"WI-38 Cell:人胚肺成纤维细胞系
细胞形态:成纤维细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:LeonardHayflick建系;有限传代细胞系;寿命为50±10代(倍增时间24h);来自妊娠3个月的正常胚胎肺组织。该细胞系是个用于人制备的人二倍体细胞;培养基中添加TNFα可以加快细胞生长。
F442-A细胞系相关产品:MOLT-16细胞、DH 82细胞、UCLA-SO-M14细胞
SKMEL-24细胞系相关产品:MDA-134细胞、AE 1201细胞、MV4II细胞
NCI-H1618细胞系相关产品:3396细胞、H-1417细胞、SNU-1细胞
WM 239-A细胞系相关产品:BCP1细胞、H-2106细胞、TE353.SK细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
WI-38 Cell:人胚肺成纤维细胞系
如何把细胞养的形态更好更漂亮。1.不同的细胞,喜欢的环境是不一样的。这个不仅仅是说培养基的不同,还有就是细胞生长的空间密度问题。有一些细胞是数量多一点比较好生长,生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好,譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞,生长速度非常得快,贴壁速度很快,所以传代时就应该留很少量的细胞,这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长,而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候,细胞形态基本上就会差了,老化的会比较多,对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。2.对于有些人总是会遇到养的细胞形态怎么都不好的问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞,如果细胞形态不好,(或者细胞形态不清晰,表面似有异物等)可以在传代的时候进行如下操作:首先,倒掉旧的培养基,加入3ml新的培养基(有无血清的都可)洗涤一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培养基,进行预吹打,控制吹打力度,轻轻地大概沿着瓶底过一遍,然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。(巨噬细胞我们只吹打,不消化的);其次,把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内,培养瓶事先加入培养基,放入培养箱内培养,按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次,20分钟,30分钟观察一次。选择一个时间点,已经有部分细胞贴壁的情况下,重新置于洁净台,底面朝上迅速倒出其中的培养基,加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。我称之为“二传”。呵呵。如果一次效果还不理想,可重复多次。直到找到细胞完美形态。其中要注意,结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。3.关于培养瓶内加入培养基的量的问题。这个是要靠自己去摸索你所养的细胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些细胞反而是培养基少一点相反细胞形态会长得比较好。(可能也是竞争很大,有优胜劣汰吧。呵呵。)对于生长速度快的细胞,易生长的细胞加少一点培养基细胞形态会更好。但是要注意换液掌握。4.关于选择培养瓶的问题。个人发现生长速度快的细胞在玻璃瓶内生长的状态会比一次性相对好一些。而对于同一种细胞,在其生长旺盛快速的时期在玻璃瓶内的生长状态也比内好。这可能是因为比玻璃瓶更容易贴壁。生长速度快的细胞在这种相对“更安逸”的环境里反而长得状态不如玻璃瓶好。所以对于生长速度慢的细胞如果想要更漂亮的细胞状态,比玻璃瓶会好,对于生长速度慢的细胞,玻璃瓶则会更好。同样,对于同一种细胞,在其生长速度慢的时候,会好一点,比如刚刚复苏的时候,或者原代培养的时候。而在其生长旺盛的时候,玻璃瓶则相对会好一点。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:4传代;2-3天换液1次
细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
16HBE14o-细胞系相关产品:Panc 3.27细胞、SGC7901细胞、HeLa/S3细胞
NPA-87细胞系相关产品:RC92A细胞、H-4细胞、SUPT-1细胞
HS-940-T细胞系相关产品:Hs940-T细胞、WILL-2细胞、HSF2细胞
Pfeiffer细胞系相关产品:L-Wnt-3A细胞、OCILY7细胞、MFHL-2细胞
P388-D1细胞系相关产品:SCL-I细胞、SU8686细胞、CoCL3细胞
细胞生长特性:贴壁生长
WI-38 Cell:人胚肺成纤维细胞系
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。
细胞形态特性:成纤维细胞样
KLM-1细胞系相关产品:RPE1细胞、KALS1细胞、MEL细胞
Colon38细胞系相关产品:H125细胞、RC13细胞、JF305细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6细胞系相关产品:Tsup-1细胞、P3X63Ag8细胞、HTori-3.1细胞
MeSoTheliOma-211H细胞系相关产品:BIU-87细胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2细胞、SU-DHL-1细胞
AC16 [Human hybrid]细胞系相关产品:SU86.86细胞、L2细胞、L23/P细胞
Pt-K1细胞系相关产品:HCC0070细胞、Kasumi-6细胞、NCI-H1373细胞
