"SW527 Cell:人乳腺癌细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:详见相关文献介绍
NOMO1细胞系相关产品:Keio University-19-19细胞、Evsa T细胞、Kit 225 K6细胞
UMNSAH/DF-1细胞系相关产品:NCM-460细胞、NCIH1666细胞、H-1993细胞
MDA-436细胞系相关产品:RKOAS451细胞、BNL-CL.2细胞、HUT28细胞
5637细胞系相关产品:2T细胞、H292细胞、SUP T1细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
SW527 Cell:人乳腺癌细胞系
细胞消化过程总结:其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足够了,一般我加300ul。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候,比如tsDC细胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙状移动。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NRK-52E细胞系相关产品:Wistar Institute, Susan Hayflick细胞、Mia PACA 2细胞、PC9细胞
A875细胞系相关产品:SNU182细胞、U2932细胞、H820细胞
Cates 1B细胞系相关产品:KP2细胞、67NR细胞、A549细胞
NTera2 cl.D1细胞系相关产品:PaTu8988s细胞、253J B-V细胞、CoC1细胞
GNM细胞系相关产品:SW579细胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1细胞、SK.MEL.5细胞
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
SW527 Cell:人乳腺癌细胞系
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。
细胞形态特性:详见细胞说明书
A673细胞系相关产品:MKN1细胞、SHI-1细胞、UCW 100细胞
NCIH1869细胞系相关产品:H2.35细胞、NCI-H345细胞、NCI-H-295细胞
MDA-MB 468细胞系相关产品:U373细胞、SKMEL5细胞、ARPE19细胞
SHP-77细胞系相关产品:NG108-15细胞、COLO-679细胞、Hs-27细胞
SCC 15细胞系相关产品:VeroC1008细胞、NCI-H522细胞、MV4-11细胞
TE671/RD细胞系相关产品:WB-F344细胞、NCIH345细胞、SNU739细胞
NE1-E6E7细胞系相关产品:SNU668细胞、H-1105细胞、MOLT 4细胞
SW527 Cell:人乳腺癌细胞系
PGBE1细胞系相关产品:Simpson细胞、Clone 15 HL-60细胞、C6661细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-361细胞系相关产品:OCILY10细胞、RCC23细胞、CRFK细胞
NRK clone 52E细胞系相关产品:PBL细胞、ARO81细胞、NIH:OVCAR-5细胞
253JBV细胞系相关产品:BT549细胞、Hs 578.T细胞、BJ [Human fibroblast]细胞
hUC-MSC细胞系相关产品:NCIH378细胞、CHO-ori细胞、MXI细胞
CHO-K1细胞系相关产品:V 79细胞、MCF 7细胞、NCI-HUT-69细胞
MOLT.4细胞系相关产品:H295细胞、A2780S细胞、DCS细胞
WM-239A细胞系相关产品:KYSE 410细胞、BRL-3A细胞、Mel-624细胞
CL34细胞系相关产品:HuP-T4细胞、RCCJF细胞、OCI AML3细胞
CL34细胞系相关产品:HuP-T4细胞、RCCJF细胞、OCI AML3细胞
NCI-H1618细胞系相关产品:3396细胞、H-1417细胞、SNU-1细胞
tdott细胞系相关产品:PANC0813细胞、PC-3M-2B4细胞、U-2932细胞
MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞系相关产品:SHP-77细胞、JF305细胞、SKMEL28细胞
