U-937细胞系相关产品:MPC 11细胞、JM细胞、Epstein-Barr-2细胞
U-937细胞系相关产品:MPC 11细胞、JM细胞、Epstein-Barr-2细胞
H-660细胞系相关产品:P3X63细胞、WM266mel细胞、Y3-Ag123细胞
MDA-231细胞系相关产品:HOS(TE85)细胞、MNNG/HOS Clone F-5细胞、OC 316细胞
JurkatE6-1细胞系相关产品:Walker-256-TC细胞、NR8383.1细胞、28SC细胞
Centre Antoine Lacassagne-27细胞系相关产品:MDA435细胞、HIT-T15细胞、C17.2细胞
HIEC6细胞系相关产品:JeKo-1细胞、Ramos-RA1细胞、LNCaP FGC细胞
HPDE6c7细胞系相关产品:B16F1细胞、BCPAP细胞、RCC 786-O细胞
SNU-354细胞系相关产品:SK RC 20细胞、Ketr-3细胞、NCTC-1469细胞
SNU-520细胞系相关产品:H-1648细胞、H-460细胞、TE-3A细胞
DoTc2 4510细胞系相关产品:COLO201细胞、SACC-83细胞、T-47-D细胞
Gerner 7666细胞系相关产品:Hs 821.T细胞、RT 112细胞、HEK 293A细胞
MV-4:11细胞系相关产品:SUM-159-PT细胞、FHs74 Int细胞、H-1755细胞
ME1细胞系相关产品:TE9细胞、Tb 1 Lu (NBL-12)细胞、NCI-H2228细胞
TOV21G细胞系相关产品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4细胞、PANC-1细胞、SNU398细胞
H1404细胞系相关产品:He-La细胞、Hs-343-T细胞、PT-67细胞
NPA87-1细胞系相关产品:SUM 52PE细胞、Y3细胞、HT 1376细胞
A-704细胞系相关产品:CEM C7细胞、HCV29细胞、NCI-H676B细胞
HRA 19细胞系相关产品:Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative细胞、NCI-H2444细胞、L02细胞
Farage Original Line细胞系相关产品:IOSE-Van细胞、HO1N1细胞、HEL 299细胞
SK_HEP1细胞系相关产品:WIL2 S细胞、Panc 03.27细胞、Hk-2细胞
SF539细胞系相关产品:K562细胞、SJ-Rh 30细胞、3T3NIH细胞
Colon26细胞系相关产品:ABE8.1/2细胞、TE 85.T细胞、BCECs细胞
HFF-1 Cell:人包皮成纤维细胞系
32D:cl3细胞系相关产品:Farage OL细胞、LS174细胞、HepG2/C3A细胞
CCRF/CEM细胞系相关产品:M-1细胞、PL 5细胞、DHBE细胞
MM6细胞系相关产品:Kit225细胞、Rabbit Kidney 13细胞、C3A细胞
SW 1116细胞系相关产品:WM239A细胞、PF382细胞、MCF-12A细胞
LN-229细胞系相关产品:RGCs细胞、786-0细胞、hSCC-25细胞
BALB/3T3 (clone A31)细胞系相关产品:OVCAR5细胞、MUTZ3细胞、BNL CL2细胞
SW13细胞系相关产品:NCIH1436细胞、WERI-Rb1细胞、hTERT-HME-1细胞
SNU368细胞系相关产品:NB-4细胞、GM02219细胞、Detroit562细胞
SNUC1细胞系相关产品:HSC3细胞、PY8119细胞、AML-EOL-1细胞
SK-Mel 1细胞系相关产品:Hs 683细胞、KYSE 140细胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1细胞
UCLA-SO-M21细胞系相关产品:NK92MI细胞、STO细胞、MV-3细胞
QBC(939)细胞系相关产品:HSC(Human Schwann)细胞、SKML-28细胞、HEK-A细胞
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