SKRC 39细胞系相关产品:JM1细胞、HOCF细胞、NCI H69细胞
WI-38 Cell:人胚肺成纤维细胞系
Pt K1细胞系相关产品:Ly18细胞、PZ-HPV-7细胞、H2452细胞
HET-1A细胞系相关产品:GM3190细胞、Caco2-BBE细胞、LX-2细胞
MB 157细胞系相关产品:UPCI:SCC090细胞、Z-138细胞、Hepatoma 22细胞
X63Ag8.653细胞系相关产品:HT144mel细胞、Leydig细胞、SW-962细胞
HMC3细胞系相关产品:LC-1Sq细胞、CG-4细胞、HConEpic细胞
G361细胞系相关产品:EBNA-293细胞、H-1755细胞、Ly10细胞
SUP-T1细胞系相关产品:N-2a细胞、A-431细胞、SN12C细胞
HCCC-9810细胞系相关产品:ES2细胞、CAL-148细胞、MDA-MB-231细胞
PC2细胞系相关产品:Nb2细胞、HOP92细胞、HLEB3细胞
PC2细胞系相关产品:Nb2细胞、HOP92细胞、HLEB3细胞
H-446细胞系相关产品:U251-MG细胞、Hs 888.T细胞、A9(Hamprecht)细胞
NCIH727细胞系相关产品:NCI-N87细胞、TN5B14细胞、SW1573细胞
Giant Cell Tumor细胞系相关产品:L- cell细胞、NCI-H69细胞、E.L.4细胞
hTERT-RPE1细胞系相关产品:Hs821T细胞、STTG1细胞、DR2R 1610细胞
hs 68细胞系相关产品:MSB1细胞、MOLP-2细胞、RBL2H3细胞
MEC-1细胞系相关产品:HPAF-I细胞、HCC-2935细胞、NCI-H889细胞
T-47-D细胞系相关产品:BTI-TN5B1-4细胞、Panc_08_13细胞、KMST6细胞
SNU-449细胞系相关产品:NCI-H2347细胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)细胞、TPC1细胞
SW-620细胞系相关产品:COR-L51细胞、CHO/dhFr-细胞、SW1088细胞
NCI-H2081细胞系相关产品:NCI-H102细胞、Mouse podocyte细胞、Evsa-T细胞
LAN1细胞系相关产品:HCE细胞、SKG-IIIa细胞、Mac-1细胞
TM-3细胞系相关产品:LS174细胞、3T3-A31细胞、746T细胞
HEK-EBNA细胞系相关产品:SK-ES细胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436细胞
UPCISCC090细胞系相关产品:LA-4 [Mouse lung adenoma]细胞、2PK-3细胞、3T3F442A细胞
SKG3A细胞系相关产品:IOSE29细胞、B-3细胞、SW-48细胞
BNL.CL2细胞系相关产品:TFK-1细胞、MA-104细胞、NCIH244细胞
UPCI-SCC-090细胞系相关产品:U20-S细胞、R3/1细胞、OVMANA细胞
MT-2细胞系相关产品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16细胞、SKNO-1细胞、RPTEC TERT1细胞
Human Liver-7702细胞系相关产品:JiyoyeP-2003细胞、ATDC5细胞、LICR-HN-6细胞
ARIP细胞系相关产品:AR4-2J细胞、H1666细胞、CFSC-2G细胞
JJN3细胞系相关产品:DrG细胞、SK-RC 39细胞、MiaPaca.2细胞
MFE 296细胞系相关产品:SK UT 1细胞、RPMI-7666细胞、NCI-SNU-1040细胞
C4-2B细胞系相关产品:H-II-E-C3细胞、FRO81-2细胞、LCD细胞
SK-MEL-2细胞系相关产品:SNU638细胞、Mouse Bladder Tumor line-2细胞、CCD 841 CoN细胞
MC9细胞系相关产品:CCD1112Sk细胞、KYSE-180细胞、0V-1063细胞
TE-10细胞系相关产品:NGEC细胞、SK-N-BE(2)-C细胞、SUPB-15细胞
293-EBNA细胞系相关产品:Calf Pulmonary Artery Endothelial细胞、NRK49F细胞、CBRH-7919细胞
Kasumi-1细胞系相关产品:NCIH1623细胞、HL-60 Clone 15细胞、NCI-H1155细胞
SUNE1细胞系相关产品:GM06141B细胞、NCIH1930细胞、NCIH446细胞
MDA-MB-134细胞系相关产品:OVCA432细胞、Tu212细胞、624-mel细胞
HCC38细胞系相关产品:NCI-H2171细胞、Hs 766.T细胞、MGC803细胞
KYSE450细胞系相关产品:NALM 6细胞、HEK293FT细胞、KMBC细胞
Caco-2/BBe细胞系相关产品:TB-1 Lu细胞、NB4细胞、TE 671细胞
WI-38 Cell:人胚肺成纤维细胞系
OE-19细胞系相关产品:Nthy-ori 3.1细胞、CTLA4Ig-24细胞、JM-1细胞
RPMI-2650细胞系相关产品:BC-021细胞、NHLF细胞、H-1648细胞
B-3细胞系相关产品:COLO-738细胞、Hs578Bst细胞、H-2452细胞
Hep 3B2_1-7细胞系相关产品:SMMC 7721细胞、QGP 1细胞、HEH2细胞
Balb/3T3-4-Cl31细胞系相关产品:PL-5细胞、Tb1.Lu细胞、CHG5细胞
MESSA-DX5细胞系相关产品:GLC-15细胞、PLA801D细胞、OCI-AML2细胞
RSC-364细胞系相关产品:NCI-H-128细胞、KMBC细胞、MES-SA细胞
Colo741细胞系相关产品:KYSE-410细胞、EnCa1细胞、TE671细胞
KATOIII细胞系相关产品:NCI-841细胞、Z310细胞、NIH:OVCAR-4细胞
PLC/PRF5细胞系相关产品:KYSE 510细胞、SUPB15细胞、LC1sq细胞
H526细胞系相关产品:PLCPRF5细胞、HMy2.CIR细胞、GTL-16细胞
A431细胞系相关产品:HS688AT细胞、HEC-1-A细胞、DH 82细胞
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