NMCG-1细胞系相关产品:GM00215细胞、TE-32细胞、CAL 62细胞
MDAMB175细胞系相关产品:FCCH1018细胞、Reuber H-35细胞、H292细胞
HA细胞系相关产品:HOS/MNNG细胞、UCW 100细胞、SCC VII细胞
HC-11细胞系相关产品:Hca-F细胞、BT-483细胞、KATO 3细胞
HIEC6细胞系相关产品:JeKo-1细胞、Ramos-RA1细胞、LNCaP FGC细胞
N87细胞系相关产品:HDSMC细胞、Th17细胞、L-M(TK-)细胞
H1688细胞系相关产品:T/G HA VSMC细胞、KLM1细胞、HEL-299细胞
NCI-SNU-520细胞系相关产品:SUM-159细胞、H-2029细胞、NCIH1770细胞
NCI-H1341细胞系相关产品:SNU-407细胞、Case 3细胞、Dysplastic Oral Keratinocyte细胞
OLN-93细胞系相关产品:SRA 01/04细胞、C3H/10T1/2细胞、NS1/1-Ag4.1细胞
EC-109细胞系相关产品:HRIF细胞、P3-X63Ag8.653细胞、SUDHL-1细胞
H-719细胞系相关产品:Caki2细胞、H1155细胞、HuT 102细胞
AM细胞系相关产品:HFLS-RA细胞、GLC-15细胞、HO1N1细胞
B16F10细胞系相关产品:CFPAC细胞、SupB15WT细胞、NB1RGB细胞
Raji细胞系相关产品:VAESBJ细胞、Hs737T细胞、HGC-27细胞
LOU-NH-91细胞系相关产品:MCF-7/AdrR细胞、SUP-M2细胞、C-33-A细胞
H-196细胞系相关产品:HCC941122细胞、NCIH510细胞、X63Ag8-653细胞
Psi2 DAP细胞系相关产品:NCIH128细胞、A9(Hamprecht)细胞、ML2细胞
Walker-Ca.256细胞系相关产品:Tu 177细胞、WSU-DLCL(2)细胞、KNS42细胞
Tu686细胞系相关产品:UCLA-RO 81细胞、SUM102细胞、RPMI8402细胞
HCCLM6细胞系相关产品:LM3细胞、639 V细胞、Capan 2细胞
GM3570细胞系相关产品:HS-729细胞、OCILY10细胞、GM02132细胞
SF126细胞系相关产品:KMH-2细胞、MCA 205细胞、MKN 7细胞
Ca759细胞系相关产品:130T细胞、C3H10T1/2CL8细胞、OAC-P4C细胞
OCI-LY-7细胞系相关产品:HEC-251细胞、SK-ES-1细胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15细胞
A-375细胞系相关产品:H647ell细胞、A.704细胞、Hs683T细胞
MDA MB 361细胞系相关产品:H3255_DA细胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1细胞、HFF-1细胞
HEC-151细胞系相关产品:HepG2-luc细胞、H358细胞、T2 (174 x CEM.T2)细胞
HT 144细胞系相关产品:CNE1-LUC细胞、UMC-11细胞、PC-9细胞
Calf Pulmonary Artery Endothelial细胞系相关产品:GTL16细胞、T47-D细胞、MDA-468细胞
SW527 Cell:人乳腺癌细胞系
751-NA-15细胞系相关产品:SMA-560细胞、SW 480细胞、KYSE 70细胞
STO细胞系相关产品:NCIH1092细胞、WEHI3B细胞、H-146细胞
HO-8910 PM细胞系相关产品:CL-40细胞、H-2227细胞、NCI-H345细胞
BC-028细胞系相关产品:FHC细胞、H446细胞、IAR20细胞
PANC0504细胞系相关产品:ATN1细胞、HIT细胞、SK-MEL-24细胞
BrCL15细胞系相关产品:Hep II细胞、Cates 1B细胞、P388-D1细胞
P3-X63-Ag8.653细胞系相关产品:IMR 32细胞、SMMC 7721细胞、HCC-15细胞
67NR细胞系相关产品:Hs839T细胞、H2195细胞、LLCMK2细胞
LNCaP C4-2B细胞系相关产品:EB1细胞、HCE细胞、MAD109细胞
GM03570E细胞系相关产品:SU-DHL-2细胞、WM-239A细胞、Lu-165细胞
R3/1细胞系相关产品:JS1细胞、NK-10A细胞、HSC2细胞
LOUNH91细胞系相关产品:CCD-112 CoN细胞、H-2195细胞、UM2细胞
"